《微生物學(xué)與免疫學(xué)》8-王瑩抗生素

微生物在藥學(xué)中的應(yīng)用王瑩微生物學(xué)教研室ywang@整理課件一、現(xiàn)代微生物藥物研究的新特點(diǎn)

1.重視新的篩選模型和方法的設(shè)計(jì)；2.擴(kuò)大微生物代謝產(chǎn)物的研究范圍；

設(shè)計(jì)到酶抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、降血脂藥物、抗寄生蟲藥物等等。3.重視新菌種的資源開發(fā)；

重視稀有放線菌、海洋微生物和極端微生物的開發(fā)。4.新技術(shù)的大量應(yīng)用。

主要有分離技術(shù)、光譜分析、高通量篩選和計(jì)算機(jī)檢索等。整理課件目前的醫(yī)藥生產(chǎn)中已廣泛利用微生物發(fā)酵來制造各種藥物。在工業(yè)微生物學(xué)領(lǐng)域，發(fā)酵是指用培養(yǎng)微生物制造工業(yè)產(chǎn)品的過程。廣泛的發(fā)酵概念是指用培養(yǎng)生物細(xì)胞（或一些酶類）制得產(chǎn)物的過程。發(fā)酵過程包括了生物細(xì)胞的培養(yǎng)和產(chǎn)物合成的過程。二、工業(yè)發(fā)酵的菌種和發(fā)酵方式整理課件樣品三角瓶懸液試管稀釋平板分離挑選單菌落液體發(fā)酵從自然環(huán)境篩選菌種的流程發(fā)酵產(chǎn)量分析誘變平板分離放大和生產(chǎn)多次重復(fù)整理課件I.抗生素

1929年，F(xiàn)leming首先從青霉菌中發(fā)現(xiàn)青霉素。青霉素的誕生有著劃時(shí)代的意義

整理課件青霉菌青霉菌常造成食物發(fā)霉生長在培養(yǎng)基上的青霉菌菌落顯微鏡下的青霉菌菌絲整理課件開發(fā)青霉素的功臣SirAlexanderFlemingErnstChainHowardFlorey整理課件抗生素發(fā)展大事記1929年，F(xiàn)leming首先從青霉菌中發(fā)現(xiàn)青霉素；1940年，F(xiàn)lorey和Chain采用溶媒萃取法獲得青霉素。1944年，Waksman在鏈霉菌中發(fā)現(xiàn)鏈霉素；自本世紀(jì)40年代以來，已找到上萬種新抗生素，合成了近10萬種半合成抗生素，但其中在臨床上常用的僅100余種，連同其衍生物約300余種。整理課件I.抗生素Antibiotics:是生物（包括微生物、植物和動(dòng)物）在生命活動(dòng)過程中產(chǎn)生的（或其他方法獲得），能在低微濃度下有選擇性地抑制或影響它種生物機(jī)能的有機(jī)物質(zhì)。整理課件根據(jù)生物來源分細(xì)菌產(chǎn)生：綠膿菌藍(lán)素、多粘菌素、桿菌肽真菌產(chǎn)生：頭孢菌素放線菌產(chǎn)生：鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素高等植物產(chǎn)生：蒜素、地衣酸動(dòng)物產(chǎn)生：紅細(xì)胞素根據(jù)作用對(duì)象分抗G+—Pen等抗G-—鏈霉素等廣譜—四環(huán)素、紅霉素、卡那霉素、頭孢菌素等?？拐婢獌尚悦顾谺、制霉菌素、灰黃霉素等?？鼓[瘤—阿霉素、絲裂霉素、柔紅霉素等。一、抗生素分類整理課件由于不同微生物之間的細(xì)胞化學(xué)結(jié)構(gòu)和代謝的差異，不同的抗生素的抗菌譜各異。整理課件根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)分-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、多烯類、多肽類、苯烴基胺類、蒽環(huán)類、其他根據(jù)作用機(jī)制分根據(jù)生物合成途徑分整理課件二、抗生素傳統(tǒng)分離方法土壤標(biāo)本涂布于平板培養(yǎng)基培養(yǎng)無菌水稀釋挑取單菌落擴(kuò)增培養(yǎng)培養(yǎng)觀察抑菌圈鑒定精制臨床前研究濾紙片法篩選臨床研究整理課件抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成、破壞細(xì)胞質(zhì)膜、作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化、抑制蛋白質(zhì)和核酸合成等

