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課時跟蹤檢(三十五)基工程一、選擇題(2014·重高下面為利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖相關(guān)敘確的()A.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和聚酶參與B③侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)整合到④的染色上C.的染色體上若含抗蟲基因,則⑤就表現(xiàn)出抗蟲性狀D.只表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異.下列有關(guān)基因工程的說法正確的(A.如果某種生物的cDNA文中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同,則這兩個基因的結(jié)構(gòu)也完全相同B一個基因表達載體的組成,除了目的基因外,還必須有啟動子、終止密碼子和標(biāo)記基因C.的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為轉(zhuǎn)化D.目基因?qū)胫参锛毎蛣游锛毎某S梅椒ㄊ秋@微注射法下是種限制性核酸內(nèi)切酶分的識別序列和剪切位點箭頭表示切點切的斷面為黏性末端)。相關(guān)敘述錯誤的)限制酶:↓GATC限制酶:↓GG—限制酶:↓GATCC—A.不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點,體現(xiàn)了酶的專一B限制酶和識別的序列都包含6個基對C.制酶和酶3剪出的黏性末端相同D.夠別和切割分內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2科學(xué)家采用基因程技術(shù)將矮牽牛中控制藍色色素合成的基因轉(zhuǎn)移到玫瑰中以育藍玫瑰,下列操作正確的()A.利用DNA分雜交技術(shù)從矮牽牛的基因文庫中獲取基因B用氯化鈣溶液處理玫瑰葉肉細胞,使其處于感受態(tài)C.含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因玫瑰細胞D.基a導(dǎo)入玫瑰細胞液泡中,防止其經(jīng)花粉進入野生玫瑰.草甘膦是一種可以殺滅多種植包括農(nóng)作物)的除草劑。草甘膦殺死植物的原理在能夠破壞植物葉綠體或質(zhì)體中的合酶通過轉(zhuǎn)基因的方法農(nóng)作物產(chǎn)生更多的就能抵抗草甘膦,從而讓農(nóng)作物不被草甘膦殺死。下列有關(guān)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的培育分析正確的()A.可通過噴灑草甘膦來檢驗轉(zhuǎn)基因大豆是否培育成功
B只能以大豆受精卵細胞作為基因工程的受體細胞C.轉(zhuǎn)基因操作過程中一定要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶D.要EPSPS合酶基因進入大豆細胞,大豆就會表現(xiàn)出抗草甘膦性狀基工程利用某的基(圖甲)和Pl噬體載體(圖乙)構(gòu)建重組限性核酸內(nèi)切酶的酶切位點分別是Ⅱ、EcoⅠSauⅠ下列分析錯誤的()A.構(gòu)建重組時可用Ⅱ和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬體載體B構(gòu)建重組時可用EcoⅠ和SauⅠ切割目的基因所在片段和Pl噬體載體C.乙中的Pl噬體載體只用EcoR切割后,含有游離的磷酸基團D.Ⅰ切割目的基因所在片段菌體載體,再用連酶連接,只能產(chǎn)生一種重組.基是藍藻擬核上控制葉綠素合成的基因。為研究該基因?qū)θ~素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失chIL基的變異株細胞。技術(shù)路線如下圖所示,對此描述錯誤的()A.基因的基本組成單位是脫氧核苷酸B①、②過程中使用限制酶的作用是將子的磷酸二酯鍵打開C.、②過程都要使用聚酶D.操成功,可用含紅霉素的培養(yǎng)基篩選出該變異株多腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基編的產(chǎn)物半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在時,可以產(chǎn)生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色?;蚬こ讨谐@迷撛韽膶?dǎo)入質(zhì)的受體細胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞,過程如下圖所示。下列說法錯誤的)A.因工程中,構(gòu)建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后
代,并表達和發(fā)揮作用B轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用
