6.2線粒體靶向納米材料與腫瘤治療特點(diǎn)

線體向米料腫治優(yōu)線粒體向米料線粒體靶向策略的最初應(yīng)用是對(duì)生物活性分子修飾線粒體靶向基團(tuán)些活性分子能夠直接靶向至線粒體揮更好的療效如輔Q10或維生素E的衍物與TPP結(jié)合，已被證明能夠選擇性的靶向至線粒體并提高抗氧化效率性的與共結(jié)合時(shí)，原本只能在耐藥的人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)(MDA-MB-435/DOX)的胞漿中積累的DOX優(yōu)先選擇在線粒體中積累；與DOX原相比TPP-DOX能夠加caspase-3和PARP的剪，誘導(dǎo)更明顯的細(xì)胞凋亡，具有逆轉(zhuǎn)MDR的用潛力。在前文中已經(jīng)提及，將納米材料與抗腫瘤藥物結(jié)合形成納米醫(yī)藥或用納米載體負(fù)載藥物能在保持藥物原本完整的療效的同時(shí)善多種藥物的藥代動(dòng)力學(xué)和生物分布但在十年之前關(guān)于線粒體靶向的納載藥體系的報(bào)道并不多見部分納米靶向系統(tǒng)只靶向至細(xì)胞層面納米載體進(jìn)入細(xì)胞后隨機(jī)分布與包括線粒體在內(nèi)的亞細(xì)胞器作用期究發(fā)現(xiàn)米送載體通過修飾特定向到亞細(xì)胞器以加藥物與亞細(xì)胞器上特定位點(diǎn)作用的幾率從而提高治療效率因此定給藥的藥物遞送系統(tǒng)為目前暫時(shí)失敗的治療方法提供了新的可能性。為了將藥物運(yùn)輸?shù)骄€粒體基質(zhì)并有效的控制釋放藥物到不同的線粒體組分，對(duì)納米遞送系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和制備有著精確的要求：精確的尺寸性表面合的電性和表面特定的靶向基團(tuán)。此外，為保證線粒體靶向的納米遞送系統(tǒng)在生物體內(nèi)的安全性，對(duì)這些納米材料的生物相容性與生物降解性也有一定的要求對(duì)近年來報(bào)道的幾類線粒體靶向的納米平臺(tái)做一個(gè)簡(jiǎn)單總結(jié)：脂質(zhì)基粒靶納材靶向線粒體的脂質(zhì)體基材料，可以通過膜融合將其所載的藥物或活性分子帶入線粒體內(nèi)DQAsome是類研究要多的脂質(zhì)體基線粒體靶向納米材料，此外還發(fā)展了一系列利用親脂性陽離子TPP實(shí)靶向功能的質(zhì)體基納米材料課題組在NanoLetter上發(fā)表了他們制備的以脂質(zhì)體為核心TPP修飾的線粒體靶向載體將TPP結(jié)合到十八烷醇上制備出STPP，再和羅丹明B記的磷脂酰乙醇胺制備脂質(zhì)體用于靶向線粒體增加神經(jīng)酰胺的抗癌療效。為了克服上述STPP基質(zhì)體的非特異性細(xì)胞毒性2012年Torchilin等通過聚乙二醇-聚磷脂酰乙醇(PEG-PE)端基為TPPPEG共軛得到TPP-PEG-PE此共軛結(jié)構(gòu)混入脂質(zhì)體的磷脂雙分子層合成得到一種新型的線粒體靶向的脂質(zhì)體基納米材料，這種材料能夠顯著提高其運(yùn)載的抗癌藥物紫杉(PTX)效率、細(xì)胞毒性和在小鼠體內(nèi)的抗癌效率。