抑制微生物的生長或殺死它們?nèi)?、抗生素作用機(jī)制整理課件主要抗生素的作用模型整理課件-內(nèi)酰胺類抗生素——抑制細(xì)胞壁合成注意：只對(duì)生長繁殖中的細(xì)胞有作用，對(duì)靜息細(xì)胞無作用細(xì)胞壁肽聚糖合成第三階段：肽聚糖鏈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)肽酶催化交聯(lián)-內(nèi)酰胺類抗生素競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合細(xì)胞壁合成受抑制轉(zhuǎn)肽酶無法催化交聯(lián)整理課件四、抗藥性一、細(xì)菌抗藥性的基本概念獲得抗藥性（通過遺傳變異獲得）天然抗藥性（微生物天然對(duì)藥物不敏感）二、細(xì)菌抗藥性產(chǎn)生的遺傳機(jī)制1、微生物的染色體或質(zhì)粒上有編碼抗生素耐藥性的遺傳信息2、自發(fā)突變加藥物選擇3、細(xì)菌間抗藥基因的轉(zhuǎn)移三、細(xì)菌抗藥性產(chǎn)生的生化機(jī)制1、產(chǎn)生使抗生素結(jié)構(gòu)改變的酶即鈍化酶；2、抗生素作用靶位的改變；3、細(xì)胞膜通透性改變。整理課件

避免耐藥菌傳播（醫(yī)院）合理用藥（1）抗生素可不用盡量不用，使用時(shí)應(yīng)足量。（2）合理聯(lián)合用藥抗耐藥菌新抗的尋找，如酶抑制劑抗生素等。耐藥機(jī)制的研究—耐藥規(guī)律尋找，有助于合理用藥。耐受性的控制整理課件五、抗生素效價(jià)和效價(jià)單位檢品的抗菌活性標(biāo)準(zhǔn)品的抗菌活性100%效價(jià)(potency)=檢品的實(shí)際單位數(shù)檢品的標(biāo)示量100%=整理課件抗生素效價(jià)單位(unit,U)重量單位（生物活性部分重量）：1μg≌1U類似重量單位（特定抗生素鹽純品重量）

1μg≌1U重量折算單位（原始活性單位相當(dāng)?shù)募兤分亓繛?U）

ex:Pen0.5988μg≌1U,1mg≌1670U特定單位（特定樣品的某一重量為一定單位）Ex:一批特定桿菌肽1mg≌55U整理課件抗生素效價(jià)測(cè)定方法管碟法，二劑量法整理課件II.藥物體外抗菌試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散法濾紙片法打洞法（挖孔法）管碟法挖溝法連續(xù)稀釋法液體稀釋法斜面稀釋法平板稀釋法整理課件管碟法濾紙片法打洞法整理課件III.藥物制劑的微生物學(xué)檢查無菌制劑的無菌檢查一般藥品：直接檢查需氧菌檢查厭氧菌檢查霉菌檢查陰性對(duì)照：空白培養(yǎng)基陽性對(duì)照：培養(yǎng)基+待檢藥品+陽性對(duì)照菌特殊藥品：先處理后作檢查檢查項(xiàng)目培養(yǎng)時(shí)間陽性對(duì)照菌陰性對(duì)照需氧菌30-35℃，14天金葡菌空白培養(yǎng)基厭氧菌30-35℃，14天生孢梭狀芽胞桿菌真菌20-25℃，14天白色念珠菌整理課件全封閉集菌器整理課件非滅菌制劑的微生物限度檢查細(xì)菌總數(shù)測(cè)定：小于300CFU/板有效真菌總數(shù)測(cè)定：小于100CFU/板有效質(zhì)控菌檢查活螨檢查整理課件平板菌落計(jì)數(shù)整理課件整理課件質(zhì)控菌檢測(cè)方法

藥物預(yù)處理增菌液增菌培養(yǎng)分離、純培養(yǎng)菌落等培養(yǎng)特征觀察鏡檢形態(tài)學(xué)檢查（如革蘭氏染色）生理