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第六章園林苗圃育苗新技術(shù)第1頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(一)組培育苗的優(yōu)缺點優(yōu)點:1、保持母樹的優(yōu)良特性;2、無性系快速大量地繁殖;3、莖尖脫毒培養(yǎng)脫毒苗;4、速度快、省時間、產(chǎn)量大;5、培育新品種;6、保存種質(zhì)資源。缺點:1、操作煩雜,要求有一定設(shè)備條件2、試驗階段成本較高。第2頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(二)組織培養(yǎng)分類1、以所用外植體材料來分:植株培養(yǎng)器官培養(yǎng)胚胎培養(yǎng)組織培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原生質(zhì)體的培養(yǎng)第3頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(二)組織培養(yǎng)分類2、依所用的培養(yǎng)基不同來劃分:固體培養(yǎng)液體培養(yǎng)
靜止培養(yǎng)、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)第4頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(三)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用無性系的快繁脫毒苗培育第5頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(四)組織培養(yǎng)的設(shè)備和條件1、實驗室準(zhǔn)備室:器具的洗滌、干燥、存放與蒸餾水的制備;培養(yǎng)基的配制、分裝、高壓滅菌;存放天平、藥品及各種藥品的配制等。面積在30m2左右。接種室:也稱為無菌操作室。主要供材料的消毒、接種、無菌材料的繼代轉(zhuǎn)苗等。設(shè)備有超凈工作臺及無菌的接種工具。面積在20m2左右。培養(yǎng)室:是培養(yǎng)試管苗的場所。要求室溫25~27oC之間,需安裝調(diào)節(jié)溫度設(shè)備;將光源設(shè)計在培養(yǎng)物的上方。培養(yǎng)室還要有培養(yǎng)裝置如培養(yǎng)架等。第6頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二2、儀器設(shè)備及器具(1)制備培養(yǎng)基設(shè)備:天平、冰箱(2)滅菌設(shè)備:高壓滅菌鍋烘箱和恒溫箱(3)接種設(shè)備:(4)培養(yǎng)設(shè)備:(5)璃器皿和用具:如三角瓶、量筒、燒杯等。第7頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(四)培養(yǎng)基及其制備
1、培養(yǎng)基的組成無機(jī)成分:(1)大量元素:包括N、P、K、Ca、S等元素的無機(jī)鹽。需要量大,具有重要作用。(2)微量元素:Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo、Co等多種微量元素。植物生長必不可少。有機(jī)成分(3)維生素:參與酶的形成和蛋白質(zhì)、脂肪的代謝等活動。(4)氨基酸:谷氨酸、甘氨酸等。(5)肌醇:第8頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
(6)糖:是碳元素提供者,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓。(7)支撐物質(zhì):瓊脂是常用的固化劑,它能使培養(yǎng)基固化。(8)植物生長調(diào)節(jié)劑;吲哚乙酸、萘乙酸等,促進(jìn)細(xì)胞分裂,刺激生長。(9)水:(10)其他:活性炭第9頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二2、常用培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基懷特培養(yǎng)基米勒培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基第10頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二3、培養(yǎng)基的配制技術(shù)組織培養(yǎng)和整體植物在營養(yǎng)上的主要區(qū)別是它的異養(yǎng)性,整體植物只需要無機(jī)營養(yǎng),而組織培養(yǎng)則需另外供給C源和許多有機(jī)養(yǎng)料。各種植物以及同一植物的不同器官和材料進(jìn)行培養(yǎng)時對無機(jī)養(yǎng)料的要求也略有區(qū)別,甚至在增減過程中也發(fā)生變化。因此在培養(yǎng)過程中隨著組織和細(xì)胞的分化發(fā)育的進(jìn)展正確選用培養(yǎng)基,及時調(diào)整培養(yǎng)基中的某項成分(轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基)是成功的關(guān)鍵之一。第11頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二配制程序按量吸取藥液混合注入蔗糖、瓊脂的混合液中攪拌均勻用0.4%的NaOH或3.65%HCl溶液調(diào)節(jié)pH值裝入三角瓶等培養(yǎng)容器內(nèi)滅菌待用第12頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二4、培養(yǎng)材料的選擇一般常用作快速繁殖的材料有鱗莖、球莖、莖段、莖尖、花柄、花瓣、葉柄、葉尖、葉片等,它們的生理狀態(tài)對培養(yǎng)時器官的分化有很大影響。