大三上毒理學(xué)考察第15章藥物性

藥物毒理學(xué)第十五章藥物的致癌性中國醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥物毒理學(xué)教研室化學(xué)致癌的歷史

1775年—英國Pott陰囊癌

1895年—德國Rehn職業(yè)性膀胱癌

1915年—日本山極和市川試驗性皮膚癌

1922年—英國Kennway動物皮膚癌

1945年—英國Case職業(yè)性膀胱癌不同因素引起癌癥的死亡率(1981)1煙草30%(25%-40%)2酒精3%(2%-4%)3飲食35%(10%-70%)4食品添加劑小于1%5生殖和性行為7%(1%-13%)6職業(yè)4%7污染2%8工業(yè)產(chǎn)品1%9藥品和醫(yī)學(xué)處置1%10其它地球物理因素3%感染10%化學(xué)致癌問題時是當(dāng)今關(guān)注的熱點(diǎn)WHO指出，人類癌癥90%與環(huán)境因素有關(guān)，其中主要為化學(xué)因素FDA列出2400種可能對動物致癌的物質(zhì)。已知化學(xué)藥物在動物身上能誘發(fā)腫瘤的數(shù)目為150種以上。對于人類，有20-30種化學(xué)物質(zhì)與腫瘤有關(guān)。（環(huán)磷酰胺、氯霉素等）中國食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）《藥品注冊管理辦法》要求

1、新藥結(jié)構(gòu)或代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與已知致癌物結(jié)果相似或相近。

2、長期毒性中發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞毒性或?qū)εK器、細(xì)胞產(chǎn)生異?；钴S的現(xiàn)象。

3、致突變試驗結(jié)果為陽性。第一節(jié)藥物與腫瘤一、一般藥物致癌

1、解熱鎮(zhèn)痛藥：含有非那西?。◤?fù)方阿司匹林）或亞硝基化合物的藥物（安乃近-氨基比林）

2、激素：甲睪酮-肝癌

枸櫞酸氯米芬-卵巢癌

己烯雌酚-子宮內(nèi)膜癌

3、抗癲癇藥物：苯巴比妥-惡性腦瘤、肝癌

苯妥英鈉-孕婦使用致新生兒-惡性淋巴瘤

4、抗結(jié)核藥物：異煙肼

5、心血管系統(tǒng)藥物：氯貝丁酯-肝癌

6、抗生素類藥物：氯霉素-再生障礙性貧血

甲硝唑-淋巴癌或肺癌７、其他藥物：如外用藥二、抗癌藥物：第二節(jié)化學(xué)致癌物的分類化學(xué)致癌物：具有誘發(fā)腫瘤形成能力的化學(xué)物質(zhì)一、按致癌作用機(jī)制分（一）遺傳毒性致癌物

能與DNA以共價鍵結(jié)合，引起DNA損傷，從而導(dǎo)致癌變的化學(xué)物質(zhì)。１、直接致癌物：

本身具有致癌活性，進(jìn)入機(jī)體后不需要代謝活化，直接可誘發(fā)細(xì)胞癌變的化學(xué)物質(zhì)。（抗癌藥－烷化劑）２、間接致癌物：

指不能以原型致癌，進(jìn)入機(jī)體后需要經(jīng)過酶的代謝激活才具有致癌性的化學(xué)物質(zhì)。（環(huán)孢素）（二）非遺傳致癌物非遺傳致癌物：

指不能與DNA發(fā)生反應(yīng)，但可以通過促進(jìn)細(xì)胞的過度增值和遺傳的改變而致癌的化學(xué)物質(zhì)。

主要有：

①促癌劑：苯巴比妥－促進(jìn)大鼠肝癌②激素己烯雌酚－少女青春期陰道透明細(xì)胞癌③免疫抑制劑：硫唑嘌呤－白血病或淋巴瘤④過氧化物酶體增生劑：氯貝丁酯-肺癌⑤細(xì)胞毒物：福爾培-十二指腸腺瘤遺傳毒性致癌物與非遺傳毒性致癌物的區(qū)分并不是絕對的，有些化合物在達(dá)到一定劑量時，既具有遺傳毒性又具有非遺傳毒性。二、按對人的致癌危險性分類

類型證據(jù)代表藥物或毒物１、肯定致癌充分（人類）硫唑嘌呤、白消安、環(huán)磷酰胺2A、很可能致癌有限（人類）充分（動物）2B、可能致癌有限（人類）不充分（動物）3、不能確定致癌性缺乏（人類）有限（動物）4、很可能不致癌不充分或缺乏（人類）不充分或缺乏（動物）多柔比星、氯霉素、順鉑齊多夫定、苯巴比妥、咖啡因、地西泮己內(nèi)酰胺第三節(jié)化學(xué)致癌作用機(jī)制1、遺傳機(jī)制：

癌癥細(xì)胞遺傳型改變（癌癥的體細(xì)胞突變理論）

外來致癌因素引起細(xì)胞基因突變或外來基因整合細(xì)胞基因中，從而導(dǎo)致癌變。2、表觀遺傳機(jī)制：

癌癥的發(fā)生是有非基因改變引起的是個多因素、多基因參與的多階段復(fù)雜過程。一、遺傳機(jī)制的致癌作用1、DNA加合物的形成：

烷基化與羥基化，從而使DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生變化或使堿基發(fā)生錯配。2、DNA的損傷與修復(fù)

外來物質(zhì)使DNA造成損傷，引起基因突變，導(dǎo)致癌變。但在進(jìn)化過程中，正常細(xì)胞也形成了一套完善的身份有效的DNA修復(fù)系統(tǒng)。

遺傳毒性致癌物作用于機(jī)體能否引發(fā)癌癥既取決于體內(nèi)生物大分子ＤＮＡ的損傷程度，也取決于機(jī)體對DNA的自身修復(fù)能力。二、非遺傳機(jī)制的致癌作用

