高中生物第五章第二節(jié)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增NDA片段新人教版選修

關(guān)于高中生物第五章第二節(jié)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增NDA片段新人教版選修第1頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日一、基礎(chǔ)知識(shí)1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第2頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第3頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第4頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第5頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位3、脫氧核苷酸結(jié)構(gòu)（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第6頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日OOPOHO堿基OOHOOPOHOOH堿基5’3’3’5’堿基脫氧核糖磷酸基團(tuán)堿基脫氧核糖堿基脫氧核糖5’3’多脫氧核苷酸鏈結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖第7頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日連接ATGC第8頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日連接ATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）第9頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）第10頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）3'端5'端第11頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第12頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈（即一條鏈為3′→5′，另一條鏈為5′→3′）盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)。第13頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)②脫氧核糖與磷酸交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架；堿基排列在鏈的內(nèi)側(cè)。①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈（即一條鏈為3′→5′，另一條鏈為5′→3′）盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)。第14頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日③兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵連接起來(lái)，形成堿基對(duì)。堿基對(duì)的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定與胸腺嘧啶配對(duì)，鳥嘌呤一定同胞嘧啶配對(duì)。4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第15頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（二）DNA的復(fù)制2、時(shí)期3、場(chǎng)所1、概念第16頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日2、時(shí)期1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程（二）DNA的復(fù)制3、場(chǎng)所第17頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日2、時(shí)期有絲分裂間期、減數(shù)第一次分裂前的間期1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程（二）DNA的復(fù)制3、場(chǎng)所第18頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日2、時(shí)期3、場(chǎng)所細(xì)胞核（主）、線粒體、葉綠體1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程（二）DNA的復(fù)制有絲分裂間期、減數(shù)第一次分裂前的間期第19頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日5、原料6、基本條件4、模板第20頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日5、原料6、基本條件4、模板DNA母鏈第21頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日5、原料脫氧核苷酸6、基本條件4、模板DNA母鏈第22頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日5、原料脫氧核苷酸6、基本條件酶、ATP、原料、模板4、模板DNA母鏈第23頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日7、復(fù)制過(guò)程第24頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日7、復(fù)制過(guò)程①DNA的解旋第25頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日7、復(fù)制過(guò)程①DNA的解旋親代DNA分子利用細(xì)胞提供的能量在解旋酶的作用下氫鍵斷裂，部分雙螺旋鏈解旋為兩條平行的雙鏈第26頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈。因此，DNA復(fù)制需要引物。

第27頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日②RNA引物的合成第28頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日②RNA引物的合成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第29頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日②RNA引物的合成③DNA的生成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第30頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日②RNA引物的合成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物③DNA的生成以DNA單鏈為模板，在DNA聚合酶的作用下，在RNA引物的末端由5′端→3′端合成DNA。第31頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA合成的方向

子鏈由5′

端向3′端延伸第32頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？第33頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？第34頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？雙鏈的解開第35頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？雙鏈的解開控制溫度第36頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA分子的熱變性原理：第37頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA雙鏈單鏈DNA分子的熱變性原理：第38頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第39頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第40頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：解開雙鏈有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ與兩條單鏈的結(jié)合DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第41頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會(huì)失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。第42頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會(huì)失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。托馬斯.布魯克第43頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)第44頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；③四種脫氧核苷酸；④耐高溫的聚合酶；⑤控制溫度，但不需解旋酶。體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)第45頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（三）PCR的反應(yīng)過(guò)程1、PCR的反應(yīng)步驟第46頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日1、PCR的反應(yīng)步驟

PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為三個(gè)基本步驟──變性、復(fù)性和延伸（三）PCR的反應(yīng)過(guò)程第47頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日①變性（模板DNA解旋）模板DNA加熱至900C以上時(shí)，模板DNA雙鏈解離，成為單鏈。2、循環(huán)過(guò)程第48頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日靶序列靶序列PCR循環(huán)第一步：加熱變性第49頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日②復(fù)性（退火）溫度下降到50℃左右，兩種引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。第50頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日PCR循環(huán)第二步：引物與靶序列退火第51頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日③延伸溫度上升到72℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，以脫氧核苷酸為原料，以母鏈為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則，合成一條新的DNA鏈第52頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日PCR循環(huán)第三步：引物延伸第53頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日靶序列

靶序列第1個(gè)PCR循環(huán)完成后：得到兩個(gè)拷貝的靶序列第54頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第55頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（1）PCR循環(huán)——變性95℃變性第56頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第57頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日55℃復(fù)性（2）PCR循環(huán)—復(fù)性第58頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（3）PCR循環(huán)—延伸第59頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（3）PCR循環(huán)—延伸第60頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（3）PCR循環(huán)—延伸第61頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日（3）PCR循環(huán)—延伸第62頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第63頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第64頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第65頁(yè)，共70頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第66頁(yè)，共70頁(yè)，202