標準發(fā)芽試驗方法

種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)標準發(fā)芽試驗2016.7.18發(fā)芽試驗測定程序【操作程序1】選用發(fā)芽床【操作程序2】數(shù)取試樣【操作程序3】置床貼標簽【操作程序4】在規(guī)定條件下培養(yǎng)【操作程序5】檢查管理【操作程序6】幼苗鑒定【操作程序7】結(jié)果報告一、選用發(fā)芽床農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程中每一作物種通常列出2～3種發(fā)芽床。如水稻、小麥規(guī)定了TP、BP和S三種發(fā)芽床。一般來說，小、中粒種子可用紙上（TP）發(fā)芽床，中粒種子可紙間（BP）發(fā)芽床；大粒種子或?qū)λ置舾械男?、中粒種子宜用砂床（S）。一、選用發(fā)芽床

紙床充分濕潤后，把多余的水瀝去一、選用發(fā)芽床砂床加水為其飽和含水量的60%~80%，即手握能成團，松開后能散開二、數(shù)種置床發(fā)芽試驗樣品來源必須是凈種子。從經(jīng)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設(shè)備或手工數(shù)取400粒凈種子，100粒為一重復(fù)，重復(fù)4次。中、小粒種子以100粒種子為一次重復(fù)(100×4)大粒種子或帶有病原菌的種子，可為50粒(50×8)特大粒種子（花生、蠶豆）25粒為一副重復(fù)(25×16)（一）試樣來源和數(shù)量二、數(shù)種置床置床方法最好采用適合的活動數(shù)種板和真空數(shù)種器，也可用鑷子將種子均勻分布在發(fā)芽床上。（二）置床注意：種子之間要留有空隙，多以1～5倍種子間距，以保持足夠的生長空間。（三）貼標簽在標簽注明：樣品編號品種名稱重復(fù)次數(shù)置床日期二、數(shù)種置床在發(fā)芽皿或發(fā)芽容器底盤的內(nèi)側(cè)面貼上標簽。三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理按農(nóng)作物種子的發(fā)芽技術(shù)規(guī)定條件，選擇適宜的溫度，雖然各種溫度均為有效，但一般來說，新收獲的有休眠種子和陳種子，以選用其中的變溫或較低恒溫發(fā)芽為好。對于需光型種子發(fā)芽時必須給予光照；需暗型種子在發(fā)芽試驗初期必須在黑暗條件下進行試驗。（一）發(fā)芽培養(yǎng)三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理提示：對于大多數(shù)種子，最好加光培養(yǎng)，有利于抑制霉菌的生長繁殖，并有利于正常幼苗鑒定。三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理種子名發(fā)芽床溫度/℃初次計數(shù)天數(shù)/d末次計數(shù)天數(shù)/d附加說明小麥TP;BP;S2048預(yù)先加溫（30—35℃）；預(yù)先冷凍；GA玉米BP;S20-30；25；3047水稻BP;P;S20-30;30514預(yù)先加溫（50℃）；在水中或HNO3中浸漬24h大豆BP;S20-30;2058棉花BP;S20-30;30;25412（二）檢查管理（二）檢查管理發(fā)芽床濕潤、監(jiān)測溫度、去除霉菌、腐爛死亡種子、注意通風換氣，保持水分濕度。三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理1、水分和通氣發(fā)芽床應(yīng)始終保持濕潤，以保持適宜的發(fā)芽水分。根據(jù)發(fā)芽床和種子特性決定發(fā)芽床的加水量。發(fā)芽應(yīng)使種子周圍有足夠的空氣，注意通氣。紙卷須相當疏松；用砂床時，覆蓋種子的砂不要緊壓。