果蠅唾腺染色體觀察

果蠅唾腺染色體觀察第1頁/共16頁實驗?zāi)康膶W習分離果蠅三齡幼蟲唾腺及壓制唾腺染色體標本的方法觀察多線染色體的特征:a.巨大b.體細胞同源染色體配對,染色體只有半數(shù)c.各染色體異染色質(zhì)多的著絲粒部分互相靠攏形成染色中心d.橫紋有深淺疏密的不同,各自對應(yīng)排列,意味著基因的排列根據(jù)唾腺染色體上帶紋的形態(tài)和排列識別不同染色體,以研究和鑒別果蠅染色體結(jié)構(gòu)的變異第2頁/共16頁實驗原理唾腺染色體處于永久性間期中的一種體細胞同源染色體配對狀態(tài),比普通染色體大得多,稱巨大染色體.唾腺染色體經(jīng)過多次復(fù)制并不分開,約有1000-4000根染色體絲的拷貝,因此又稱為“多線染色體”.雙翅目昆蟲某些物種幼蟲唾腺細胞內(nèi)普遍存在,是研究唾腺染色體常用的材料

.第3頁/共16頁果蠅唾腺染色體特點：巨大，是多線染色體；

正常：間期DNA復(fù)制兩條染色單體著絲點裂開子染色體核分裂胞質(zhì)分裂果蠅：有絲分裂停止在分裂間期，DNA不斷自我復(fù)制，著絲點不裂開同源染色體緊密配對：體細胞聯(lián)會，所以染色體只呈現(xiàn)單倍數(shù)；形成染色中心，從染色體中心處伸出5條長臂，1條短臂；染色后，出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一的橫紋；蓬突第4頁/共16頁第5頁/共16頁實驗材料普通果蠅野生型或任何突變型的三齡幼蟲活體.選擇行動遲緩,肥大,爬上管壁的三齡幼蟲做標本最佳第6頁/共16頁一齡幼蟲兩齡幼蟲三齡幼蟲第7頁/共16頁實驗器具和藥品實驗器具:解剖鏡,顯微鏡,解剖針,載玻片,蓋玻片,吸水紙藥品:生理鹽水(0.7%Nacl),1mol/L

鹽酸、卡寶品紅第8頁/共16頁實驗步驟幼蟲的培養(yǎng):較低溫度下培養(yǎng)(16-18℃),每隔2天將羽化的新蠅倒出.取充分發(fā)育的三齡幼蟲唾腺分離:取三齡幼蟲放在滴有一滴生理鹽水的載玻片上,兩手各持一支解剖針.一支針壓在蟲體前端1/3處,固定幼蟲，另一針按在頭部里突處(口器)稍后，輕緩前移將頭部扯開,唾腺也隨之扯開，可看到一對透明而微白的長形小囊即為唾腺。唾腺的側(cè)面常帶少量白色沫狀脂肪體,用針剝離。第9頁/共16頁實驗步驟解離：用吸水紙小心吸去生理鹽水，加1滴1NHCl，浸2—3分鐘，使組織疏松，以便壓片時細胞分散，染色體散開。染色壓片:將唾腺移到另一干凈的預(yù)先滴有卡寶品紅的載玻片上染色10min后，取蓋玻片和雙面刀片，雙面刀片放于蓋玻片和載玻片間，吸去多余染液，第10頁/共16頁實驗步驟

蓋上蓋玻片，在蓋片上覆一條吸水紙，用拇指適當用力壓片。（注意：在撥取和染色過程中勿使腺體干燥）觀察:低倍鏡觀察選出典型細胞后用高倍鏡觀察，可以看到五條彎曲展開的染色體臂和一個點狀的第6號染色體對,它們在著絲點構(gòu)成染色中心并向外展開，自染色體的終端可分辨橫向帶紋.第11頁/共16頁解剖針解剖針第12頁/共16頁果蠅唾腺染色體模式核型第13頁/共16頁D.virilis的巨大唾腺染色體