線粒體穿膜肽[KLAKLAK](KLA)修飾是另一種實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體基材料線粒體靶向的方式課題組制各了一種KLA修、敏的新型脂質(zhì)體材料，能夠提高負(fù)載的在粒體中的積累量，可以用于逆轉(zhuǎn)人肺腺癌細(xì)(A549)MDR樹狀分基粒靶納材樹狀大分子是一種從核心分子向周圍輻射，形成高度支化的重復(fù)分支的功能高分子材料其面具有數(shù)量可控的能用于實(shí)現(xiàn)多功能化的基團(tuán)狀大分子的中心內(nèi)核和支化空間可以包覆生物分子面基團(tuán)的不同功能化使其能夠遞送多種藥劑或顯影分了位白(TSPO)的一種分子量為18kDa的多聚體，在腫瘤的固醇類細(xì)胞的線粒體外膜高表達(dá)。Bornhop課組用樹狀大分子G(4)-PAMAM架苯基異喹啉3-羧酸C1PhIQAcid)和麗絲胺羅丹明(Lissamine)制了靶向線粒體外膜TSPO的CIPhIQ-PAMAM-Liss，C6大鼠膠質(zhì)瘤和人乳腺癌細(xì)胞中有良好的線粒體顯影效果年Torchilinh課組利用3-羧丙基三基溴化膦的羧基和乙?；臉錉畲蠓肿拥牟钒l(fā)生酸胺縮合反應(yīng)制備了PAMAM基的G(5)-D-Ac-TPP，熒光染標(biāo)記該納米載體，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這種材料和線粒體共定位的效果較好且性也較此工作的基礎(chǔ)上等成功的用修的PAMAM樹狀大分子實(shí)現(xiàn)了在人宮頸癌細(xì)胞和非洲綠猴腎纖維母細(xì)胞中的基因遞送效率可與商用的Lipofectamine相擬，比SuperFect高。聚合基粒靶納材由生物相容性和生物可降解的聚合物制備的聚合物納米顆粒是另一種藥物遞送系統(tǒng)中最常用的材料。在年Kopecek題組構(gòu)建利用作線粒體靶向劑、基于新型的羥丙甲丙烯酸甲酯(HPMA)共物的藥物遞送系統(tǒng)：他們?cè)O(shè)計(jì)了一種與賴氨酸共軛結(jié)合的HPMA共聚，使賴氨酸一端的氨基連接TPP于靶向至線粒體，另一端氨基連接藥物；所連接的熒光團(tuán)和敏藥物Mce6通過激光共聚焦顯微(CLSM)證該共聚物能夠靶向至線粒體喬亞大學(xué)的Dhara授課題組合成了一系列線粒體靶向的聚合物納米顆粒。如圖．13所示，其中最典的是用修飾FDA批準(zhǔn)的可生物降解聚乳-羥基乙酸共聚物PLGA)，制備得到靶向線體的聚合納米粒子，用這種納米粒子封裝氯尼達(dá)(LND，抑制線粒體的糖醇解、生育酚琥珀酸(α-TOS，選擇性腫瘤藥)、姜黃(淀粉p蛋白Aβ)的抑制劑，阿茲海默癥藥)和2二硝基苯酚2減肥藥物，測(cè)試藥物納米粒子對(duì)各類線粒體相關(guān)疾病的治療效果LND原藥對(duì)照組相比線粒體靶向納米粒子運(yùn)載的LND對(duì)腫瘤細(xì)胞的半數(shù)死率是原藥的108倍。之后，他們利用這個(gè)載體負(fù)載TPP修飾的順鉑前藥(Platin-M)其遞送到神經(jīng)母瘤細(xì)胞的線粒體中于對(duì)性的耐藥腦部

