選修三復(fù)習(xí)6221課件

專題1基因工程（DNA分子水平）1、基因工程的原理：基因重組2、基因工程的基本工具限制酶

DNA載體①分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）來源：原核生物功能：識(shí)別DNA特定序列，切割特定部位

的磷酸二酯鍵，具專一性。結(jié)果：黏性末端和。②.“分子縫合針”——DNA連接酶

E·coliDNA連接酶作用：黏性末端之間的磷酸二酯鍵T4DNA連接酶

來源：T4噬菌體作用：能縫合兩種末端③.“分子運(yùn)輸車”——載體條件：A.能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。B.具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。C.具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。質(zhì)粒：結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、自我復(fù)制、雙鏈環(huán)狀DNA載體種類：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒3、基因工程的基本操作程序①目的基因的獲取方法：基因文庫(kù)中獲?。ɑ蚪M文庫(kù)，cDNA文庫(kù)）

人工合成（反轉(zhuǎn)錄法）

PCR（原理：DNA復(fù)制。條件：引物、模板DNA、四種脫氧核苷酸、DNA聚合酶）②基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）組成：目的基因＋啟動(dòng)子＋終止子＋標(biāo)記基因4、基因工程的應(yīng)用基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用轉(zhuǎn)基因生物：導(dǎo)入外源基因的生物

5、蛋白質(zhì)工程制造新的蛋白質(zhì)

又稱為第二代的基因工程基本途徑：預(yù)期的蛋白質(zhì)功能、設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、推測(cè)氨基酸序列、合成基因。依據(jù)：蛋白質(zhì)的功能本質(zhì)：改造基因結(jié)構(gòu)專題22.1植物細(xì)胞工程1.植物細(xì)胞工程

原理：細(xì)胞全能性2.植物組織培養(yǎng)：離體的植物器官、組織或細(xì)胞最終形成完整植物體3.用途：微型繁殖、作物脫毒（分生區(qū)附近的病毒極少或沒有）、制造人工種子（根、芽）、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)（愈傷組織）。誘導(dǎo)融合的方法：物理法離心、振動(dòng)、電激。

化學(xué)法聚乙二醇（PEG）融合完成的標(biāo)志：雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁（高爾基體）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。植物體細(xì)胞雜交原理：細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性2.2動(dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（原理：細(xì)胞增殖）：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→原代培養(yǎng)（10代內(nèi)）→重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→傳代培養(yǎng)。2.細(xì)胞貼壁和接觸抑制：3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：①無菌、無毒的環(huán)境②營(yíng)養(yǎng)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素、血清、血漿。③溫度④氣體環(huán)境：95%空氣＋5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2是維持培養(yǎng)液的pH。5.動(dòng)物細(xì)胞融合原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性誘導(dǎo)方法：物理、化學(xué)、生物（滅活仙臺(tái)病毒）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性應(yīng)用：制備單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較6.單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。單克隆抗體流程圖專題3胚胎工程

1.精子與卵細(xì)胞形成的區(qū)別場(chǎng)所、時(shí)間（精母細(xì)胞和卵母細(xì)胞）、精子有變形、減一減二是否連續(xù)2.精細(xì)胞變精子（每部分變化）3.精卵的準(zhǔn)備4.受精過程（2道屏障、是否受精標(biāo)志和受精完成標(biāo)志）5.胚胎發(fā)育過程卵裂期特點(diǎn)6.卵母細(xì)胞的采集方法7.精母細(xì)胞的采集方法、獲能方法8.早期胚胎培養(yǎng)液成分9.胚胎移植流程圖10.胚胎移植生理學(xué)基礎(chǔ)11.胚胎分割：時(shí)期、均等分割原因12.胚胎干細(xì)胞特點(diǎn)3.受精：受精場(chǎng)所：輸卵管受精準(zhǔn)備：精子獲能

卵子（減二中期）排卵:卵子從卵泡中排出，排出的卵可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞。受精階段：頂體反應(yīng)——穿越放射冠——穿越透明帶（透明帶反應(yīng)——第一道屏障）——精子入卵（卵黃膜封閉作用-—第二道屏障）——雄原核、雌原核形成——雌雄原核融合（受精完成標(biāo)志）是否受精標(biāo)志：卵黃膜與透明帶間隙可觀察到兩個(gè)極體4.胚胎發(fā)育：受精卵——胎兒（幼體）卵裂期：有絲分裂，細(xì)胞未分化

細(xì)胞數(shù)量增加，有機(jī)物總量減少，總體積不增加或略有減小。每個(gè)細(xì)胞體積變小，DNA不變。

桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎

全能細(xì)胞囊胚：細(xì)胞開始分化

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)：將來發(fā)育成胎兒的各種組織；

滋養(yǎng)層細(xì)胞：將來發(fā)育成胎膜和胎盤

囊胚腔孵化：原腸胚：原腸腔

有三胚層的分化程度：受精卵>各種干細(xì)胞>精細(xì)胞（卵細(xì)胞）>體細(xì)胞5.體外受精：有性生殖過程卵母細(xì)胞的采集方法：

從輸卵管沖取卵子（可直接受精）

從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的培養(yǎng)：減數(shù)第二次分裂中期精子的采集：假陰道法、手握法和電刺激法精子獲能方法：培養(yǎng)法化學(xué)法（肝素或鈣離子載體）受精：獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程胚胎的早期培養(yǎng)培養(yǎng)液成分：無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，可將其取出向受體移植或冷凍保存7.胚胎分割：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，屬于無性繁殖胚胎分割時(shí)間：桑椹胚或囊胚操作過程：對(duì)囊胚階段的胚胎要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，

否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。8