口腔細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

口腔細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用第一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五提要：本章介紹細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理及基本方法；牙齒相關(guān)細(xì)胞、唾液腺細(xì)胞、口腔黏膜細(xì)胞、頜骨相關(guān)硬組織細(xì)胞、口腔腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)及特點；組織工程的基本原理、口腔組織特有的干細(xì)胞、再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用；基因芯片、蛋白芯片、組織芯片，蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)、模式生物學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)等。重點掌握細(xì)胞培養(yǎng)基本原理及方法，口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點，了解口腔干細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用及口腔生物學(xué)其他研究方法。第二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)第三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五一、細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念細(xì)胞培養(yǎng)：模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在適當(dāng)?shù)臈l件下，使活體組織細(xì)胞在體外環(huán)境存活、生長增殖，并維持其結(jié)構(gòu)功能原代培養(yǎng)：取自體內(nèi)新鮮組織并置于體外條件下生長的細(xì)胞在傳代之前稱為原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)：細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五體外細(xì)胞生物學(xué)形態(tài)特點貼壁型細(xì)胞懸浮型細(xì)胞生長增殖過程培養(yǎng)細(xì)胞生命期培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五貼壁型細(xì)胞必須貼附于支持物表面才能生長。大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長，屬于貼壁依賴性細(xì)胞按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可分為幾大類型：上皮型成纖維型游走型多形型第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五懸浮型細(xì)胞于懸浮狀態(tài)下即可生長不需要貼附于支持物表面多見于血液淋巴細(xì)胞第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五幾種常見細(xì)胞的形態(tài)原代培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞

（×10）原代培養(yǎng)星形細(xì)胞

（×10）神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞系

（×10）N20Y結(jié)腸癌細(xì)胞系（×10）Caco-2第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)細(xì)胞生命期所謂培養(yǎng)細(xì)胞生命期，指細(xì)胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長的時間

細(xì)胞全部生存過程大致分為以下三個階段：原代培養(yǎng)期傳代期衰退期第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五原代培養(yǎng)期：也稱初代培養(yǎng)，即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，一般持續(xù)1～4周傳代期：初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后便改稱為細(xì)胞系。在全生命期中此期的持續(xù)時間最長衰退期：此期細(xì)胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；細(xì)胞形態(tài)輪廓增強(qiáng)，最后衰退凋亡第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞永生性也稱不死性，即細(xì)胞獲持久性增殖能力，成為無限細(xì)胞系無限細(xì)胞系的形成主要發(fā)生在第二期末，或第三期初階段細(xì)胞獲不死性后，核型大多變成異倍體?？赡軔盒宰兗?xì)胞永生性和惡性性非同一性狀第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期所謂細(xì)胞“一代”，系僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間，細(xì)胞傳代后，一般要經(jīng)過以下三個階段:潛伏期（游離期，貼壁期）對數(shù)生長期停滯期（平臺期）第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞生長過程中的重要現(xiàn)象接觸抑制：由于細(xì)胞的相互接觸而抑制細(xì)胞運動密度抑制：細(xì)胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響而停止生長第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長環(huán)境無污染環(huán)境基質(zhì)氣體環(huán)境和氫離子濃度液相環(huán)境溫度滲透壓第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

無污染環(huán)境：高壓蒸汽消毒器電熱干燥箱濾器超凈工作臺紫外燈第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基質(zhì)：玻璃基質(zhì)塑料飼養(yǎng)細(xì)胞，又稱滋養(yǎng)細(xì)胞生物性基質(zhì)處理培養(yǎng)表面金屬第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五氣體環(huán)境和氫離子濃度：5%二氧化碳95%空氣pH為7.2～7.4第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五液相環(huán)境：水：新鮮配置的三蒸水或去離子水平衡鹽液：Hanks液、PBS、Earle液等天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基無血清培養(yǎng)基