非遺傳毒性致癌物對遺傳物質(zhì)沒有影響，它主要是通過對轉(zhuǎn)錄與翻譯過程的干擾作用，從而改變基因的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞分裂增值而誘發(fā)腫瘤。1、直接作用途徑

直接作用指有絲分裂劑直接刺激細(xì)胞分裂作用。

主要由以下途徑：2、間接作用途徑

間接作用是指游戲幣毒性的非遺傳毒性致癌物，通過引起細(xì)胞變性壞死，使機(jī)體細(xì)胞再生，從而間接刺激細(xì)胞的增值，最終導(dǎo)致細(xì)胞癌變的作用。三、基因突變與細(xì)胞癌變致癌過程中涉及原癌基因與抑癌基因1、原癌基因

原癌基因是與細(xì)胞增值、分化和信息傳遞的調(diào)控有關(guān)的正常細(xì)胞基因，可以刺激細(xì)胞的增長，在進(jìn)化中高度保守。當(dāng)受到致癌因素的作用后，原癌基因發(fā)生突變，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂兄掳┗钚缘陌┗?，他們編碼的蛋白使細(xì)胞不受控制的增長，最后導(dǎo)致細(xì)胞癌變。2、抑癌基因

抑癌基因是一類能夠抑制細(xì)胞癌基因活性的基因，其作用方式與癌基因相反，在細(xì)胞生長中起負(fù)調(diào)節(jié)作用，抑制細(xì)胞的增值、分化，或使細(xì)胞程序性死亡。又稱抗癌基因。四、多階段致癌理論1、啟動階段

致癌物與DNA作用而引起細(xì)胞發(fā)生永久性、不可逆轉(zhuǎn)的遺傳改變，使之成為啟動細(xì)胞。2、促進(jìn)階段

啟動細(xì)胞在某些因素的影響下，從近期克隆擴(kuò)增形成良性腫瘤。3、惡性進(jìn)展階段

促進(jìn)階段之后的細(xì)胞，在某些物質(zhì)的作用下，腫瘤細(xì)胞獲得一些性的特征，從而使腫瘤細(xì)胞存活下來，并有良性腫瘤轉(zhuǎn)為惡性腫瘤。多階段致癌過程致癌作用評價方法一）慢性動物實驗二）短期癌癥生物分析

1、動物短期致癌試驗

2、哺乳動物細(xì)胞體外惡性轉(zhuǎn)化試驗

3、P53

小鼠模型一）慢性動物實驗1、模型設(shè)計

1）動物兩個種類的嚙齒動物，種屬及性別差異要小。

2）對照組建立對照組。

3）動物數(shù)量動物數(shù)量要足夠體現(xiàn)陽性反應(yīng)。

4）觀察期給藥應(yīng)貫穿動物整個生命周期。

5）至少三個劑量組

a、最大耐受量組

b、50%最大耐受量組

c、25%最大耐受量組

6）給藥途徑

7）試驗結(jié)束時或每6個月作全面病理學(xué)檢查。

8）結(jié)果分析與評價2、動物長期致癌試驗舉例

1）動物幼年小鼠或大鼠，雌雄各半，每組100只。

2）劑量與分組給藥組至少三個劑量組（高劑量組、中劑量組、低劑量組）、溶劑組、空白組。

3）實驗期限大鼠兩年、小鼠一年半4）給藥方式與期限原則上應(yīng)與臨床擬用途徑一致。

5）觀察與檢查注意觀察記錄

6）結(jié)果分析與評價二）短期癌癥生物分析1、哺乳動物體外細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗

1）細(xì)胞敘利亞地鼠（SHE）胚胎細(xì)胞。

2）劑量至少應(yīng)用3種不同濃度。

3）藥物的作用時間藥品一般和細(xì)胞接觸24小時，更換培養(yǎng)液后在培養(yǎng)7-14天。

4）外源性代謝活化系統(tǒng)。

5）對照組空白、溶劑、陰性和陽性對照組。

6）觀察報告細(xì)胞固定，染色，計數(shù)，轉(zhuǎn)化集落數(shù)。7）判定（1）有明確的劑量效應(yīng)關(guān)系（2）無明確的劑量效應(yīng)關(guān)系，有2個或2個以上濃度發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化。（3）單一劑量下出現(xiàn)3個獲3個以上轉(zhuǎn)化集落。2、動物短期致癌試驗—小鼠肺腫瘤誘發(fā)短期試驗

-小鼠肺腫瘤誘發(fā)短期試驗-大鼠肝轉(zhuǎn)變灶誘發(fā)實驗

-小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗-雄性大鼠乳腺癌誘發(fā)實驗1）動物A系小鼠。

2）劑量及分組高、中、低三個劑量組，另設(shè)陰性對照組。

3）給藥途徑一般腹腔注射。

4）觀察時間30-35周。

5）結(jié)果評價符合下列情況可判為陽性（1）給藥組動物肺腫瘤生成均數(shù)顯著增加（2）有劑量效應(yīng)關(guān)系3、P53

小鼠模型(腫瘤抑制基因敲除小鼠)

由于只有一個單個功能等位基因，P53+/-小鼠正常生長，但對腫瘤誘發(fā)敏感性增加。這種情況類似于遺傳性腫瘤抑制基因缺陷的個體。給予突變致癌劑時，P53+/-小鼠與正常小鼠相比通常在6個月內(nèi)迅速生長腫瘤，而未處理的P53+/-小鼠在試驗期間通常不發(fā)生腫瘤。短期癌癥試驗與長期動物癌癥試驗的關(guān)系陽性結(jié)果陰性結(jié)果何時考慮對藥物進(jìn)行致