腫瘤的治療以為動(dòng)物模型立了這種線粒體靶向的順鉑納米遞送系統(tǒng)的生物分布評(píng)價(jià)模型。此外，TPP修其他聚物，例如聚乙二-聚己內(nèi)酯納米顆粒和多聚賴氨酸納米顆粒等，用于線粒體靶向、遞送生物活性分子或抗癌藥物至線粒體的研究也陸續(xù)見諸報(bào)道。圖1．13修飾的載藥聚合納米顆粒靶向線粒體的示意圖。無機(jī)米納金用于線粒體靶向的納米藥物載體的研究主要集中于以脂質(zhì)體或高分子聚合物作為載體材料，這兩種材料雖然具有許多優(yōu)點(diǎn)是它們皆有穩(wěn)定性差藥物容易泄露的缺點(diǎn)。當(dāng)以上兩種材料置于復(fù)雜的生物體內(nèi)液態(tài)環(huán)境時(shí)高分子鏈的溶脹效應(yīng)及脂質(zhì)體自身動(dòng)態(tài)不斷自組裝的本質(zhì)特征它的形狀、大和表面化學(xué)性質(zhì)易變且很不確定。相對(duì)而言，無機(jī)納米材料具有穩(wěn)定的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，將其用于構(gòu)建線粒體靶向的納米材料的報(bào)道也越來越多。最早發(fā)現(xiàn)有線粒體靶向功能的無機(jī)納米材料是金納米棒2011年，Chen課組發(fā)現(xiàn)金納米棒可以選擇性的殺死腫瘤細(xì)胞對(duì)常細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞沒有影響同的細(xì)胞攝取方式內(nèi)逸和溶酶體敏感性導(dǎo)了這樣的差異性棒表面的十六烷基三甲基溴化(CTAB)可以破壞溶酶體造成溶酶體逃逸，逃逸后金棒表面殘留的CTAB可使其在多種腫瘤細(xì)胞模型中選擇性的在線粒體積累，與線粒體的長(zhǎng)期作用導(dǎo)致線粒體膜電位下降，產(chǎn)生大ROS，從而殺死腫瘤細(xì)劇與此同時(shí)究現(xiàn)單壁碳納米(利其表面的正電性也可以穿過細(xì)胞膜在瘤的細(xì)胞的線粒體中累且結(jié)合近紅外光對(duì)SWNTs照射可實(shí)現(xiàn)針對(duì)腫瘤的線粒體靶向的光熱治療。此后，通過對(duì)無機(jī)納米材料修飾線粒體靶向基團(tuán)實(shí)現(xiàn)靶向功能的研究才陸續(xù)報(bào)道出來。Prato

等對(duì)多壁碳納米管(MWCNTs)表面修飾線粒體靶向肽序列

22(KMSVLTPLLLRGLTGSARRLPVPRAKC)實(shí)現(xiàn)了其在藥物遞送中的線粒體靶向CLSM觀察靶向的MWCNTs在巨細(xì)胞和人宮頸癌胞的線粒體中大量積累，細(xì)胞電鏡進(jìn)一步確認(rèn)了這個(gè)結(jié)果。2014年等道了另一種碳基材料的線粒體靶向過對(duì)CQDs修TPP實(shí)現(xiàn)了對(duì)活細(xì)胞線粒體的單光子和雙光子顯影。之后Lin題組在實(shí)現(xiàn)TPP修飾的CQDs用線粒體顯影的同時(shí)，還開發(fā)了其檢測(cè)亞硝酸離子的分析功能。近年來的研究中人們也發(fā)現(xiàn)，某些無機(jī)納米粒子也具有線粒體靶向的能力，比如Ti0納米顆粒和金納米顆粒。王等人研究了并報(bào)道了表面包覆牛血清蛋白的金納米顆粒在癌細(xì)胞A549中作用機(jī)制。他們指出金納米顆粒濃度在5-100μM能殺死A549細(xì)，同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞的毒性較小為了探尋這種毒性的差異產(chǎn)生的原因們對(duì)金納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞的過程進(jìn)行了分析并對(duì)其進(jìn)入細(xì)胞后的定位進(jìn)行了監(jiān)測(cè)果明納米顆粒是通過內(nèi)吞途徑進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)其部分在溶酶體中在正常細(xì)胞中酶中的納米顆粒很容易會(huì)被清除掉而在癌細(xì)胞同不同，包覆了CTAB的金米顆粒很容易從溶酶體中逃逸然后進(jìn)入線粒體，這使得它很難被癌細(xì)胞清除，從而造成癌細(xì)胞死亡(Figure1-18)Figure.1-18DifferentfatesandeffectsofAuNRsincancercell,normalcell,andstemcellduetodistinctpathwaysforcellulartrafficking.線粒靶腫治優(yōu)勢(shì)2.1克服多耐腫瘤多藥耐藥是導(dǎo)致化療失敗的主要原因之一，外排蛋白P-蛋白P-gP)的高表達(dá)，是腫瘤耐藥細(xì)胞的重要特征，耐藥細(xì)胞的P-gp可化療藥物如阿霉素等外排，導(dǎo)致化療失敗。通過靶向腫瘤細(xì)胞線粒體瘤藥物直接遞送至線粒體靶點(diǎn)避漿及核的耐藥機(jī)制，如避免P-gp糖蛋白的外排，克服多藥耐藥，提高化療效果。Zhang等通構(gòu)建線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)遞送DOX至腫瘤細(xì)胞線粒體劇了腫瘤耐藥