三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理三、發(fā)芽培養(yǎng)和檢查管理2、溫度溫度應(yīng)保持在所需溫度的±2℃范圍內(nèi)，用變溫時，通常應(yīng)保持先高溫8h后低溫16h。對非休眠的種子，變溫應(yīng)在3h內(nèi)完成。如是休眠種子，應(yīng)在1h或更短時間內(nèi)完成。（二）發(fā)芽期間的檢查管理3、霉菌管理如發(fā)現(xiàn)霉菌滋生，應(yīng)及時取出洗滌去霉。當發(fā)霉種子超過5%時，應(yīng)調(diào)換發(fā)芽床，如發(fā)現(xiàn)腐爛死亡種子，則應(yīng)將其除去并記載。4、光照一般采用光照，可抑制霉菌生長，利于幼苗鑒定。如在變溫條件下發(fā)芽，光照應(yīng)在8h高溫時進行。（二）發(fā)芽期間的檢查管理提示：對于大多數(shù)種子，最好加光培養(yǎng)，有利于抑制霉菌的生長繁殖，并有利于正常幼苗鑒定。四、觀察記錄（一）試驗持續(xù)時間：（試驗前或試驗間）用于破除休眠處理所需時間不作為發(fā)芽試驗時間的一部分。如果樣品在規(guī)定試驗時間內(nèi)只有幾粒種子開始發(fā)芽，則試驗時間可延長7d，或延長規(guī)定時間的一半。如果在規(guī)定試驗時間結(jié)束前，樣品已達到最高發(fā)芽率，則該試驗可提前結(jié)束。四、觀察記載當幼苗在主要構(gòu)造已發(fā)育到一定時期時，按規(guī)定的標準對每株幼苗進行鑒定。（二）幼苗鑒定四、觀察記載1.初次計數(shù)把發(fā)育良好的正常幼苗應(yīng)從發(fā)芽床中揀出，可疑的或損傷、畸形或不均衡的幼苗，留到末次計數(shù)。嚴重腐爛的幼苗或發(fā)霉的種子應(yīng)從發(fā)芽床中除去，并隨時增加計數(shù)。（二）幼苗鑒定四、觀察記載2.末次計數(shù)按正常幼苗、不正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實和死種子分類計數(shù)和記載。復(fù)胚種子單位作為單粒種子計數(shù)，實驗結(jié)果用至少產(chǎn)生一個正常幼苗的種子單位的百分率表示。（二）幼苗鑒定五、結(jié)果計算和表示當一個試驗的4次重復(fù)（每個重復(fù)以100粒計，相鄰的副重復(fù)合并成100粒的重復(fù)），其正常幼苗百分率都在最大容許差距內(nèi)，則以其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實和死種子的百分率均按4次重復(fù)平均數(shù)計算。六、破除休眠和重新試驗1.破除生理休眠2.破除硬實3.除去抑制物質(zhì)（一）破除休眠六、破除休眠和重新試驗(1)懷疑種子有休眠(即有較多的新鮮不發(fā)芽種子)，可采用破除休眠方法重新試驗，將得到的最佳結(jié)果填報，應(yīng)注明所用的方法。(2)由于真菌或細菌的蔓延而使試驗結(jié)果不一定可靠時，可采用砂床或土壤進行試驗。應(yīng)增加種子之間的距離。(3)當正確鑒定幼苗數(shù)有困難時，可采用規(guī)定的一種或幾種方法在砂床或土壤上進行重新試驗。（二）重新試驗六、破除休眠和重新試驗(4)當發(fā)現(xiàn)試驗條件、幼苗鑒定或計數(shù)有差錯時，應(yīng)采用同樣方法進行重新試驗。(5)當100粒種子重復(fù)間的差距超過同一發(fā)芽試驗4個重復(fù)間的最大容許差距時，應(yīng)采用同樣的方法進行重新試驗。（二）重新試驗六、破除休眠和重新試驗如果第2次結(jié)果與第1次結(jié)果相一致，即其差異中所示的容許差距，則填報兩次試驗的平均值。如果第2次結(jié)果與第1次結(jié)果不相符合，其差異超過“不超過同一或不同實驗室相同或不同送驗樣品間的發(fā)芽試驗的容許差距”中容許差距，則采用同樣的方法進行第3次試驗，填報符合要求的結(jié)果平均數(shù)。（二）重新試驗七、容許差距和結(jié)果報告（一）容許差距容許差距是指兩值之間所能容許不顯著的最大差異。兩值