氣象與液相的區(qū)別

-氣象與液相的區(qū)別氣相色譜儀主要是用來分析氣相樣品和易揮發(fā)的熱穩(wěn)定樣品，如弱極性小分子有機物；而液相色譜主要是用來分析高沸點或假設(shè)不穩(wěn)定樣品，如核酸等。兩種色譜方法，液相色譜儀用液體作流動相，氣相色譜儀用氣體作為流動相。進(jìn)樣的話，液相色譜儀的液體樣品直接進(jìn)入色譜柱，氣相色譜儀的液體樣品必須氣化才能進(jìn)入。氣相色譜儀現(xiàn)在所用色譜柱一般是空心的毛細(xì)管色譜柱，檢測器也是破壞型的。液相色譜儀的色譜柱一般是填充柱，檢測器非破壞型。一、別離原理：1.氣相：氣相色譜是一種物理的別離方法。利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)〔溶解度〕的微小差異，當(dāng)兩相作相對運動時，這些物質(zhì)在兩相間進(jìn)展反復(fù)屢次的分配，使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果，而使不同組分得到別離。2.液相：高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的根底上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動相改為高壓輸送〔最高輸送壓力可達(dá)4.9′107Pa〕;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜〔每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬〕；同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進(jìn)展連續(xù)檢測。二、應(yīng)用范圍：1.氣相：氣相色譜法具有別離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點，但是受技術(shù)條件的限制，沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的. z.-物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)展分析。一般對500℃以下不易揮發(fā)或受熱易分解的物質(zhì)局部可采用衍生化法或裂解法。2.液相：高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大〔大于400以上〕的有機物〔些物質(zhì)幾乎占有機物總數(shù)的75%～80%〕原則上都可應(yīng)用高效液相色譜法來進(jìn)展別離、分析。據(jù)統(tǒng)計，在化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。三、儀器構(gòu)造：1.氣相：由載氣源、進(jìn)樣局部、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣局部、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。1.1柱箱：色譜柱是氣相色譜儀的心臟，樣品中的各個組份在色譜柱中經(jīng)過反復(fù)屢次分配后得到別離，從而到達(dá)分析的目的，柱箱的作用就是安裝色譜柱。由于色譜柱的兩端分別連接進(jìn)樣器和檢測器，因此進(jìn)樣器和檢測器的下端〔接頭〕均插入柱箱。柱箱能夠安裝各種填充柱和毛細(xì)管柱，并且操作方便。色譜柱〔樣品〕需要在一定的溫度條件下工作，因此采用微機對柱箱進(jìn)展溫度控制。并且由于設(shè)計合理，柱箱內(nèi)的梯度很小。對于一些成份復(fù)雜、沸程較寬的樣品，柱箱還可進(jìn)展三階程序升溫控制。且程序設(shè)定后自動運行無需人工干預(yù)，降溫時還能自動后開門排熱。. z.-1.2進(jìn)樣器：進(jìn)樣器的作用是將樣品送入色譜柱。如果是液體樣品，進(jìn)樣器還必須將其汽化，因此采用微機對進(jìn)樣器進(jìn)展溫度控制。根據(jù)不同種類的色譜柱及不同的進(jìn)樣方式，共有五種進(jìn)樣器可供選擇：1.填充柱進(jìn)樣器2.毛細(xì)管不分流進(jìn)樣器附件3.毛細(xì)管分流進(jìn)樣器附件4.毛細(xì)管分流/不分流進(jìn)樣器5.六通閥氣體進(jìn)樣器1.3檢測器:檢測器的作用是將樣品的化學(xué)信號轉(zhuǎn)化為物理信號〔電信號〕。檢測器也需要在一定的溫度條件下才能正常工作，因此采用微機對檢測器進(jìn)展溫度控制。根據(jù)各種樣品的化學(xué)物理特性，共有五種檢測器可供選擇：1.氫火焰離子化檢測器(FID)2.熱導(dǎo)檢測器(TCD)3.電子捕獲檢測器(ECD)4.氮磷檢測器(NPD)5.火焰光度檢測器(FPD)1.4數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進(jìn)展采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使. z.-樣品的別離、制備或鑒定工作能正確開展。2.液相：高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、別離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。2.1進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。2.2輸液系統(tǒng)該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三局部。高壓泵的一般壓強為l．47～4．4*107Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)〔即使僅有一個基團(tuán)的差異或是同分異構(gòu)體〕都能獲得有效別離。3.3別離系統(tǒng)該系統(tǒng)包括色譜柱、連接收和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm〔需要兩根連用時，可在二者之間加一連接收〕，內(nèi)徑為2～5mm，由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相〔由基質(zhì)和固定液構(gòu)成〕．