藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證第1頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日二、用途（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草時，分析方法需經(jīng)驗證。（二）藥物生產(chǎn)方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時，分析方法需經(jīng)驗證。第2頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日三、需驗證的分析項目

1.鑒別試驗；

2.雜質(zhì)定量或限度檢查；

3.原料或制劑中有效成分含量測定；

4.制劑中其它成分（降解產(chǎn)物、防腐劑等）的測定；

5.溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法。

第3頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日四、驗證內(nèi)容

驗證內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性第4頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（一）準(zhǔn)確度（accuracy）準(zhǔn)確度是指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。

測定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗法”和“加樣回收試驗法”。

第5頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

回收試驗空白+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M第6頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

加樣回收試驗已準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實樣品+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M第7頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

數(shù)據(jù)要求規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備高、中、低三個不同濃度樣品各測三次。第8頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日1.含量測定方法的準(zhǔn)確度

原料藥可用已知純度的對照品或樣品進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。

第9頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

制劑可用含己知量被測物的各組分混合物進(jìn)行測定，即采用在空白輔料中加入原料藥對照品的方法。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行測定，或與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。第10頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

中藥分析的準(zhǔn)確度一般用加樣回收試驗衡量。中藥回收率一般要求在95～105%范圍內(nèi)，有些方法操作步驟繁多時，可要求在90～110%范圍內(nèi)。RSD一般在2%以內(nèi)。第11頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日2．雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測定。如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較。第12頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（二）精密度（precision）精密度是指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差（d）、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)（變異系數(shù)，CV）表示。第13頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日偏差（d）：測量值與平均值之差第14頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

相對偏差＝

允許差：容量分析（中和法、非水滴定法、銀量法、絡(luò)合滴定法、重氮化法、氧化還原法）≤0.3%；重量法≤0.5%；氧瓶燃燒法≤0.5%；儀器分析≤3%、凱氏定氮法≤1%第15頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（SD或S）第16頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日相對標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（RSD），也稱變異系數(shù)（CV）第17頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

1.重復(fù)性(repeatability):在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當(dāng)作100%，至少測6次進(jìn)行評價。第18頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

2.中間精密度同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。

3.重現(xiàn)性(reproducibility)不同實驗室，不同分析人員測定結(jié)果的精密度。

數(shù)據(jù)要求：需報告RD，RSD和可信限。第19頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（三）檢測限（limitofdetection，LOD）

檢測限系指試樣在確定的實驗條件下，被測物能被檢測出的最低濃度或含量。是限度檢驗效能指標(biāo)，無需定量測定，只要指出高于或低于該規(guī)定濃度即可。

第20頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日1．非儀器分析目視法用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。第21頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

2．信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法（儀器分析方法），是把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1時的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。

第22頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日（1）空白值＝0時；①測定背景10次以上，求出標(biāo)準(zhǔn)差σb。②將σb乘以三倍；③在工作曲線上求出3σb相對應(yīng)的濃度Xb；即為方法的檢出值；

（2）空白值不等于0；①測定背景10次以上，求出標(biāo)準(zhǔn)差σb

；②將σb

乘以三倍；③在工作曲線上求出3σb

相對應(yīng)的濃度Xb

；④將求得的對應(yīng)濃度值加上空白值即得該方法的檢出限。

第23頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日（四）定量限（1imitofquantitation，LOQ）指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度要求。

第24頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為10∶1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定，也可按1984年國際純粹和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(IVPAC)規(guī)定：用儀器所測空白背景響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差（SD）的10倍為估計值，再經(jīng)試驗確定方法的實際測定下限。

第25頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日儀器分析：通過測定一組空的樣品的背景信號后計算標(biāo)準(zhǔn)差S。以1OS來估算定量限度。（以定量限度制備的樣品來驗證）

非儀器分析：通過分析己知被測物濃度的樣品并確定一個樣品中被測物可被準(zhǔn)確和精密測定出的最低濃度（量）。

第26頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（五）專屬性（specificity）（選擇性）：指有其他成分（雜質(zhì)、降解物、輔料等）可能存在情況下采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性，能反映該方法在有共存物時對供試物準(zhǔn)確而專屬的測定能力，是指該法用于復(fù)雜樣品分析時是否受到相互干擾程度的度量。

第27頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日通常通過分析含有加了雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、有關(guān)化學(xué)物質(zhì)或安慰劑成分的樣品，將所獲分析結(jié)果與未加前述成分之樣品的測試結(jié)果進(jìn)行比較，兩組測試結(jié)果之差即專屬性。

第28頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日1．鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)別，不含被分析的樣品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均應(yīng)呈負(fù)反應(yīng)。

