無菌和無菌操作技術

項目六無菌和無菌操作技術無菌和無菌操作技術1/29無菌：沒有活微生物存在狀態(tài)。無菌操作技術：用于預防微生物進入無菌范圍造成污染操作技術。無菌和無菌操作技術2/29一、無菌環(huán)境二、無菌器具、培養(yǎng)基三、無菌操作技術四、基本規(guī)則無菌和無菌操作技術3/29一、無菌環(huán)境1、無菌室2、超凈工作臺3、生物安全柜4、火焰周圍無菌和無菌操作技術4/291、無菌室標準無菌室要求：房間設置（外面有緩沖室）、空氣過濾、墻面、墻角、微生物操作相關設備、紫外燈等。無菌室布局無菌和無菌操作技術5/29如條件有限，可在微生物試驗室內專辟一個小房間作為無菌室。能夠用板材和玻璃建造，面積4-5平方米即可。板材和玻璃隔出無菌室無菌和無菌操作技術6/292、超凈工作臺超凈工作臺是一個提供局部無塵無菌工作環(huán)境垂直單向流型空氣凈化設備。超凈工作臺無菌和無菌操作技術7/293、生物安全柜生物安全柜外形與超凈臺類似，也提供局部無塵無菌工作環(huán)境。但它設置了風槽，氣流不會吹向使用者，能夠有效保護使用者。生物安全柜無菌和無菌操作技術8/294、火焰周圍通常使用酒精燈、煤氣燈，其火焰周圍是無菌區(qū)域（直徑10cm左右）。這并不是利用高溫殺死細菌，而是利用向上單向氣流形成一個無菌區(qū)域?；鹧嬷車菬o菌區(qū)域無菌和無菌操作技術9/29二、無菌器具、培養(yǎng)基1、玻璃、金屬等器具干熱滅菌法2、玻璃、金屬、含水物品高壓蒸汽滅菌法3、金屬、玻璃器具火焰滅菌法4、液體或水溶性物質過濾除菌法無菌和無菌操作技術10/291、玻璃、金屬等器具--干熱滅菌法設備：電烘箱用途：用于玻璃器皿、金屬器具等耐熱物品烤干和滅菌。條件：160-165℃，滅菌1-2小時。

無菌和無菌操作技術11/292、玻璃、金屬、含水物品等--高壓蒸汽滅菌法設備：高壓蒸汽滅菌鍋用途：培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物滅菌。條件：121℃水蒸氣15分鐘

培養(yǎng)基普通使用高壓蒸汽滅菌法無菌和無菌操作技術12/293、一些金屬、玻璃器具--火焰滅菌法即在火焰外焰上灼燒進行滅菌。用途：接種環(huán)、接種針；涂布器；試管管口、錐形瓶瓶口等滅菌。無菌和無菌操作技術13/294、液體或水溶性物質--過濾除菌法器具：細菌過濾器用途：不耐高溫液體、水溶性物質除菌。細菌過濾器無菌和無菌操作技術14/29三、無菌操作技術我們經過一定技術來確保目標微生物、培養(yǎng)基不被環(huán)境微生物污染，這些技術就是無菌操作技術。包含手部清潔消毒，用接種針、接種環(huán)、吸量管、涂布棒等工具進行各種操作等等。無菌和無菌操作技術15/291、手部清潔消毒洗手：手部有可見灰塵時、飯前、便后，用水和肥皂洗手；Handrub（揉手）：手部較清潔時，75%乙醇或者醇基消毒劑揉手。無菌和無菌操作技術16/29動作：手掌-手背-指縫-手指-拇指-指尖-手腕無菌和無菌操作技術17/292、培養(yǎng)皿操作培養(yǎng)皿開合：單手打開和蓋上皿蓋，包含持皿法和皿加法兩種。此操作用于制作培養(yǎng)基平板、接種等。持皿法無菌和無菌操作技術18/29皿加法無菌和無菌操作技術19/293、接種環(huán)操作包含灼燒接種環(huán)、接種、劃線等。無菌和無菌操作技術20/29灼燒接種環(huán)先斜放外焰灼燒接種環(huán)，然后垂直放置后繼續(xù)灼燒，再斜燒金屬桿?，F(xiàn)在紅外接種環(huán)滅菌器使用也比較廣泛。紅外接種環(huán)滅菌器無菌和無菌操作技術21/29用接種環(huán)進行接種無菌和無菌操作技術22/29用接種環(huán)進行劃線無菌和無菌操作技術23/294、涂布棒操作灼燒滅菌：能夠沾酒精然后灼燒，灼燒范圍要包含其桿部。無菌和無菌操作技術24/29涂布：將菌液滴在培養(yǎng)基表面中央。右手拿涂布棒將菌液沿一條直線往返推進，然后沿一垂直線來回推進，平板邊緣處可改變方向再涂幾次。涂布無菌和無菌操作技術25/295、試管操作單試管操作（注意左右手使用）無菌和無菌操作技術26/29雙試管操作無菌和無菌操作技術27/29四、基本規(guī)則不得留長指甲，頭發(fā)需扎好；無菌操