細(xì)胞的死亡。如圖4.1所示以TPP修飾生育酚聚乙二醇琥珀酸(TPGS)與碳量子點(diǎn)CQDs)自聚集形成膠束，包裹，構(gòu)建線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)CQDs-TPGS-TPP/DOX。該制劑一方面通過TPGS抑P-gp糖蛋的過表達(dá)，另一方面通過將DOX直遞送至線粒體靶點(diǎn)，避免P-gp糖白的外排，大幅度殺腫瘤耐藥細(xì)胞，克服了多藥耐藥。圖4.1線體靶句藥物遞釋系統(tǒng)服腫瘤多藥耐藥示意圖2.2抑制腫轉(zhuǎn)腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的主要原因術(shù)化療等傳統(tǒng)治療方法消患者大部分腫瘤組織法制腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移肌-3-激酶Phosphoinositide-3kinases,PI3K)是種蛋白激酶，在很多癥患者中均存在PI3K異常以為療靶點(diǎn)開發(fā)的多種PI3K抑劑，已處于不同的臨驗(yàn)證階段，但其效果并不理想。近來等發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用PI3K抑劑進(jìn)行癌癥治療，可會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲性而轉(zhuǎn)移至其他器官，導(dǎo)致患者病情惡化這過程主要依賴于線粒功能應(yīng)答如圖4.2示，未經(jīng)抑制劑藥物處理的細(xì)胞，其線粒體主要圍繞細(xì)胞核分布，而用PI3K抑制(GDC-0941)處理腫瘤細(xì)胞，會(huì)引起線粒體向細(xì)胞膜特定區(qū)域移動(dòng)體占據(jù)胞周圍骨架這一重要位置能夠?yàn)榧?xì)胞遷移和侵襲提供大量能量，這表明細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和侵襲能力增強(qiáng)PI3K抑劑藥物，依賴于線粒體參與細(xì)胞膜骨架的重新分配提細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性遷移所需的能量與動(dòng)力進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲因此開PI3K抑制劑藥物時(shí)聯(lián)合線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)干預(yù)腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)的能量代謝過程而制腫瘤轉(zhuǎn)移。

圖4.2PI3K抑制劑促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移依賴線粒體參與細(xì)胞膜骨架重新分配示意圖相顯微鏡技術(shù)觀察PI3K抑劑GDC-0941)育前列腺癌PC3細(xì)內(nèi)細(xì)胞形態(tài)和位置變化((b)共焦顯微鏡觀察線粒體向膜板狀偽足分布的示意圖，綠色熒:纖維形肌動(dòng)蛋白，紅色熒:線粒體。2.3提高光效由光敏劑接收特定波長(zhǎng)激發(fā)光后子能級(jí)躍遷產(chǎn)單線態(tài)氧和自由基誘腫瘤細(xì)胞凋亡(光動(dòng)力療法，PDT)，產(chǎn)熱能，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞壞死光熱療法，PTT)。粒體是細(xì)胞內(nèi)能量生成的關(guān)鍵細(xì)胞器90%ROS產(chǎn)生線粒體且線粒體對(duì)熱刺激高度敏感過促使ROS產(chǎn)生誘腫瘤細(xì)胞凋亡。將線體靶向與PDT或PTT合，可提高光療效果，降低激光照射功率及光敏劑劑量同也降低光毒性因此線體靶向的PDT和已經(jīng)成為一種新的治療策略。Jung等通過TPP修香豆素氧化鐵CIO)，獲得線粒體靶向的光敏劑Mito-CIO。如圖4.3所示，Mito-CIO可靶Hela細(xì)胞線粒體740nm光照射刺激在線粒體內(nèi)產(chǎn)生過高熱，加劇腫瘤細(xì)胞死亡，獲得更高效的。圖4.3線粒體靶向的光敏劑用于瘤光熱治療示意圖很多光敏劑由于其在近紅外波段吸收強(qiáng)度有限需使用較高的激光照射功率出耐受限度，對(duì)周圍正常組織有潛在的損傷。如二氧化(Ti0由于優(yōu)良的光催化特性、光穩(wěn)定性，能夠產(chǎn)生不同細(xì)胞毒性的ROS引起腫瘤細(xì)胞嚴(yán)重死亡，被認(rèn)為是用于P療良好的光敏劑。黑色Ti0納粒將其光吸波段從紫外拓寬到近紅外區(qū)域，可用于PDT/PTT聯(lián)合療。但由于黑色Ti0在近紅外波段吸較弱，使其PTT治療的激光功率高達(dá)2，出了常規(guī)使用限度980nm:0.72W/cm)對(duì)周圍正常組織有潛在傷害。