第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五溫度維持：（36.5±0.5）℃滲透壓：290～320

mOsm/kg

第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞培養(yǎng)常見儀器超凈工作臺細(xì)胞培養(yǎng)箱倒置相差顯微鏡第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五無菌操作中的注意事項對實驗中可能用到的器具及培養(yǎng)用液進(jìn)行嚴(yán)格消毒滅菌培養(yǎng)室的消毒：培養(yǎng)室和超凈臺要用紫外燈和酒精嚴(yán)格消毒進(jìn)入無菌室前要按照外科手術(shù)無菌要求進(jìn)行洗手與著裝培養(yǎng)過程中要注意無菌操作：時刻銘記無菌物品與有菌物品要分開處理第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五ABA超凈工作臺中的實驗用品要擺放整齊B實驗前75%酒精噴洗雙手無菌操作技術(shù)第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五CD開啟封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰就近的地方，并輕輕灼燒CD第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五EFEF移液操作第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基本培養(yǎng)操作技術(shù)培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離體外培養(yǎng)細(xì)胞的純化細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第二十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離

取材部位準(zhǔn)確嚴(yán)格無菌操作盡快培養(yǎng)減小損傷制備標(biāo)本第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五體外細(xì)胞的純化人工純化：酶消化法、機(jī)械刮除法、反復(fù)貼壁法、克隆法、培養(yǎng)基限定法、流式細(xì)胞儀分離法等自然純化第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞凍存要點：冷凍過程要緩慢凍存細(xì)胞必須處在對數(shù)生長期細(xì)胞復(fù)蘇要點：快速解凍解凍后的細(xì)胞應(yīng)離心去除冷凍保護(hù)劑后再接種到培養(yǎng)基中第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞培養(yǎng)的污染、檢測與控制微生物污染：細(xì)菌，真菌，支原體等污染化學(xué)污染：指影響細(xì)胞生存的非細(xì)胞所需物質(zhì)混入培養(yǎng)物中，應(yīng)在操作中防止細(xì)胞交叉污染：指目的細(xì)胞中混入其他種細(xì)胞，預(yù)防方法主要是嚴(yán)格按照規(guī)定操作，做好標(biāo)記，避免發(fā)生混亂第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五微生物污染：污染的途徑：空氣、器材、操作、試劑、組織標(biāo)本微生物污染的檢測微生物污染的控制：抗生素除菌法；加溫處理第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五FLcellpollutedbyStaphylococcusFLcellpollutedbyG+Bacteria

首都醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系張海燕提供第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五FLcellpollutedbyescherichiacoliFLcellpollutedbymoldfungus首都醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系張海燕提供第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞培養(yǎng)常用方法：組織塊培養(yǎng)法酶消化法第一節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理第三十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第三十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五一、牙齒相關(guān)細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第三十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五牙周膜細(xì)胞培養(yǎng)方法：組織塊法；酶消化法細(xì)胞形態(tài)特點免疫組織化學(xué)染色體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長增殖特點功能特點牙周膜細(xì)胞增殖分化的影響因素第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

細(xì)胞形態(tài)特點原代人牙周膜成纖維細(xì)胞（×10）第3代人牙周膜成纖維細(xì)胞（×10）第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

免疫組織化學(xué)染色波形絲蛋白染色陽性（×10）角蛋白染色陰性（×10）第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五體外培養(yǎng)細(xì)胞特點：成功率高于牙髓細(xì)胞，達(dá)40%～80%可在體外長時間存活達(dá)4～12個月可持續(xù)傳40代以上第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五功能特點分泌功能礦化功能收縮功能再生功能根面吸附等第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五牙周膜細(xì)胞增殖分化的影響因素生長因子胰島素纖維黏連蛋白抗壞血酸羥基磷灰石第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五牙髓細(xì)胞培養(yǎng)方法：酶消化法；組織塊培養(yǎng)法細(xì)胞形態(tài)特點：成纖維細(xì)胞型（與牙周膜細(xì)胞類似）免疫組織化學(xué)染色：波形絲蛋白（+）；角蛋白（-）體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長增殖特點功能特點第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五生長增殖特點生長增殖較快可傳代至第15～20代長時間體外培養(yǎng)可呈復(fù)層生長第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五功能特點堿性磷酸酶活性礦化現(xiàn)象對鈣調(diào)節(jié)因子的反應(yīng)對細(xì)胞因子的反應(yīng)對氫氧化鈣、羥基磷灰石蓋髓劑的反應(yīng)第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、唾液腺細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第四十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五唾液腺細(xì)胞形態(tài)特點免疫組織化學(xué)特點功能特點唾液腺細(xì)胞的增殖與分化調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖、分化和功能的因素第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五細(xì)胞形態(tài)特點腺泡上皮細(xì)胞：體外培養(yǎng)的腺泡細(xì)胞多呈“鋪路石”樣排列導(dǎo)管上皮細(xì)胞：導(dǎo)管上皮細(xì)胞呈多邊形肌上皮細(xì)胞：