一般來講,發(fā)育年幼的實生苗比發(fā)育年齡老的成年樹容易分化,頂芽比腋芽容易分化,萌動的芽比休眠的芽容易分化,采用大樹基部的萌蘗有利于芽的誘導(dǎo)和分化。此外可以用未成熟的種子、子房、胚珠及成熟的種子為材料,剝?nèi)シN皮經(jīng)過胚胎培養(yǎng),打破休眠得到試管苗后,再進(jìn)行快速繁殖。第13頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二5、接種與培養(yǎng)(1)外植體的消毒與接種將接種材料用自來水沖洗干凈,擦干。然后,在超凈臺上或接種箱內(nèi),將接種材料浸在飽和漂白粉上清液里,作表面滅菌15—30min,也可用0.1%的升汞溶液作表面滅菌8—12min。滅菌時間快到時,即傾去滅菌溶液,用無菌水涮洗多次,然后用無菌紗布吸干接種材料外部的水分,最后在無菌的條件下接種在培養(yǎng)基上以待器官分化。第14頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
(2)芽的分化接種后,要使材料分化出許多芽,必須對培養(yǎng)基及激素的種類和濃度進(jìn)行嚴(yán)格地篩選。在誘導(dǎo)芽的分化過程中,常用的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,適當(dāng)降低MS培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的濃度,特別是降低氮素水平,對芽的分化和生長都是有利的。第15頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
激素的種類和濃度對芽的分化起著重要的作用。由于不同的植物和不同的組織器官所含的內(nèi)源激素的種類和濃度不同,因而使細(xì)胞、組織、器官分化和分化所需要的激素水平也不相同。原則上講,細(xì)胞分裂素可以促進(jìn)芽的分化,常用的細(xì)胞分裂素有激動素、6·芐基腺嘌呤、玉米素和異戊烯基腺嘌呤。在快速繁殖中,一般用6—芐基腺嘌呤比激動素的效果好,合適的濃度一般為0.25mg/L。少數(shù)種類的植物適合用玉米素和異戊烯基腺嘌呤。生長素雖然不能促進(jìn)芽的分化,但是一般植物芽的分化需要它與細(xì)胞分裂素濃度有一定的比例。當(dāng)細(xì)胞分裂素的相對含量大于生長素時,有利于芽的分化和生長,在MS培養(yǎng)基中,附加0.5mg/L吲哚乙酸,lmg/L6—芐基腺嘌呤,是芽分化的最佳配比。第16頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
(3)根的誘導(dǎo)要促使試管苗生根,常用的有兩種方法:一種是把試管苗在無菌條件下從葉腋處剪下來,轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。生根培養(yǎng)基和分化培養(yǎng)基的差別主要在于生長素和細(xì)胞分裂素的比例上,適當(dāng)增加生長素的濃度,不用細(xì)胞分裂素或極少量的細(xì)胞分裂素,一般在莖的基部就能分化出根。但是不同的植物誘導(dǎo)生根時所需要的生長素的種類和濃度是不同的。一般常用的有吲哚乙酸、萘乙酸、吲哚丁酸3種。在生產(chǎn)實踐中,生長素濃度過低不利于試管苗生根,而生長素濃度過高時,先在莖的基部形成一塊愈傷組織,而后再從愈傷組織上分化出根,但是這樣莖與根之間維管束往往連接不好,影響了物質(zhì)和水分的吸收和運輸,這種苗移栽不易成活,即使成活后生長速度也較慢,所以要求生長素的濃度以能使傷口處直接生長出根為合適。第17頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
另一種方法是將無菌苗剪下后,浸泡在含有一定濃度生長素的無菌水中,幾小時后再接種到無激素培養(yǎng)基上,一般1星期后即開始分化出根原基,2--3星期后根生長良好即可移栽。若適當(dāng)降低培養(yǎng)基的含糖量,同時將大量元素的含量減少一半左右,并適當(dāng)增加培養(yǎng)基中維生素B2、維生素B12的含量,也可以提高根的誘導(dǎo)頻率。第18頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
6、煉苗與移栽當(dāng)試管苗長出白根后尚未老化之前,應(yīng)打開瓶塞放在散射光處鍛煉3-4d,然后取出幼苗用溫水將瓊脂沖洗掉,移栽到無菌的沙性土壤中。組培苗對基質(zhì)的要求較高,基質(zhì)必須嚴(yán)格消毒。基質(zhì)的成分一般以沙土、礱糠灰(炭化稻殼)、江沙、泥炭、珍珠巖或蛭石為材料,移苗應(yīng)根據(jù)不同的園林苗木材料運用以上不同的基質(zhì)材料的不同配比,制成無菌的基質(zhì)。移栽時要注意別傷根并使其處于伸展?fàn)顟B(tài),澆透水后,用塑料薄膜覆蓋,保持空氣的相對濕度在90%以上,溫度在25C左右(±5C),勿使陽光直曬。過1星期后,注意逐漸通氣及澆灌適量的水,幼苗即能成活。試管苗成活后,再移至苗圃的幼苗池中進(jìn)行培養(yǎng),待壯苗后移至大田栽培。第19頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二第二節(jié)水培育苗
用泥炭、巖棉、砂礫、珍珠巖、蛭石以及其它基質(zhì)或單純采用營養(yǎng)液而不用天然土壤來進(jìn)行育苗的方法稱為無土育苗。水培是在化學(xué)溶液中培養(yǎng)植物的技術(shù)和科學(xué)。植物在沒有有機(jī)質(zhì)存在的情況下,由人工供給養(yǎng)分而生長。水培也需要用基質(zhì),用于固定、支持苗木。水培育苗是無土育苗的一種方法。第20頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二一、水培的優(yōu)缺點