線粒體靶向的PDT/PTT有可能提供新的契機(jī)解決這個(gè)難題。Mou等設(shè)線粒體靶向的PDT/PTT聯(lián)制劑G-Ti0-TPP大幅度降低了激光照射頻率及給藥劑量高體內(nèi)安全性，為腫瘤治療臨床轉(zhuǎn)化提供了很好的思路圖4.4所示過超聲破碎法將黑色Ti0(B-Ti0)改良為綠色Ti0(G-Ti0)，可得更穩(wěn)定的增強(qiáng)型近紅外吸收。經(jīng)TPP修，得線粒體靶向的Ti0納米粒G-Ti0-TPP靶向至線粒體在功率為0.72W/cm

的980nm激光射條件下，就能產(chǎn)生很好的光療效果，體內(nèi)外給藥劑量大幅度降低，生物相容性較好。圖4.4線粒體靶向的光動(dòng)力和光聯(lián)合治療腫瘤示意圖2.4增強(qiáng)免治免疫治療引入功能性的抗原特異性免疫反應(yīng)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)期的免疫記憶防殺傷腫免疫療法包括腫瘤疫工抗原呈遞細(xì)胞治療腫瘤免疫檢查位點(diǎn)治療及細(xì)胞療法等?；贒C細(xì)的腫瘤免疫治療臨床應(yīng)用的局限性之一，是產(chǎn)生腫瘤抗原特異性細(xì)胞應(yīng)答的效率較低細(xì)毒性T細(xì)胞導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答是解決這個(gè)問題的關(guān)鍵。PDT可通產(chǎn)生ROS，誘導(dǎo)腫瘤胞凋亡，激活機(jī)體宿主免疫應(yīng)答。將光敏劑靶向輸送至線粒體，可促進(jìn)產(chǎn)生更多的ROS加劇腫瘤細(xì)胞凋亡，釋放大量的腫瘤抗原，進(jìn)一步提高腫瘤免疫治療的效果Marrache等借助于線粒體靶向的光動(dòng)力療法，大幅度激活了T細(xì)免疫應(yīng)答。如圖4.5所示，以TPP飾的生物可降解聚合物PLGA-b-PEG-TPP為載體，包封疏水性光敏劑ZnPc構(gòu)建線粒體向納米粒T-ZnPc-NPs制將有遞送至線粒體后660激光射加劇ROS產(chǎn)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡放的腫瘤抗原促使DC細(xì)成熟，激活細(xì)，產(chǎn)生更多的IFN-細(xì)胞因子，殺傷腫瘤細(xì)胞?；诰€粒體靶向的光療引起的

