真核生物轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)與加工詳解

真核生物轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)與加工詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有20頁\編輯于星期二優(yōu)選真核生物轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)與加工現(xiàn)在是2頁\一共有20頁\編輯于星期二TATATFIIDTFIIATFIIBRNA-polII/TFIIFTFIIEPIC12345轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物結(jié)合順序現(xiàn)在是3頁\一共有20頁\編輯于星期二轉(zhuǎn)錄后的加工原核RNA不需加工，邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯真核RNA需要加工rRNAtRNAmRNA5’加帽3’加尾剪接在轉(zhuǎn)錄過程中轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行現(xiàn)在是4頁\一共有20頁\編輯于星期二真核生物轉(zhuǎn)錄后的加工意義：轉(zhuǎn)錄生成的前體RNA,無生物學(xué)活性,需加工變?yōu)槌墒?、有活性的RNA加工種類：剪切與剪接、末端添加核苷酸、修飾、RNA編輯現(xiàn)在是5頁\一共有20頁\編輯于星期二

一、mRNA前體的加工

（一）生成特點(diǎn)：原核：mRNA是多順反子(polycistronic),每分子RNA中含幾種蛋白質(zhì)信息，RNA壽命短，轉(zhuǎn)錄沒完時翻譯即開始

例:乳糖操縱子，含Z,Y,A三個基因,分別編碼半乳糖苷酶、透過酶及乙?；D(zhuǎn)移酶

現(xiàn)在是6頁\一共有20頁\編輯于星期二真核：單順反子,一個mRNA僅編碼一種蛋白質(zhì)

外顯子:在真核生物基因中編碼蛋白質(zhì)的序列

內(nèi)含子:非編碼蛋白的序列,因其插于外顯子之間又稱插入序列,居間序列

hnRNA:為mRNA的前體,轉(zhuǎn)錄物中外顯子與內(nèi)含子間隔排列，需經(jīng)剪接加工后生成mRNA現(xiàn)在是7頁\一共有20頁\編輯于星期二（二）mRNA前體加工過程

真核：

5‘末端帽子

部位：核內(nèi)

3‘端多聚A尾部位：核內(nèi),胞質(zhì)有酶也可進(jìn)行

剪接作用

部位：胞核甲基化(甲基化發(fā)生在剪接之前,在非編碼區(qū)分子中含1-2個m6A)RNA編輯(某些mRNA的核苷酸序列,在生成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物后還需插入、刪除或取代一些核苷酸殘基,方能生成具有正確翻譯功能的模板,遺傳信息在mRNA水平上的改變過程，稱為RNA編輯)原核：多順反子mRNA在RNaseⅢ作用下轉(zhuǎn)變?yōu)閱为?dú)的順反子現(xiàn)在是8頁\一共有20頁\編輯于星期二5’加帽pi5’pppG…磷酸酶ppi5’pG…pppG5’GpppG…甲基化酶＋CH3mGpppG…OHOH帽1帽0帽2NNNNOH2NCH3+OHHCH2HOPOPOPOPPPN1N2N3OOHOOHOOHOCH3OCH32'OH79H甲基鳥苷5’，5’-三磷酸現(xiàn)在是9頁\一共有20頁\編輯于星期二mRNA5`末端帽子特征的生物學(xué)功能：I:使mRNA免遭核酸酶的破壞，保持其結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性；II:利于蛋白質(zhì)起始因子的識別，從而促進(jìn)翻譯的起始。現(xiàn)在是10頁\一共有20頁\編輯于星期二3’加尾AAUAAAAAAAAAAAA……….加尾AATAAAGTGTGTG-----AAUAAAGUGUGUGAAUAAAGUGUGUG酶切轉(zhuǎn)錄的終止加尾信號GC豐富序列polyA尾（約20～200個A）AAAAAA現(xiàn)在是11頁\一共有20頁\編輯于星期二高等真核生物（不包括酵母）的mRNA的共同特征：poly(A)添加位點(diǎn)上游11-30個核苷酸區(qū)域內(nèi)存在高度保守的AAUAAA序列。

絕大部分真核生物mRNA3`端含poly(A)尾巴poly(A)尾巴生物學(xué)功能：

I:保持mRNA的穩(wěn)定性，防止被降解；

II:與翻譯起始有關(guān)?，F(xiàn)在是12頁\一共有20頁\編輯于星期二應(yīng)用一：★Poly(A用來從總RNA中分離mRNA現(xiàn)在是13頁\一共有20頁\編輯于星期二

可設(shè)計(jì)寡聚Oligo(dT)片段合成cDNA應(yīng)用二：mRNA:5`NNNN…..NNNNNNAAA…AA3`

TTT…TT5`

cDNA:3`NNNN…..NNNNNNTTT…TT5`現(xiàn)在是14頁\一共有20頁\編輯于星期二斷裂基因：真核生物的基因由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相隔開但又連續(xù)鑲嵌而成外顯子（exon):基因中出現(xiàn)在mRNA的序列內(nèi)含子（intron）：基因中不出現(xiàn)于mRNA而被剪接掉的序列核內(nèi)不均一RNA（hnRNA）：真核生物中編碼蛋白質(zhì)基因的初級轉(zhuǎn)錄本，包括5’帽子、3’poly(A)尾、外顯子、內(nèi)含子，經(jīng)剪接加工成為mRNA現(xiàn)在是15頁\一共有20頁\編輯于星期二剪接剪接:在細(xì)胞核內(nèi),hnRNA剪切掉內(nèi)含子,將多個外顯子連接為成熟mRNA的過程為剪接例:同一轉(zhuǎn)錄本,在不同的組織,因剪接差異產(chǎn)生各自不同的mRNA剪接的本質(zhì)：磷酸酯鍵的轉(zhuǎn)移剪接特點(diǎn)：剪接部位的結(jié)構(gòu)為內(nèi)含子末端的特定序列，分布在內(nèi)含子的三個部位，5‘端剪切點(diǎn)為GU;3’端剪切點(diǎn)為AG；靠近3‘端含A序列的分支點(diǎn)現(xiàn)在是16頁\一共有20頁\編輯于星期二mRNA的剪接：

hnRNA被剪接體作用，剪除內(nèi)含子、連接外顯子，產(chǎn)生成熟的mRNA的過程現(xiàn)在是17頁\一共有20頁\編輯于星期二外顯子內(nèi)含子DNAmRNA轉(zhuǎn)錄形成套索RNA，外顯子靠近剪接體去除套索RNA，外顯子連接成熟mRNAmRNA的剪接現(xiàn)在是18頁\一共有20頁\編輯于星期二套索結(jié)構(gòu)外顯子外顯子內(nèi)含子內(nèi)含子5’端斷開前一個外顯子的3’末端攻擊下后個外顯子的5末端’前后外顯子的連接現(xiàn)在是19頁\一共有20頁\編輯于星期二二、tRNA前體的加工

1、切除多余的核苷酸：RNaseP切