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學必求其心得,業(yè)必貴于專精學必求其心得,業(yè)必貴于專精學必求其心得,業(yè)必貴于專精課時訓練37胚胎工程課時訓練第73頁

1.(2018浙江名校協作體9月試題)回答與胚胎工程和基因工程有關的問題。(1)將人的胰島素基因導入牛受精卵中,常用方法獲得目的基因,再用法導入受體細胞。若受體細胞是牛的乳腺細胞,獲得重組細胞后,利用技術才能獲得轉基因牛。

(2)將成功導入重組DNA分子的多個受精卵進行至早期囊胚,再分別移入的母牛的輸卵管或子宮角繼續(xù)發(fā)育。

(3)若供體牛一次排卵較少,可用激素處理促其;若篩選過程中只有極少數受精卵導入成功,可在時期進行胚胎分割以獲得多個胚胎。

答案(1)化學(人工)合成(或PCR擴增)顯微注射核移植(克隆)(2)胚胎體外培養(yǎng)同期發(fā)情(3)超數排卵卵裂球(早期囊胚)解析(1)人的胰島素基因序列是已知的,通常用人工合成的方法獲得目的基因,再用顯微注射法導入受體細胞,形成重組細胞。形成重組細胞后要利用核移植技術才能獲得轉基因牛.(2)通常移植的最適宜時期是發(fā)育到8細胞以上的胚胎,如早期囊胚,再移入同期發(fā)情母牛子宮中繼續(xù)發(fā)育。(3)要獲得更多的卵細胞,可通過激素處理促進母牛超數排卵。胚胎分割的需要對卵裂球(或早期囊胚)進行分割.2。(2018浙江金麗衢十二校高三8月第一次聯考)下圖為綠色熒光小鼠制備流程圖,Gfp是綠色熒光蛋白基因,請分析回答下列問題.(1)為構建表達載體,通常用相同的限制性核酸內切酶切割Gfp基因和Neo所在的載體,保證兩者產生相同的粘性末端,但弊端是Gfp基因和Neo所在的載體在連接時可能會發(fā)生,表達載體與染色體DNA整合后能使Gfp基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達,從而完成過程。

(2)圖中載體上的Neo基因是一種抗生素抗性基因,圖中步驟③所用的G418是一種抗生素(對細胞有毒害作用),添加G418的目的是。

(3)圖中為促進胚胎干細胞增殖,培養(yǎng)過程中需加入抑制分化。

(4)圖中步驟⑤要將細胞注射入圖中囊胚的部分,圖中步驟⑥胚胎移植前要對代孕母鼠b進行處理。

(5)可以使用法在蛋白質水平上鑒定小鼠是否存在綠色熒光蛋白。

答案(1)自身環(huán)化轉化(2)鑒定和篩選出導入目的基因的胚胎干細胞(3)胚胎成纖維細胞(飼養(yǎng)層)(4)內細胞團同期發(fā)情(5)抗原—抗體雜交解析(1)用同一種限制性核酸內切酶切割載體和目的基因,容易形成自身環(huán)化,故需要進行篩選。把重組分子導入特定的宿主細胞的過程叫轉化。(2)抗生素抗性基因用于鑒定和篩選導入目的基因的胚胎干細胞。(3)用于飼養(yǎng)層的細胞一般是胚胎成纖維細胞,因為胚胎成纖維細胞可以分泌一些能抑制細胞分化的物質,滿足促進干細胞生長的同時抑制干細胞分化的條件。(4)胚胎干細胞通過顯微注射注入內細胞團,移植時要對代孕母鼠b進行同期發(fā)情處理。(5)目的基因有沒有表達可通過抗原—抗體雜交進行檢測。3.如圖為荷斯坦小奶牛的繁殖過程,請據圖回答下列問題。(1)克隆動物培育過程與圖示繁殖過程相比,特有的技術手段是技術,這兩種動物繁殖的方式相比,實質性的區(qū)別為前者是,后者是.