促免疫應(yīng)答效應(yīng)聯(lián)合現(xiàn)有的免檢查點(diǎn)療法能將起到協(xié)同增效的效果腫瘤治療提供較大的潛力價(jià)值。圈4.5線粒體靶向的光動(dòng)力療法高腫瘤免疫治療示意圖。(aa)激觸發(fā)線粒體靶向納米粒在線粒體內(nèi)產(chǎn)生ROS，導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和壞(通過納米沉淀法合成T-ZnPc-NPs作用于瘤粒靶的物子線粒體功能障礙在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要的角色胞能量代謝紊亂干擾、細(xì)胞凋亡受損、線粒體DNA(mtDNA)變等。深入了解調(diào)控這些關(guān)鍵環(huán)節(jié)中逆轉(zhuǎn)線粒體功能障礙的藥物分子及其作用機(jī)制后續(xù)實(shí)現(xiàn)腫瘤線粒體內(nèi)藥物遞送精準(zhǔn)治療低靶效應(yīng)揮物最大抗腫瘤療有重要意義來用于線粒體靶點(diǎn)的藥物不斷出現(xiàn)，臨床批準(zhǔn)應(yīng)用的抗癌藥如依托泊(VP-16)長(zhǎng)春瑞濱；臨床前研究的新靶點(diǎn)候選藥物，如神經(jīng)酞胺MKT077、CD437、尼明、樺木酸等，報(bào)道顯示這些分子可直接作用于線粒體觸發(fā)凋亡研究發(fā)現(xiàn)這些線粒體靶藥物受身理化性質(zhì)限制體分布到腫瘤細(xì)胞線粒體的數(shù)量有限，需要借助于藥物遞釋系統(tǒng)，以期實(shí)現(xiàn)線粒體靶點(diǎn)藥物的高效安全治療。3.1參與細(xì)代轉(zhuǎn)的物線粒體是細(xì)胞內(nèi)參與能量代謝的重要亞細(xì)胞器粒體是正常細(xì)胞的主要供能單位腫瘤細(xì)胞即使在有氧的條件下也以無氧糖酵解為主要的獲能方(即效)瘤細(xì)胞的線粒體數(shù)量并沒有明顯減少示腫瘤細(xì)胞的線粒體功能是異常的過建立不同背景的線粒體和細(xì)胞核融合模型，發(fā)現(xiàn)功能異常的線粒體具有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和克隆形成的能力，而正常細(xì)胞的線粒體則不具備這一功能。2-脫氧葡萄糖可抑制糖酵解溴丙酮酸乳酸類似物顯示較好的抑制腫瘤生長(zhǎng)的特性氯尼達(dá)明，可抑制糖酵解，提高阿霉素和順鉑的細(xì)胞毒性。此外，根皮素，可使得癌細(xì)胞在低氧條件下對(duì)道諾霉素更敏感有抗腫瘤活性凋和克服耐藥等功能氯酸鹽，

可抑制腫瘤細(xì)胞的丙酮酸脫氫酶激酶關(guān)鍵酶用于腦瘤和一些實(shí)體瘤有顯的抗腫瘤效果。3.2調(diào)控誘細(xì)損的物細(xì)胞內(nèi)90%以上的ROS主來源于線粒體。一些藥物可通過提高R水平療腫瘤。三氧化二砷可通過干預(yù)氧化磷酸化引起電子泄露增加而致ROS水平提高導(dǎo)瘤細(xì)胞凋亡。維生素類似的II期床研究，應(yīng)用于黑色素瘤、前列腺癌、結(jié)直腸癌、間皮瘤、乳腺癌治療I/II期臨研究證明2-甲雌二醇可選擇性殺死人白血病細(xì)胞，并且可使患有惡性腫瘤或多發(fā)骨髓瘤的病人病情穩(wěn)定外硫氨酸亞礬胺和伊美克也處于I期床研究。3.3介導(dǎo)線體亡路藥細(xì)胞凋亡主要有兩種途徑種由死亡受體介導(dǎo)另種則是由線粒體介導(dǎo)線粒體在調(diào)控細(xì)胞凋亡中占有很重要的地位。其中Caspase-3Caspase-9表達(dá)增加或激活，是介導(dǎo)線粒體凋亡通路最主要的路徑。細(xì)胞色素C釋放激活家，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。細(xì)胞色素C釋或增加最直接的方法是線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換(Mitochondrialpermeabilitytransition,MPT)，透性增加。傳統(tǒng)的化療成分主要通過生理凋亡控制的內(nèi)在因素起線粒體膜通透性增加而多于研究階段的抗癌藥物括尼達(dá)明、亞砷酸鹽、樺木酸、CD437和些兩親性陽離子螺旋肽，直接作用在線粒體膜，或者線粒體滲透性轉(zhuǎn)換(Mitochondrialpermeablitytransitionpore,PTPC)?？沟蛲龅鞍譈cl-2家族白可調(diào)線粒體膜穩(wěn)定性制細(xì)胞凋亡腫瘤細(xì)胞線粒體外膜高表達(dá)抗凋亡蛋白Bcl-2，減Bax蛋促凋亡效應(yīng)。靶向特定的PTPC復(fù)物，可克服Bcl-2介導(dǎo)抗凋亡。一種方法包括交聯(lián)PTPC的關(guān)鍵氧化還原敏感硫醇基；另一種方法包括應(yīng)用線粒體苯二氮受體的配體。針對(duì)Bcl-2序列的特定反義寡核普酸如G3139)，可顯著抑制腫瘤細(xì)胞增殖或增加化療藥物敏感性G3139和棉子酚BH3類似，與化療藥物聯(lián)合治療腫瘤于期床究苯二