固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成，它們都有惰性〔如硅膠外表的硅酸基因根本已除去〕、多孔性〔孔徑可達(dá)1000"〕和比外表積大的特點，加之其外. z.-表經(jīng)過機械涂漬〔與氣相色譜中固定相的制備一樣〕，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因〔如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等〕或配體的有機化合物。因此，這類固定相對構(gòu)造不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如，在多孔性硅膠外表偶聯(lián)豌豆凝集素〔PSA〕后，就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白別離出來。另外，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易到達(dá)均勻、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴散效應(yīng)?；|(zhì)粒度小，微孔淺，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)N就越大。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小，會提高分辨率的道理。再者，高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C，通過改善傳質(zhì)速度，縮短分析時間，就可增加層析柱的效率。2.4檢測系統(tǒng)高效液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種?！?〕紫外檢測器該檢測器適用于對紫外光〔或可見光〕有吸收性能樣品的檢測。其特點：使用面廣〔如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用〕；靈敏度高〔檢測下限為10-10g／ml〕；線性范圍寬；對溫度和流速變化不敏感；可檢測梯度溶液洗脫的樣品。〔2〕示差折光檢測器凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢. z.-測。，糖類化合物的檢測使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強、操作簡單，但靈敏度低〔檢測下限為10-7g／ml〕，流動相的變化會引起折光率的變化，因此，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。〔3〕熒光檢測器凡具有熒光的物質(zhì)，在一定條件下，其發(fā)射光的熒光強度與物質(zhì)的濃度成正比。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物〔如多環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素和*些蛋白質(zhì)等〕的測定，其靈敏度很高〔檢測下限為10-12～10-14g／ml〕，痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用。2.5數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進(jìn)展采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的別離、制備或鑒定工作能正確開展。各類儀器分析實驗室要求表實驗室名稱所屬各室的要求氣相色譜分析室主要是對容易轉(zhuǎn)化為氣態(tài)而不分解的液態(tài)有機化合物及氣態(tài)樣品的分析。儀器設(shè)備主要有氣相色譜儀，具有計算機控制系統(tǒng)及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，自動化程度很高，對有機化合物具有高效的別離能力，所用載氣主要有：H2、N2、Ar、He、CO2等。但對高沸點化合物，難揮發(fā)的及熱不穩(wěn)定的化合物、離子化合物、高聚物的別離卻無能為力。要求局部排風(fēng)及防止陽光直射在儀器上，防止影響電路系統(tǒng)正常工作的電場. z.-及磁場存在，一般設(shè)計：儀器臺〔應(yīng)離墻以便儀器維修〕、萬向排氣罩、電腦臺〔一般在儀器臺旁配置〕、邊臺、洗滌臺、試劑柜等液相色譜分析室主要表達(dá)在高效率別離，對復(fù)雜的有機化合物別離制取純潔化合物，定量分析和定性分析，儀器設(shè)備主要有：高效液相色譜儀，適宜于高沸點化合物、難揮發(fā)化合物、熱不穩(wěn)定化合物、離子化合物、高聚物等，彌補氣相色譜儀的缺乏。環(huán)境和實驗室根底裝備設(shè)計要求與氣相色諳室相近。質(zhì)譜分析室主要是對純有機物的定性分析，實現(xiàn)對有機化合物的分子量、分子式、分子構(gòu)造的測定，分析樣品可以是氣體、液體、固體，主要設(shè)備有質(zhì)譜儀、氣-質(zhì)聯(lián)用儀。質(zhì)譜儀是利用電磁學(xué)的原理，使物質(zhì)的離子按照基特征的質(zhì)荷比〔即質(zhì)量m與電荷e之比—m/e〕來進(jìn)展別離并進(jìn)展質(zhì)譜分析的儀器，缺點是對復(fù)雜有機混合物的別離無能為力。氣相色譜別離效率高，定量分析簡便的特點，結(jié)合質(zhì)譜儀靈敏度高，定性分析能力強的特點，兩種儀器聯(lián)用為氣-質(zhì)聯(lián)用儀?？梢匀￠L補短，提高分析質(zhì)量和效率。質(zhì)譜儀可能有汞蒸汽逸出，要考慮局部排風(fēng)。光譜分析室主要是根據(jù)物質(zhì)對光具有吸收、散射的物理特征及發(fā)射光的物理特性，在分析化學(xué)領(lǐng)域建立化學(xué)分析。主要的儀器是原