肌上皮細(xì)胞呈梭形或星形第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五導(dǎo)管上皮細(xì)胞（HSG細(xì)胞系）HSG細(xì)胞系（×4）HSG細(xì)胞系（×10）第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五A小型豬腮腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)（×10）B小型豬腮腺上皮細(xì)胞alpha淀粉酶免疫組化染色（×10）腺泡細(xì)胞上皮細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五免疫組織化學(xué)染色腺泡上皮細(xì)胞：角蛋白、淀粉酶、對氨基水楊酸、導(dǎo)管上皮膜、前角蛋白、單克隆角蛋白、分泌成分陽性反應(yīng)導(dǎo)管上皮細(xì)胞：角蛋白、上皮膜蛋白、磷酸酐酶抗體染色陽性反應(yīng)肌上皮細(xì)胞：肌動蛋白、S-100蛋白、肌凝蛋白抗體染色陽性反應(yīng)第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五功能特點：分泌腺泡細(xì)胞：淀粉酶、PRP、唾液過氧化物酶、特異蛋白等腺泡上皮細(xì)胞：頂端分泌、基底及側(cè)膜分泌導(dǎo)管細(xì)胞：膠原肌上皮細(xì)胞：膠原第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五唾液腺細(xì)胞的增殖分化基底潛能干細(xì)胞理論單細(xì)胞全能干細(xì)胞理論雙細(xì)胞亞全能干細(xì)胞理論第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖、分化和功能的因素細(xì)胞因子激素細(xì)胞外基質(zhì)鈣離子第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五三、口腔黏膜細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五口腔黏膜細(xì)胞培養(yǎng)方法：組織塊法和酶消化法形態(tài)特點：卵圓形、多邊形，呈“鋪路石”樣單層排列免疫組織化學(xué)染色：波形絲蛋白陰性，角蛋白陽性功能：分泌大量的膠原蛋白與非膠原蛋白第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第五十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五兔口腔黏膜上皮細(xì)胞ABA無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下（×10）B滋養(yǎng)細(xì)胞層培養(yǎng)條件下（×4）第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五四、頜骨相關(guān)的硬組織細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五破骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點：體積大，多核組織化學(xué)染色：破骨細(xì)胞單克隆抗體呈陽性反應(yīng)，與降鈣素反應(yīng)呈藍(lán)紫色，與抗酒石酸磷酸酶反應(yīng)呈棕褐色功能：骨吸收功能影響破骨細(xì)胞功能的因素：促進(jìn)破骨細(xì)胞功能：破骨細(xì)胞激活因子、甲狀旁腺素等抑制破故細(xì)胞功能：γ-干擾素、降鈣素等第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五成骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點：不同培養(yǎng)方法所獲得的成骨細(xì)胞形態(tài)各有差異免疫組織化學(xué)染色特點：BGP、Ⅰ型膠原、堿性磷酸酶活性功能：成骨作用