水培的優(yōu)點:
1、產(chǎn)量高、質(zhì)量好、生長快。水培可以直接供給植物生長所需要的養(yǎng)分和水分,為生長提供了優(yōu)越的條件,由于基質(zhì)的恰當(dāng)選用,改善了通氣條件,有利于苗木生長2、水培在大小范圍內(nèi)均可進(jìn)行,不受環(huán)境條件的限制。第21頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二水培的缺點:它要求有一定的設(shè)備,比普通育苗成本高,但隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和改進(jìn)是可以提高效率的。第22頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二二、水培育苗的設(shè)備(一)場地水培對場地要求不嚴(yán),大小均可,只要能滿足陽光,空氣及充足的水源條件,人為提供礦質(zhì)營養(yǎng)及基質(zhì)條件即可。第23頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(二)容器水培用容器的大小,依生產(chǎn)規(guī)模及要求而定,任何大小的花盆、水桶、木箱等容器都可進(jìn)行水培;大規(guī)模的生產(chǎn)可用水培槽,水培槽也可大可小。第24頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二容器水平式水培槽裝置1.框架2.苗床(基質(zhì))3.柵欄4.空氣層5.營養(yǎng)液6.防水槽6第25頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二容器流動式水培槽裝置1、2.苗床(蛭石、砂礫等)3.揚液槽4.集液槽5.揚水泵4第26頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二容器簡易水培裝置
1.營養(yǎng)液2.基質(zhì)6.柵欄網(wǎng)7.玻璃缸第27頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二可盛裝營養(yǎng)液的育苗槽第28頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第29頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第30頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第31頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第32頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第33頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第34頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第35頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
第36頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(三)營養(yǎng)液1.營養(yǎng)液的礦質(zhì)成分:植物根吸收的礦物質(zhì)元素主要有兩大類,即大量元素和微量元素。第37頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二大量元素大量元素主要有七種N、P、K、Ca、Mg、S、Fe2+,這些元素的每一種都至少可構(gòu)成植物體鮮重的0.0l%,其比例的略微變化,不會影響植物的正常生長,但缺少任何一種都會影響植物的正常生長,甚至死亡。第38頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二微量元素微量元素一般主要有Mn、B、Zn、Cu、Mo,它們在植物體鮮重中,所占的量很少,大約在O.001一O.00001%范圍內(nèi),但也是不可缺少的。第39頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二1、營養(yǎng)液的配制
我們在選擇營養(yǎng)液時,必須注意到植物正常生長的需要。這與我們進(jìn)行常規(guī)育苗時一樣,苗木在不同的時期施肥量和施用的種類也不同,所以配制營養(yǎng)液必須依不同的植物,不同的生長發(fā)育時期對營養(yǎng)的要求來定,同時還應(yīng)考慮到環(huán)境因子的影響.如溫度、濕度、光照等條件。第40頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二2.營養(yǎng)液的濃度及酸度營養(yǎng)液中大量元素濃度,一般不超過2—3/1000,其營養(yǎng)液的總濃度不能超過4/1000,濃度過高有害生長,不同植物要求濃度也不同,例如杜鵑所用營養(yǎng)液濃度不超過1/1000;而薔薇類則營養(yǎng)液濃度為2—5/1000。第41頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