(2)一般用激素對供體母牛做超數排卵處理,用激素處理受體牛以便接受胚胎.

(3)如果培育轉基因荷斯坦奶牛,可采用技術將藥用蛋白基因導入中,在檢測受體細胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因時,常采用的方法是技術,根據是否顯示出雜交帶進行鑒定。

(4)上述技術應用于人類所得到的嬰兒通常叫,在生育方面的積極意義是。

答案(1)核移植無性生殖有性生殖(2)促性腺孕(3)顯微注射受精卵DNA分子雜交(4)試管嬰兒解決患不孕不育癥夫婦的生育問題4.在畜牧生產中,人們利用克隆技術和試管動物技術促進優(yōu)良畜群繁育并取得了顯著成績,回答以下問題。(1)克隆高產奶牛:從供體高產奶牛體內獲得體細胞后,對其進行的初次培養(yǎng)稱為;用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞,原因是10代以內細胞能保持正常;將供體細胞核注入內,形成重組細胞,并促進其發(fā)育成早期胚胎,之后將胚胎移入代孕母牛體內,從而獲得與(填“供體奶?!被颉笆荏w奶?!?遺傳物質基本相同的犢牛。

(2)試管牛的培育:將體外培養(yǎng)成熟的卵母細胞與經處理的精子在體外受精后,應將受精卵移入一系列含不同成分的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),通常將胚胎培養(yǎng)至期,取細胞做DNA分析和性別鑒定,并將胚胎移入同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內,使之繼續(xù)發(fā)育為新個體。

答案(1)原代培養(yǎng)二倍體核型去核卵細胞供體奶牛(2)獲能囊胚滋養(yǎng)層解析(1)對動物細胞進行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)時,大部分細胞能夠保持正常的二倍體核型。將體細胞的核注入去核卵細胞,形成重組細胞可用于動物個體的克隆??寺〉膭游锏倪z傳物質主要來自核供體,因此獲得的幼體與供體奶牛遺傳物質基本相同。(2)進行體外受精操作,需要將成熟的卵母細胞與獲能的精子混合,進而受精獲得受精卵。獲得的受精卵進行體外胚胎培養(yǎng),配制一系列不同營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基滿足早期胚胎不同發(fā)育階段的需要,將早期胚胎培養(yǎng)至囊胚階段后,可取滋養(yǎng)層細胞進行DNA分析和性別鑒定,以獲得所需性別的個體。5??蒲泄ぷ魅藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)通過胚胎工程克隆鼠,以供醫(yī)學治療需要,其技術流程如下圖。(1)圖中的X細胞可以稱為細胞.

(2)圖中的X細胞依次經后由代孕母鼠產生克隆鼠。

A。核移植、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植B.胚激活、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植C.胚胎培養(yǎng)、胚激活、胚胎移植D。核移植、胚激活、胚胎體外培養(yǎng)(3)在克隆胚胎的培養(yǎng)基中以作為能源物質。

(4)為了提高已有胚胎的利用率,可采取技術.進行胚胎移植時,代孕母鼠對移入子宮的克隆胚胎基本上不發(fā)生,這為克隆胚胎在代孕母鼠體內的存活提供了可能.

(5)若分離出內細胞團進行胚胎干細胞培養(yǎng),當干細胞達到一定的密度時,需進行培養(yǎng)以得到更多數量的細胞.還可以對胚胎干細胞進行,通過一系列的培育過程,以獲得適合人體移植的動物器官,減弱或消除排斥反應.