調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞骨吸收作用第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五軟骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點：多角形，可形成甲苯胺藍(lán)染色陽性的物質(zhì)免疫組織化學(xué)染色特點：GAG、Ⅱ型和Ⅹ型膠原功能：形成軟骨或骨影響軟骨細(xì)胞功能、分化的因素：激素、細(xì)胞因子、機(jī)械張力和壓力、體外培養(yǎng)環(huán)境第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五五、口腔腫瘤細(xì)胞第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五口腔鱗癌細(xì)胞細(xì)胞系來源：舌鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本原代及傳代培養(yǎng)生物學(xué)特性：

多角形上皮樣細(xì)胞

核/漿比例高，多核仁

高貼壁率，克隆形成率和軟瓊脂集落形成率第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五唾液腺腫瘤細(xì)胞人黏液表皮樣癌MEC-1細(xì)胞系：低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Mc1、Mc2高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Mc3、M3SP4腺樣囊腺癌ACC-2、ACC-3細(xì)胞系第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞細(xì)胞系來源：腫瘤組織原代及傳代培養(yǎng)生物學(xué)特性：生長增殖緩慢，二倍體細(xì)胞型應(yīng)用：目前已獲得永生細(xì)胞系A(chǔ)M-1及hTERT(+)-AM細(xì)胞系第二節(jié)

口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點第六十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第六十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五組織工程的基本原理口腔組織特有的干細(xì)胞再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五組織工程的基本原理種子細(xì)胞體外擴(kuò)增，與生物材料按一定的比例混合，將細(xì)胞-材料復(fù)合物植入機(jī)體的組織或器官的病損部位，以達(dá)到修復(fù)創(chuàng)傷和重建功能的目的目前組織工程常用的支架材料是合成的可生物降解的高分子聚合物是聚乳酸（PLA）、聚乙醇酸（PGA）、聚乳酸和聚乙醇酸復(fù)合物（PLGA）等第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五口腔組織特有的干細(xì)胞牙髓干細(xì)胞牙周膜干細(xì)胞脫落乳牙牙髓干細(xì)胞根尖牙乳頭干細(xì)胞唾液腺干細(xì)胞第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五牙髓干細(xì)胞比BMSCS具有更強(qiáng)的增殖率、克隆形成率和倍增率可被誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞、神經(jīng)樣細(xì)胞Stroo-1和CD146等干細(xì)胞表面標(biāo)記陽性體內(nèi)誘導(dǎo)可形成類似牙本質(zhì)-牙髓復(fù)合體樣的結(jié)構(gòu)第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五脫落乳牙牙髓干細(xì)胞比BMSSCs具有更強(qiáng)的增殖率、克隆形成率和倍增率Stroo-1和CD146等干細(xì)胞表面標(biāo)記陽性可誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞體外可形成鈣化結(jié)節(jié)內(nèi)體可在免疫缺陷小鼠皮下成骨和產(chǎn)生牙本質(zhì)樣物質(zhì)第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五牙周膜干細(xì)胞Stro-1和MUC18及腱特異性標(biāo)記SCX表達(dá)陽性可被誘導(dǎo)分化為牙髓母細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、牙骨質(zhì)細(xì)胞和成骨細(xì)胞體外可形成礦化結(jié)節(jié)，表達(dá)堿性磷酸酶或骨唾液蛋白體內(nèi)試驗牙周膜干細(xì)胞能產(chǎn)生沿牙周膜結(jié)締組織方向走行的牙骨質(zhì)樣結(jié)構(gòu)第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五根尖牙乳頭干細(xì)胞比牙髓干細(xì)胞具有更高的增殖活性CD24是SCAP較特異的表面標(biāo)志物在體外SCAP可橫向分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞和脂肪細(xì)胞，并能產(chǎn)生比牙髓干細(xì)胞更多的牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合物第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五唾液腺干細(xì)胞

組織定位：導(dǎo)管上皮

停留在腺泡、間質(zhì)中的前體細(xì)胞可誘導(dǎo)分化為表達(dá)肝細(xì)胞和胰腺內(nèi)分泌細(xì)胞表型體外培養(yǎng)后植入肝臟，可分泌白蛋白第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用在頜面重建中的作用：