理,使其處于能吸收周圍的態(tài)C.落顏色為白色的是菌落②D.落中的目的基因是否表達,可采用的檢測辦法是抗—抗體雜交二、非選擇題威海模擬)人類在預(yù)防與診療傳染性病的過程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,疫苗生產(chǎn)和抗體制備的部分程如下圖:過程①代表的是____________過程③構(gòu)建A基重組載體時,必須使用限制性核酸內(nèi)切酶兩種工具酶。由過程③構(gòu)建A基重組載體,其組成除了目基因外,還必須有啟動子__________________及復(fù)制原點等。過程④要檢測A基是否進入受體細胞用的方法法檢測A基在受體細胞內(nèi)是否翻譯出蛋白質(zhì),需________________法。過程⑦采用的實驗技術(shù)是_________________________________________________。10我們?nèi)粘3缘拇竺字需F含量極低,科研人員通過基因工程等技術(shù),培育出了鐵含量比普通大米高60%轉(zhuǎn)基因水稻,改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下面為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖,請回答:在上述工程中,鐵結(jié)合蛋白基因稱________獲取該基因后常用________術(shù)進行擴增。構(gòu)建重組Ti質(zhì)時通常要用同種限制酶分切____________________________將重組Ti質(zhì)轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時,以________處理農(nóng)桿菌,使重組Ti質(zhì)易于導(dǎo)入。將含有重組Ti質(zhì)的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織同培養(yǎng)時過培養(yǎng)基的篩選培養(yǎng)可以獲得__________________;培養(yǎng)基與養(yǎng)基2的別是。檢測培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達到,需要檢測轉(zhuǎn)基因水________________.基因工程自20世70年興起之后,在短短年間得到了飛速發(fā)展,目前成為生科學(xué)核心技術(shù),在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、環(huán)境、能源和醫(yī)藥衛(wèi)生等方面展示出美好的前景,據(jù)相關(guān)資料回下列有關(guān)問題:
rr如圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的部分示意(為氨芐青霉素因,甲、乙表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細胞。PstⅠ酶和SmaⅠ酶切割基因后將產(chǎn)生不同的性末端。圖中甲代表的是,可表,可用和_提取魚的抗凍蛋白基因以避免目的基因末端發(fā)生任意連接,用此二酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生的片有________。重癥聯(lián)合免疫缺陷病簡稱SCID)是代表一種體液和細胞免疫嚴缺陷的綜合征者先天腺苷酸脫氨酶基因缺乏,運用現(xiàn)代生物技術(shù)進行治療,可以使患者的免疫功能得到很大的修復(fù)。下圖表示治療的過程這個實例中攜人正常ada因的細菌相當(dāng)于_______充當(dāng)“分子運輸車”的是,的基因是________受體細胞是________________,種治療方法稱為_。12(2015·海區(qū)質(zhì)檢)菊天牛是菊花的主要害蟲之一科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花,培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程,請據(jù)圖回答:[注:卡那霉素抗性基因(作為標(biāo)記基因,菊花葉片對卡那霉素高度敏]為了促進土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒,可________處理土農(nóng)桿菌,使其處于感受態(tài)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能的特點,使目的基因進入受體細胞中,并插入到菊花細胞________上,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素________培養(yǎng)基中,在適宜條件下進行培養(yǎng),篩選轉(zhuǎn)基因菊花。用方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時據(jù)________的核苷酸序列設(shè)計特異引
物,以為板進行第一輪擴增。答
