血液系統(tǒng)疾病流式細(xì)胞術(shù)分析

血液系統(tǒng)疾病流式細(xì)胞術(shù)分析第1頁(yè)/共35頁(yè)流式細(xì)胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用：急性白血病免疫分型淋巴細(xì)胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生異常綜合征輔助診斷微小殘留白血病ZAP70、P糖蛋白等預(yù)后指標(biāo)檢測(cè)PNH（CD55、CD59）細(xì)胞周期分析CD34+細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)第2頁(yè)/共35頁(yè)標(biāo)本種類外周血骨髓胸腹水腦脊液淋巴結(jié)細(xì)針穿刺液活檢組織第3頁(yè)/共35頁(yè)標(biāo)本要求

室溫或2～4℃72h內(nèi)骨髓：急性白血病，MDS，MM外周血：CD55、CD59，LGL第4頁(yè)/共35頁(yè)標(biāo)本前處理：

離心收集細(xì)胞（胸腹水、腦脊液）或制備細(xì)胞懸液（活檢組織）了解標(biāo)本中細(xì)胞組成（瑞氏染色、臺(tái)盼藍(lán)染色）第5頁(yè)/共35頁(yè)第6頁(yè)/共35頁(yè)細(xì)胞濃度調(diào)整第7頁(yè)/共35頁(yè)一般處理步驟胞膜抗原：標(biāo)記-溶血-洗滌胞漿抗原：標(biāo)記-溶血-固定/破膜-標(biāo)記-洗滌免疫球蛋白：溶血-洗滌-標(biāo)記-洗滌第8頁(yè)/共35頁(yè)設(shè)門方案SSC/FSCCD45CD19、CD20CD3、CD5第9頁(yè)/共35頁(yè)第10頁(yè)/共35頁(yè)光散射特征與細(xì)胞形態(tài)的關(guān)系第11頁(yè)/共35頁(yè)正常骨髓淋巴單核粒細(xì)胞CD45SSC原始嗜堿嗜酸Blastwindows第12頁(yè)/共35頁(yè)抗體設(shè)置

髓系一般標(biāo)志：CD13、CD33、CD117、MPO其他標(biāo)記：CD14、CD64、CD4CD71、GlyACD61、CD41CD36其他非髓系標(biāo)記：CD2、CD5、CD7、CD56、CD19第13頁(yè)/共35頁(yè)骨髓增生異常綜合癥（MDS）主要表現(xiàn)為粒系及單核系抗原表達(dá)異常正確的結(jié)果解釋有賴于良好的質(zhì)量控制和標(biāo)本細(xì)胞活性第14頁(yè)/共35頁(yè)第15頁(yè)/共35頁(yè)B淋巴細(xì)胞κ、λ確定克隆性階段性B細(xì)胞標(biāo)記物：CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7

其他標(biāo)記物：CD11c、CD25、CD103、CD38第16頁(yè)/共35頁(yè)第17頁(yè)/共35頁(yè)T/NK細(xì)胞抗原表達(dá)缺失和強(qiáng)度變化T淋巴細(xì)胞：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK細(xì)胞：CD16、CD56第18頁(yè)/共35頁(yè)benignMalignant第19頁(yè)/共35頁(yè)結(jié)果分析分析的重點(diǎn)在于確定每一個(gè)細(xì)胞標(biāo)記的存在與否以及表達(dá)的強(qiáng)弱（模式識(shí)別）。每個(gè)抗體在陽(yáng)性細(xì)胞上的表達(dá)百分率并不重要。以殘存正常細(xì)胞（如正常成熟淋巴細(xì)胞）作為分析參照物。

結(jié)合細(xì)胞形態(tài)可事半功倍。第20頁(yè)/共35頁(yè)AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5第21頁(yè)/共35頁(yè)AML-M6非造血細(xì)胞非特異性染色（死亡細(xì)胞）ALL第22頁(yè)/共35頁(yè)血小板附著于原始粒細(xì)胞所致CD61陽(yáng)性拖尾巨核細(xì)胞白血病第23頁(yè)/共35頁(yè)第24頁(yè)/共35頁(yè)第25頁(yè)/共35頁(yè)第26頁(yè)/共35頁(yè)第27頁(yè)/共35頁(yè)第28頁(yè)/共35頁(yè)微小殘留白血?。红`敏度為1/1000～1/10000

以初診時(shí)免疫表型作為設(shè)置抗體組合的依據(jù)排除非特異性染色細(xì)胞和雜質(zhì)的影響第29頁(yè)/共35頁(yè)第30頁(yè)/共35頁(yè)第31頁(yè)/