DB32T 4139-2021小麥赤霉病菌抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程_第1頁
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文檔簡介

ICS65.020.20CCSB2江蘇省地DB32方標(biāo)準(zhǔn)DBT4139—2021TechnicalregulationformonitoringoffungicideresistanceinFusariumspp.causingwheatheadblight江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布前言業(yè)大學(xué)提出。江蘇省農(nóng)作物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。起草單位：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、江蘇省植物保護(hù)植物檢疫站。用于小麥赤霉病菌對常用殺菌劑抗性監(jiān)測。范性引用文件，YT定義3.1ntration監(jiān)測對象a苯并咪唑類殺菌劑：多菌靈、甲基硫菌靈甲環(huán)唑d琥珀酸脫氫酶抑制劑：氟唑菌酰羥胺、萎銹靈f多作用位點殺菌劑：福美雙、百菌清敏感性基線確定與分離采樣況及地點(省、市縣、鄉(xiāng)鎮(zhèn)、村、組、農(nóng)戶)。做好記錄并將樣品晾干防止霉變。6.2分離的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA，PotatoDextroseAgar)平板上，分離小麥赤霉病菌。測定配制方法絲生長速率測定法孢子萌發(fā)測定法LLAMP高通量測定法β2-Tubulin的F167Y基因型突變引起的多菌靈抗性。根據(jù)LAMP性，具體技術(shù)方法按照附錄A執(zhí)行?？顾幮灶l率及風(fēng)險評價抗藥性頻率(%)=抗藥性菌株數(shù)/測定菌株數(shù)100。抗藥性頻率5%以下，為低等風(fēng)險；抗藥性頻10%以上為高等風(fēng)險。影響抗藥性風(fēng)險的其他因素.1抗藥性指數(shù)0水平?？顾幮匀后w的抗藥性指數(shù)越大，抗性風(fēng)險越大。2交互抗性模式抗性風(fēng)險。.3田間種植方式.4田間氣候條件9結(jié)果應(yīng)用。處理(規(guī)范性)(β2-Tubulin第167位氨基酸突變(F167Y))A.2檢測引物AGCTGACGCACTCTCGTCAGAGTTGA.3反應(yīng)體系與條件(10μL)BstDNAULLThermoPol0μL；MgCl2(25mM)1.6μL；dNTP(10mM)LFIPMLBIPMLFμM)0.2μL；B3(10μM)0.2μL；甜MLHNBmMLDNAμL；dH2O(滅菌蒸餾水)2.6μL。反定為多菌靈中抗(F167Y)的禾谷

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