營養(yǎng)液的酸度以微酸為好,一般pH值為6.5,植物在pH為5.5—6.5范圍內(nèi)生長最好,不同的植物對營養(yǎng)液酸堿度的反應(yīng)及需求不同如鳳梨類、馬蹄蓮、仙客來等pH值為5,生長最好;而菊花、薔薇類則要求pH,為6.5—7。第42頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二3.營養(yǎng)液用水的要求配制營養(yǎng)液所用的水,要了解是否有污染,含酸的或其他工業(yè)費水不能用來配制營養(yǎng)液,也最好不使用硬水,一般可用作飲用的水均可用于水培。自來水中含有較多的碳酸鹽和氯化物,防礙根系對鐵的吸收,可以用Na2-EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)進(jìn)行調(diào)節(jié),使鐵為Fe2+便于吸收。第43頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二(四)水培用基質(zhì)水培槽上苗床中的基質(zhì),是代替土壤并列起著固定、支撐苗木的作用。選用培養(yǎng)基質(zhì)的條件是疏松通氣又能保持水分。常用的基質(zhì)有蛭石、珍珠巖、石英砂、泥炭等,也可用它們的混合物。基質(zhì)的選擇要依據(jù)植物的要求和材料的來源而定。第44頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二三、水培的播種與扦插(一)播種利用水培進(jìn)行播種,小粒種子可以直接撒在苗床上,不需要覆蓋,大粒種子需插入苗床內(nèi)。為了更好地保持濕度,在播種之前,用稀釋的營養(yǎng)液(水:營養(yǎng)液=1:1),預(yù)先澆透苗床。(二)扦插水培扦插所選用的插條,多用當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條。第45頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二第三節(jié)容器育苗
容器育苗又稱營養(yǎng)缽育苗。指利用各種容器裝入培養(yǎng)基質(zhì)培育苗木,稱容器育苗。第46頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二一、容器育苗的優(yōu)缺點
優(yōu)點:1、容器苗的根系發(fā)育良好,起苗時不傷根,減少了苗木因起苗、運輸、假植等作業(yè)時對根系的損傷和水分的損失,從而提高苗木的移栽成活率。2、采用容器苗可以延長綠化植樹的時間,不受植樹季節(jié)的嚴(yán)格限制。3、可以節(jié)省種子。第47頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二
4、容器育苗可提早播種,延長苗木生長期,有利于培育壯苗;5、容器育苗管理方便,結(jié)合塑料大棚育苗,可以滿足苗木對溫度濕度、光照的要求,有利于促進(jìn)苗木的迅速生長,培育優(yōu)質(zhì)壯苗。第48頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二缺點容器育苗單位面積產(chǎn)苗量低;成本高;營養(yǎng)土的配制和處理等操作技術(shù)比一般育苗復(fù)雜;在栽植上也存在運輸不便,運費高的問題。第49頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二二、育苗地的選擇容器育苗的圃地應(yīng)選擇地勢平坦、排水良好處,切忌選在地勢低洼、排水不良、雨季積水和風(fēng)口處;對土壤肥力和質(zhì)地要求不高;選擇的圃地要有充足的水源和電源,便于灌溉和育苗機(jī)械化、自動化操作。第50頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二三、容器的種類和大小育苗容器又稱營養(yǎng)杯,其種類很多,國內(nèi)外用做營養(yǎng)杯的材料有:泥炭土、紙、塑料薄膜、其他塑料及木制、竹制等?;旧戏譃槿齻€類型:第51頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二容器的種類1、容器雖有外壁,但易于腐爛,填入培養(yǎng)土育苗,移栽時不需將苗木取出,連同容器一同栽植即可。如紙缽。2、容器有外壁,但不易腐爛,栽植時必須從容器中取出苗木,用完整的苗木根系進(jìn)行栽植。如塑料缽。第52頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二3、容器無外壁,其本身既是育苗容器又是培養(yǎng)基質(zhì)。
如:巖棉塊育苗第53頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二第54頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二營養(yǎng)缽用腐熟有機(jī)肥、火燒土、原圃土,并添加適量無機(jī)肥料配制成營養(yǎng)土,經(jīng)拌漿、成床、切磚、打孔而成長方形的營養(yǎng)磚塊;或者用棉農(nóng)用的制缽器制成營養(yǎng)缽。第55頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二塑料薄膜容器一般用厚度為0.02~0.06毫米的無毒塑料薄膜加工制作而成。塑料薄膜容器分有底(袋)和無底(筒)兩種。有底容器中下部需打6~12個直徑為0.4~0.6厘米的小孔,小孔間距2~3厘米或者剪去兩邊底角。
第56頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二蜂窩狀容器有底蜂窩狀育苗容器第57頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二蜂窩狀容器以紙或塑料薄膜為原料制成,將單個容器交錯排列,側(cè)面用水溶性膠粘劑粘成,可折疊,用時展開成蜂窩狀,無底。在育苗過程中,容器間的膠粘劑溶解,可使之分開。
第58頁,共64頁,2023年,2月20日,星期二硬塑料杯容器用硬質(zhì)塑料制成六角形、方形或圓錐形,底部有
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