2．含量測定和雜質(zhì)測定色譜法和其他方法，應(yīng)附代表性圖譜，亦說明專屬性。圖中應(yīng)標(biāo)明各組份的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。第29頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（六）線性（Linearity）在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。線形通常用最小二乘法處理數(shù)據(jù)求得回歸曲線的斜率（Slope）來表示。數(shù)據(jù)要求：至少需要五個濃度考察線形，需提供相關(guān)系數(shù)、y截距（是檢定的可能偏差）、回歸斜率及方差等參數(shù)，應(yīng)列出回歸方程數(shù)和線性圖。

第30頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日（七）范圍（Range）：指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性的條件下，測試方法適用的高、低限濃度或量的區(qū)間。范圍的確定可因測定項目不同而有不同要求：含量測定范圍為80%-120%；含量均勻度范圍為70%-130%；雜質(zhì)測定應(yīng)為被測雜質(zhì)限度的50%-120%；溶出度應(yīng)為測定范圍的±20%。

第31頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日（八）耐用性指測定條件稍有變動時，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗提供依據(jù)。是衡量實驗室和工作人員之間在正常情況下實驗結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。

分析方法重現(xiàn)性的測定是通過在不同的實驗室內(nèi)不同的實驗者對同一樣品的分別測試而獲得的。（獲得的這種再與正常檢定下的精密度進(jìn)行比較，從而確定該法的耐用性，或稱粗放度）第32頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

（九）應(yīng)用

1.鑒別試驗除專屬性、耐用性外，其它都不要求。

2.雜質(zhì)的限量檢查除專屬性、檢測限、耐用性外，其它都不要求。雜質(zhì)的含量測定除檢測限外，其它都要求。

3.含量測定及溶出量測定除檢測限、定量限外，其它都要求。第33頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日（十）各種含量測定方法對效能指標(biāo)的要求

1.容量分析法：用原料藥精制品(含量>99.5％)或?qū)φ掌房疾旆椒ǖ木芏龋鄬?biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)不大于0.2％；進(jìn)行回收率試驗?；厥章室话阍?9.7～100.3％之間。

第34頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

2.UV法：用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)行測定，其RSD一般不大于1％。制劑的測定，回收率一般應(yīng)在98％～102％之間。第35頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

線性：吸光度A一般在0.2～0.7，濃度點n＝5。用濃度c對A作線性回歸處理，得一直線方程，r應(yīng)達(dá)到0.9999(n＝5)，方程的截距應(yīng)近于零。第36頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日

3.HPLC法：要求RSD<2％，回收率98％～102％之間。線性范圍：用精制品配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度點n應(yīng)為5～7，用濃度c對峰高h(yuǎn)或被測物的響應(yīng)值之比進(jìn)行回歸處理，建立回歸方程，r應(yīng)大于0.999，截距應(yīng)趨于零。第37頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日99：73.精密度是指（B）

A.測得的測量值與真值接近的程度

B.測得的一組測量值彼此符合的程度

C.表示該法測量的正確性

D.在各種正常試驗條件下，對同一樣品分析所得結(jié)果的準(zhǔn)確程度

E.對供試物準(zhǔn)確而專屬的測定能力第38頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日99x：76．精密度是指該法（D）

A.測得的測量值與真值接近的程度

B.測得的測量值與回收率接近的程度

C.測量的正確性

D.測得的一組測量值彼此符合的程度

E.對供試物準(zhǔn)確而專屬的測定能力第39頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日96：138．在藥物分析中，精密度是表示該法的（BD）

A.測量值與真值接近程度

B.一組測量值彼此符合程度

C.正確性

D.重現(xiàn)性

E.專屬性第40頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日95：[106—110]應(yīng)要求的效能指標(biāo)：

A.檢測限B.定量限

C.兩者均要求D.兩者均不要求95：106.含量測定方法評估（D）95：107.雜質(zhì)限量檢查（A）95：108.雜質(zhì)定量測定（B）95：109.溶出度測定（D）95：110.中間體含量測定（D）第41頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日97：126．藥物雜質(zhì)檢查所要求的效能指標(biāo)為（CDE）

A.準(zhǔn)確度

B.精密度

C．選擇性

D.檢測限

E.耐用性第42頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日98：138．評價藥物分析所用的測定方法的效能指標(biāo)有（BCD）

A.含量均勻度

B.精密度

C.準(zhǔn)確度

D.粗放度

E.溶出度第43頁，共50頁，2023年，2月20日，星期日例[1～5]A．精密度B．定量限C．兩者皆是D．兩者皆不是1.某法測得一組測量值間彼此符合程度（A）2.測量值和真值接近的程度（D）3.測定結(jié)果的重現(xiàn)性（A）4.可定量測得被測藥物的最低水平參數(shù)