溶酶體與過(guò)氧化物酶體

溶酶體與過(guò)氧化物酶體第1頁(yè)/共37頁(yè)第四節(jié)溶酶體與過(guò)氧化物酶體

一、溶酶體溶酶體：Lysosome，由單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類的囊泡狀細(xì)胞器。其主要功能是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)的消化和保護(hù)作用。第2頁(yè)/共37頁(yè)1、溶酶體的形態(tài)結(jié)構(gòu)1949年，ChristiandeDuve和他的同事在研究亞細(xì)胞組分時(shí)發(fā)現(xiàn)了溶酶體，1955年，deDuve與Novikoff首次用電子顯微鏡證明了溶酶體的存在。溶酶體是一種異質(zhì)性(heterogeneous)的細(xì)胞器,不同來(lái)源的溶酶體形態(tài)、大小,甚至所含有酶的種類都有很大的不同。溶酶體呈小球狀,大小變化很大，直徑一般0.25～0.8μm，最大的可超過(guò)1μm,最小的直徑只有25～50nm。

溶酶體存在于所有的原生動(dòng)物與多細(xì)胞動(dòng)物，少數(shù)細(xì)胞如哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞除外，植物有類似的液泡和圓球體。第3頁(yè)/共37頁(yè)具吞噬作用的肝Kupper細(xì)胞中不同大小的溶酶體

第4頁(yè)/共37頁(yè)2、溶酶體膜的穩(wěn)定性由于溶酶體中含有各種不同的水解酶類,所以溶酶體在生活細(xì)胞中必須是高度穩(wěn)定的。溶酶體的穩(wěn)定性與其膜的結(jié)構(gòu)組成有關(guān)：溶酶體膜中嵌有質(zhì)子運(yùn)輸泵(H+-ATPase)和Cl-離子通道蛋白，維持溶酶體內(nèi)部的酸性環(huán)境(pH約為4.6～4.8)。溶酶體膜含有各種不同酸性的、高度糖基化膜整合蛋白,防止自身膜蛋白的降解。溶酶體膜含有較高的膽固醇,促進(jìn)了膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。

第5頁(yè)/共37頁(yè)3、溶酶體的酶類溶酶體內(nèi)含有60多種酶類，多數(shù)為可溶性的酶，少數(shù)整合于膜上，最適pH值是5.0，故均為酸性水解酶(acidhydrolases)。

酸性磷酸酶是溶酶體的標(biāo)志酶

包括∶蛋白酶、核酸酶、脂酶、糖苷酶等

第6頁(yè)/共37頁(yè)溶酶體的形態(tài)、大小、V型質(zhì)子泵及所含主要酶類示意圖第7頁(yè)/共37頁(yè)4、溶酶體的類型根據(jù)溶酶體處于完成其生理功能的不同階段分：初級(jí)溶酶體、次級(jí)溶酶體、殘余體第8頁(yè)/共37頁(yè)初級(jí)溶酶體(primarylysosome)剛剛從反面高爾基體形成的小囊泡,僅含有水解酶類，但無(wú)作用底物，外面只有一層單位膜，其中的酶處于非活性狀態(tài)。第9頁(yè)/共37頁(yè)次級(jí)溶酶體(secondarylysosome)初級(jí)溶酶體與細(xì)胞內(nèi)的自噬泡或異噬泡、胞飲泡或吞噬泡融合形成的復(fù)合體，有水解酶和相應(yīng)的底物，是一種將要或正在進(jìn)行消化作用的溶酶體。根據(jù)所消化的物質(zhì)來(lái)源不同,分為自噬性溶酶體、異噬性溶酶體。自噬性溶酶體：作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)異噬性溶酶體：它的作用底物是外源性的,即細(xì)胞經(jīng)吞噬、胞飲作用所攝入的胞外物質(zhì)第10頁(yè)/共37頁(yè)第11頁(yè)/共37頁(yè)殘余體（residuallysosome）未被消化的物質(zhì)殘余在溶酶體中形成殘余小體或后溶酶體，以胞吐外排。也可能留在細(xì)胞內(nèi)逐年增多，如表皮細(xì)胞的老年斑，肝細(xì)胞的脂褐質(zhì)第12頁(yè)/共37頁(yè)第13頁(yè)/共37頁(yè)溶酶體的類型及在細(xì)胞消化過(guò)程中的作用

第14頁(yè)/共37頁(yè)5、溶酶體的發(fā)生甘露糖-6-磷酸途徑(mannose6-phosphatesortingpathway)：溶酶體的酶類在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上起始合成,跨膜進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的腔,在順面高爾基體帶上甘露糖6-磷酸標(biāo)記后在高爾基體反面網(wǎng)絡(luò)形成溶酶體分泌小泡,最后還要通過(guò)脫磷酸才成為成熟的溶酶體。第15頁(yè)/共37頁(yè)①溶酶體酶蛋白的M6P標(biāo)記糖基化：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行N-連接糖基化,經(jīng)加工后形成帶有8個(gè)甘露糖殘基和2個(gè)N-乙酰葡萄糖胺殘基的糖蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到高爾基體

磷酸化：高爾基體第16頁(yè)/共37頁(yè)磷酸化第17頁(yè)/共37頁(yè)②溶酶體酶的M6P分選途徑第18頁(yè)/共37頁(yè)6、溶酶體的功能溶酶體的主要功能是消化作用。其消化底物的來(lái)源有三種途徑:①自體吞噬(autophagy),吞噬的是細(xì)胞內(nèi)原有的物質(zhì);②通過(guò)吞噬形成的吞噬體(phagosome)提供的有害物質(zhì);③通過(guò)內(nèi)吞作用(endocytosis)提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