答案(1)重組(2)B(3)葡萄糖(4)胚胎分割免疫排斥反應(5)傳代基因敲除解析(1)圖中的X細胞是去核卵細胞和內細胞團的細胞核形成的重組細胞。(2)圖中的X細胞依次經胚激活、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植,后由代孕母鼠產生克隆鼠.(3)動物胚胎培養(yǎng)基中含有葡萄糖,在克隆胚胎的培養(yǎng)基中以葡萄糖作為能源物質。(4)為了提高已有胚胎的利用率,可釆取胚胎分割技術.進行胚胎移植時,代孕母鼠對移入子宮的克隆胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應,這為克隆胚胎在代孕母鼠體內的存活提供了可能。(5)若分離出內細胞團進行胚胎干細胞培養(yǎng),當干細胞達到一定的密度時,需進行傳代培養(yǎng)以得到更多數量的細胞。為獲得適合人體移植的動物器官,還可以對胚胎干細胞進行基因敲除,以減弱或消除對克隆器官的排斥反應。6.下圖為胚胎工程相關過程示意圖,請回答下列問題.(1)受精大體包括、精子附著于卵膜、精卵質膜融合等幾個過程。

(2)①過程的技術是,②過程需要將剝離出來,并用酶消化成單個細胞。③過程需要在培養(yǎng)皿底部加入胚胎成纖維細胞,形成,否則就會導致出現過程A即。

(3)胚胎干細胞是一種未分化細胞,具有和二倍體核型。

(4)干細胞研究具有廣闊的應用前景,如將某抗性基因導入胚胎干細胞培育出抗病力強的家畜品種,該操作需要用到的工具有。

答案(1)精卵識別(2)胚胎體外培養(yǎng)內細胞團飼養(yǎng)層細胞分化(3)發(fā)育全能性(4)限制性核酸內切酶、DNA連接酶和載體解析(1)受精過程包括精卵識別、精子附著于卵膜、精卵質膜融合等過程。(2)分析圖示可知,①表示早期胚胎的發(fā)育,所采用的技術是胚胎體外培養(yǎng)技術,②過程表示獲得囊胚中的胚胎干細胞,需要將囊胚的內細胞團剝離出來,利用胰蛋白酶分解成單個細胞。③表示胚胎干細胞培養(yǎng),培養(yǎng)胚胎干細胞需抑制胚胎干細胞的分化,一般在培養(yǎng)皿底部加入胚胎成纖維細胞,形成飼養(yǎng)層。(3)胚胎干細胞是一種未分化的細胞,一般具有發(fā)育全能性和二倍體核型。(4)基因工程中,操作工具是限制性核酸內切酶、DNA連接酶和載體。7.應用基因工程和克隆技術,將人的血清白蛋白基因轉入奶牛細胞中,利用牛的乳汁生產血清白蛋白,既提高了產量,又有了安全保障。下圖是利用奶牛乳汁生產人類血清白蛋白的流程圖,據圖回答下列問題.(1)上述過程涉及的技術有(至少三個)。

(2)一般情況下,良種奶牛所產生的能用于體外受精的卵母細胞往往數量不足,請舉出一種可以獲得更多卵母細胞的方法:。

(3)圖中①一般經處理可以得到③,在①→③的培養(yǎng)過程中,需向培養(yǎng)液中通入一定量的CO2,其目的是,將血清白蛋白基因導入奶牛細胞中最為有效的方法是。

(4)在胚胎發(fā)育過程中,囊胚時期的細胞將發(fā)育成幼體的各種組織。

(5)a過程中培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽、維生素、氨基酸、核苷酸、葡萄糖等營養(yǎng)成分外,還要添加激素和。③到⑥體現了。要實現⑥批量生產血清白蛋白,則要求①的性別是。

答案(1)核移植、胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植(2)用促性腺激素處理良種母牛,使其超數排卵(3)胰蛋白酶維持適宜的pH顯微注射法(4)內細胞團(5)動物血清動物細胞的細胞核具有全能性雌性解析(1)圖中的過程涉及轉基因技術、動物細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植等技術。(2)為了獲得更多的卵細胞,可以注射促性腺激素,讓母牛超數排卵。(3)動物組織中獲得單個細胞的方法有胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理法。動物細胞培養(yǎng)時,加入一定量的CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定;將目的基因導入動物細胞中,通常用顯微

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