介導(dǎo)頜面部骨及軟骨缺損修復(fù)在引導(dǎo)口腔組織再生中的作用：促進(jìn)牙周組織重建組織工程化黏膜在口腔醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用組織工程用于人造唾液腺牙再生：組織工程方法---種子細(xì)胞+支架材料

發(fā)育生物學(xué)---模擬牙齒發(fā)育的過程第三節(jié)

細(xì)胞培養(yǎng)在口腔再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第七十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第七十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五口腔生物學(xué)其他研究方法基因芯片、蛋白芯片和組織芯片蛋白質(zhì)組學(xué)生物信息學(xué)模式生物學(xué)系統(tǒng)生物學(xué)第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)，又稱DNA微陣列技術(shù)，是將cDNA文庫中已知和未知的全長序列或寡核苷酸序列固定于玻片上，同時檢測比較生物樣品中多個已知或未知序列的表達(dá)狀況基因芯片技術(shù)基本原理與經(jīng)典的核酸分子雜交方法是一致的基因芯片技術(shù)是高效地大規(guī)模獲取相關(guān)生物信息的重要手段第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基因芯片技術(shù)的主要技術(shù)流程芯片的設(shè)計與制備靶基因的標(biāo)記芯片雜交與雜交信號檢測第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基因芯片技術(shù)的應(yīng)用基因表達(dá)譜分析新基因發(fā)現(xiàn)基因突變及多態(tài)性分析基因組文庫作圖疾病診斷和預(yù)測藥物篩選基因測序等第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五基因芯片技術(shù)存在的問題設(shè)備昂貴，例如制造儀器，現(xiàn)代化的實驗平臺及激光共聚焦顯微鏡等，并且制造光刻掩膜需較高費用DNA芯片上原位合成探針難免有錯誤核苷酸摻入及混入雜質(zhì)，使整個雜交背景增高，降低特異性第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五蛋白芯片技術(shù)蛋白芯片是以蛋白質(zhì)代替DNA作為檢測對象，與在mRNA水平上的檢測基因表達(dá)的基因芯片不同，它直接在蛋白水平上檢測表達(dá)模式在基因表達(dá)研究中比基因芯片有著更加直接的應(yīng)用前景第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五蛋白芯片技術(shù)主要技術(shù)流程ChipmembraneHybridizationLabeledproteinsampleAddStreptavidinStreptavidinFluorescentlabelingStreptavidinAbAddfluorescentlabelingStreptavidinAbFluorescentdetect第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五蛋白芯片技術(shù)的應(yīng)用研究疾病的發(fā)病機(jī)制，協(xié)助尋找疾病診斷和治療的靶分子探討作用物與酶相互作用的機(jī)制的分析開發(fā)新藥以及協(xié)助蛋白質(zhì)組的研究第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五存在的問題固定于載體上的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)單一，無法反應(yīng)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性固定于載體上的蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性直接影響蛋白芯片的穩(wěn)定性蛋白芯片造價比較昂貴影響結(jié)果特異性的因素較多第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五組織芯片技術(shù)組織芯片技術(shù)是近年來基因芯片技術(shù)的發(fā)展和延伸它可以將大量臨床組織標(biāo)本排列在一張載體進(jìn)行分析研究可以最大限度地利用組織資源所需樣品少，是一種高通量、多樣本的分析工具第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第八十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五應(yīng)用協(xié)助人類基因組學(xué)的研究疾病相關(guān)基因的驗證新藥物的開發(fā)與篩選治療過程的追蹤和預(yù)后等方面的研究第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第九十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)的研究對象是特定的時間和特定的空一個完整的生物體（或細(xì)胞）所表達(dá)的全體蛋白質(zhì)的特征包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，翻譯后的修飾，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用等在蛋白質(zhì)水平上獲得對于有關(guān)生物體生理、病理等過程的全面認(rèn)識第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第九十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容蛋白質(zhì)鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)功能確定服務(wù)于人類的健康第四節(jié)

口腔生物學(xué)其他研究方法第