案.D構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和連酶,不需要DNA聚酶;含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)的整到受體細胞的染色體上,而不是重組Ti質(zhì)粒整合到受體細胞的染色體上;導(dǎo)入體細胞的目的基因表達后,轉(zhuǎn)基因植株方能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀,若目的基因在受體細胞中不表達,轉(zhuǎn)基因植株不能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀;⑤表現(xiàn)出抗蟲性則表明該植株細胞發(fā)生了基因重組,基因重組是可遺傳變異。.cDNA是mRNA反錄得到的,由于mRNA缺內(nèi)子和啟動子,所以即使某生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組庫中的某個基因控制的性狀相同,這兩個基因的結(jié)構(gòu)也可能是不相同的?;虮磉_載體包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子,而終止密子存在于mRNA上將目的因?qū)胫参锛毎ǔS棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,導(dǎo)入動物細胞用顯微注射法。選不同限制酶有不同的識別序列和切割位點,體了酶具有專一性;限制和別序列分別是CCGCGGGGATCC,均為6個基對;限制酶1和3剪的黏性末端相同;三種限制酶均不能識別和切割中糖核苷序列。.選A將的基因?qū)胛⑸锛毎麜r,用氯化鈣溶液處理受體細胞,可使其處于受態(tài),利于目的基因的導(dǎo)入。將目的基因?qū)朊倒迦~肉細胞的葉綠體基因組中,可防止其經(jīng)花粉進入野玫瑰,液泡中無。選A可過噴灑草甘膦來檢驗轉(zhuǎn)基因大豆是否培育成功轉(zhuǎn)基因植物也可用植體細胞作為受體細胞;轉(zhuǎn)基因操作時不一定要用同一種限制酶;基因成功轉(zhuǎn)入后,性狀不一定能夠成功達,還需要進一步檢測。.由題圖可知,Ⅱ、Sau3A及R三酶在目的基因和Pl噬體都有切口,故可用BglⅡ和SauⅠEcoRⅠSau3AⅠ切目的基因所在片段和菌體載體;從圖乙知菌體載體為環(huán)狀,用EcoⅠ割后產(chǎn)生兩反向雙螺旋鏈狀,游離的磷酸基團;用EcoRⅠ割的基因所在片段和噬體載體,再用連接酶接,能產(chǎn)生不止一種重組DNA選基的基本組成單位是脫氧核苷酸;限制酶作用于質(zhì)粒和目的基因的磷酸二酯鍵,使它們形成相同的黏性末端①②過程都要使用限制酶和連酶;若操作成功,在無chIL基的藍藻中含有紅霉素抗性基因,因此能夠用含紅霉素的培養(yǎng)基篩選出該變異株。選基工程中,構(gòu)建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后代,并表達和發(fā)揮作用。轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用理,使其處于吸收周圍的狀態(tài)。lacZ標(biāo)記基因因外源基因的插入而不能達出半糖苷酶,故③為白色菌落??刹捎每乖闺s交的方法檢測菌③的目的基因是否表達。
-22.解析:(1)分析流程圖可知①是逆錄過程(2)構(gòu)建A基因重組載體時,首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割含有A基的外源子和運載體連接酶連接A基和運載體形成A基因重組載體。重組載體的結(jié)構(gòu)包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點等(3)檢測目的基因是否進入受體細胞用的是分雜交法測目的基因是否表達可用抗原抗雜交的方法(4)⑦是動物細胞融過程,需采用細胞融合技術(shù)。-22答案逆錄(2)DNA連接酶終子基(3)DNA子雜交抗原-抗體雜交(4)細胞融合技術(shù)10解析:本題中培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是獲得鐵含量比普通大米高的大米,因此目的基因為鐵結(jié)合蛋白基因,要大量獲得此基因一般采用PCR技進行擴增。要構(gòu)建重組質(zhì)粒要用同種限制酶切割含目的基因的片和粒外植體培養(yǎng)成試管苗的過程要用到不同的培養(yǎng)基培養(yǎng)基最明顯的差別在于所添加植物激素的比例不同。答案:(1)目的基因PCR含目的基因的片段質(zhì)2含有重組質(zhì)粒的愈傷組織生素和細胞分裂素的濃度比例種子中鐵含量.解析:(1)題圖知,用PstⅠ酶和SmaⅠ提取魚的抗凍蛋白基因可避免目的基因末端發(fā)生任意連接,用這兩種酶切割質(zhì)粒,能得到2種片段。由圖示信息可知,攜帶人正常ada基因的細菌相當(dāng)于基因文庫,病毒相當(dāng)于分子運輸車,目的基因是正常基因,受體細胞是患者體內(nèi)的淋細胞,該種治療方法稱為體外基因治療。答案:(1)基表達載體(或重組質(zhì)粒)
番茄細胞
PstⅠ酶
Ⅰ酶
因文庫
病毒腺苷酸脫氨基患體內(nèi)分離的T淋細胞體外基因治療12解析:(1)用處土農(nóng)桿菌,使其處于感受態(tài),易
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