第19頁(yè)/共37頁(yè)第20頁(yè)/共37頁(yè)①消化和防御功能吞噬作用：phagocytosis，外來(lái)的有害物質(zhì)被吞入細(xì)胞后,即形成由膜包裹的吞噬小體(phagosome),初級(jí)溶酶體很快同吞噬體融合形成次級(jí)溶酶體，為異噬性溶酶體

吞噬細(xì)胞：巨噬細(xì)胞(macrophages)和中性粒細(xì)胞(neutrophils)保護(hù)防御、獲取營(yíng)養(yǎng)及衰老的、進(jìn)入編程死亡的細(xì)胞的吞噬

第21頁(yè)/共37頁(yè)吞噬作用第22頁(yè)/共37頁(yè)②在細(xì)胞器更新中的作用自噬作用：autophagy清除降解細(xì)胞內(nèi)受損傷的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、衰老的細(xì)胞器、以及不再需要的生物大分子等吞噬過(guò)程：被吞噬的細(xì)胞器和生物大分子先要被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜包裹起來(lái)形成自噬泡(autophagicvacuole),然后與初級(jí)溶酶體融合形成次級(jí)溶酶體,即自噬性的溶酶體饑餓、老化第23頁(yè)/共37頁(yè)自體吞噬泡形成的機(jī)制第24頁(yè)/共37頁(yè)③在發(fā)育過(guò)程中的作用自溶作用：autolysis，細(xì)胞的自我毀滅(cellularself-destruction),即溶酶體將酶釋放出來(lái)將自身細(xì)胞降解。昆蟲(chóng)變態(tài)、青蛙發(fā)育、骨骼形成、乳腺退化第25頁(yè)/共37頁(yè)④在受精過(guò)程中的作用細(xì)胞外消化：extracellulardigestion，將水解酶釋放到細(xì)胞外消化細(xì)胞外物質(zhì)。第26頁(yè)/共37頁(yè)7、溶酶體與疾病儲(chǔ)積?。号_(tái)—薩氏病，溶酶體缺氨基己糖酯酶，積神經(jīng)節(jié)苷脂，致精神呆滯，死亡。肺結(jié)核：結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素,也無(wú)莢膜和侵襲性酶。但是菌體成分硫酸腦苷脂能抵抗溶酶體的殺傷作用,使結(jié)核桿菌在肺泡內(nèi)大量生長(zhǎng)繁殖,導(dǎo)致巨噬細(xì)胞裂解,釋放出的結(jié)核桿菌再被吞噬而重復(fù)上述過(guò)程，引起肺組織鈣化和纖維化。矽肺：矽粉末（SiO2），被吞噬，溶酶體膜破裂，釋放水解酶，細(xì)胞死亡，矽粉釋放又被其它細(xì)胞吞噬。最后刺激成纖維細(xì)胞膠原纖維結(jié)的沉積，肺的彈性降低，功能受損。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎：殘余體經(jīng)胞吐把殘?jiān)蜌堄嗝概诺郊?xì)胞間，如局部出現(xiàn)適合pH，就繼續(xù)發(fā)揮酶作用。致癌與治癌第27頁(yè)/共37頁(yè)二、過(guò)氧化物酶體過(guò)氧化氫酶體又稱微體（microbody，peroxisome）：由單層膜圍繞的、內(nèi)含一種或幾種氧化酶類的細(xì)胞器。1954年，Rhodin首次在鼠腎的腎小管上皮細(xì)胞中觀察到。第28頁(yè)/共37頁(yè)過(guò)氧化氫酶體的電鏡圖第29頁(yè)/共37頁(yè)肝細(xì)胞微體圖第30頁(yè)/共37頁(yè)過(guò)氧化氫酶的三級(jí)結(jié)構(gòu)第31頁(yè)/共37頁(yè)1.過(guò)氧化氫酶體功能在動(dòng)物中：①參與脂肪酸的β-氧化；②具有解毒作用，過(guò)氧化氫酶利用H2O2將酚、甲醛、甲酸和醇等有害物質(zhì)氧化，飲入的酒精1/4是在微體中氧化為乙醛。在植物中：①參與光呼吸，將光合作用的副產(chǎn)物乙醇酸氧化為乙醛酸和過(guò)氧化氫，②在萌發(fā)的種子中，進(jìn)行脂肪的β-氧化，產(chǎn)生乙酰輔酶A，經(jīng)乙醛酸循環(huán)，由異檸檬酸裂解為乙醛酸和琥珀酸，加入三羧酸循環(huán)，因涉及乙醛酸循環(huán)，又稱乙醛酸循環(huán)體。第32頁(yè)/共37頁(yè)2·過(guò)氧化氫酶在生物體內(nèi)的作用原理過(guò)氧化氫酶是微體的識(shí)別標(biāo)示酶，是催化過(guò)氧化氫分解成氧和水的酶，存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物體內(nèi)?？梢詫2O2催化分解成H2O和O2，對(duì)人體無(wú)害。過(guò)氧化氫酶存在于所有已知的動(dòng)物的各個(gè)組織中，特別在肝臟中以高濃度存在。這是因?yàn)楦闻K是人體中最大的化工廠，要進(jìn)行大量的分解合成代謝，產(chǎn)生H202的速度很快，所以需要高濃度過(guò)氧化氫酶工作保護(hù)肝細(xì)胞。第33頁(yè)/共37頁(yè)微體與溶酶體的區(qū)別特征溶酶體微體形態(tài)大小球形，無(wú)酶晶體φ0.2~0.5μm球形，酶晶體φ0.15~0.25μm酶種類酸性水解酶氧化酶