淺論P(yáng)IK3CA在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸鱗癌中的表達(dá)

淺論P(yáng)IK3CA在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸鱗癌中的表達(dá)【摘要】目的探討PIK3CA在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸鱗癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。方法應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)10例LSIL，30例HSIL，50例SCC石蠟標(biāo)本中PIK3CA蛋白的表達(dá)水平，比較各組間的差別及與患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果①PIK3CA在LSIL和HSIL的陽性率分別是20%和%，差異有顯著性andsquamouscellcarcinomasoftheuterinecervix.MethodsWeassessedtheexpressionofPIK3CAbyimmunohistochemistryin10LSIL，30HSIL，and50cervicalSCC,andcorrelatedthesefindingswithvariousclinicopathologicalvariables.Results①PIK3CAwasoverexpressedin20%ofLSILand%ofHSIL.PIK3CAexpressioninHSILwassignificantlyhigherthantheexpressioninLSIL(P=).②PIK3CAexpressionishighlyprevalentincervicalcarcinoma，with76%ofcervicalSCCPIK3CApositive,butnosignificantassociationswerefoundbetweenPIK3CAover-expressionandclinicopathologicalvariables.Conclusions①PIK3CAexpressionincreasedsignificantlyduringthetransitionfromLSILtoHSIL,suggestingthatPIK3CAoverexpressionisanearlyeventduringmalignanttransformationintheuterinecervixandPIK3CAmayplayaroleincervicalSCCdevelopment.②PIK3CAisnotnecessaryintheprogressionofcervicalSCCtoametastaticphenotype.

Keywords：PIK3CA;SIL;cervicalSCC

宮頸癌是全球婦女常見的惡性腫瘤，其中尤以鱗癌為最多見，近年來宮頸癌已占我國(guó)婦女因癌死亡的第二位。流行病學(xué)研究顯示,宮頸癌的發(fā)生與人乳頭瘤病毒(HPV)感染關(guān)系密切。生育期婦女中HPV感染非常普遍,然而只有一小部分婦女發(fā)生宮頸癌,因此,除了HPV感染以外，宮頸癌的發(fā)生還存在其他的必要因素。與其他腫瘤一樣,宮頸癌的發(fā)生也被認(rèn)為是與癌基因激活或抑癌基因失活有關(guān)的多步驟的發(fā)展過程［1］。PIK3CA編碼磷脂酰肌醇3-激酶30例，及因子宮肌瘤切除的正常宮頸組織對(duì)照標(biāo)本10例。

PIK3CA蛋白檢測(cè)

免疫組化試劑兔抗人PI3Kp110α單克隆抗體、即用型PV-9000二步法免疫組化檢測(cè)試劑盒、濃縮型DAB試劑盒、PBS磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

免疫組化染色采用免疫組織化學(xué)PV-9000二步法。用已知PIK3CA蛋白陽性的乳腺癌作陽性對(duì)照，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

免疫組化結(jié)果判定觀察結(jié)果采用雙盲法。p110α蛋白陽性染色位于胞漿。高倍鏡下隨機(jī)選5個(gè)視野,結(jié)合陽性細(xì)胞百分率和染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分級(jí)。染色強(qiáng)度判定標(biāo)準(zhǔn)如下:胞漿內(nèi)無著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;陽性細(xì)胞百分率判定:無陽性細(xì)胞為0分，陽性細(xì)胞百分率10%為1分,10%～50%為2分,50%～80%為3分，80%為4分。兩項(xiàng)結(jié)果相乘得0分者為陰性，3分為弱陽性,4～8分為中度陽性,9～12分為強(qiáng)陽性。為便于統(tǒng)計(jì)分析，陰性和弱陽性者統(tǒng)一判為陰性，中度陽性和強(qiáng)陽性統(tǒng)一判為陽性。每一切片均有2名醫(yī)師進(jìn)行評(píng)分。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,各組織間p110α表達(dá)的陽性率比較及其與宮頸癌患者臨床病例特征的關(guān)系采用Fishers精確概率法、χ2檢驗(yàn)或作連續(xù)性校正。

2結(jié)果

宮頸鱗癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變中PIK3CA蛋白的表達(dá)

PIK3CA蛋白在各組織中表達(dá)情況見圖1。PIK3CA蛋白在宮頸鱗癌組織中高表達(dá)，38例宮頸鱗癌p110α陽性，呈現(xiàn)中至強(qiáng)度染色。在宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中，19例HSIL顯示p110α陽性，而僅有2例LSILp110α陽性，其余8例無著色或輕微著色，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義正常宮頸上皮中度著色。

圖1PIK3CA蛋白在各組織中表達(dá)

PIK3CA蛋白表達(dá)與宮頸鱗癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系

表1PIK3CA在宮頸鱗癌中表達(dá)的臨床病理意義

a.χ2檢驗(yàn)，b.連續(xù)性校正

中低分化的宮頸鱗癌p110α陽性表達(dá)率高于分化好的腫瘤，這似乎說明p110α高表達(dá)與宮頸鱗癌的分化程度存在某種關(guān)聯(lián)，然而統(tǒng)計(jì)分析顯示兩組之間的差別沒有顯著性意義。p110α的高表達(dá)與宮頸鱗癌患者的其他臨床病理特征也無顯著性關(guān)聯(lián)。

3討論

宮頸癌是全球婦女第二大常見的惡性腫瘤,全世界每年大約有23萬婦女死于這種疾病，而僅在我國(guó)就達(dá)到8萬。眾多流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)室研究表明,宮頸癌的發(fā)生與HPV感染關(guān)系密切,尤其是高危型HPV感染。然而只有一小部分婦女發(fā)生宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(SIL),發(fā)展到浸潤(rùn)性癌的就更少了,因此HPV感染并不是獨(dú)立致病因素，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)其他的基因分子事件是我們認(rèn)識(shí)宮頸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵。

3號(hào)染色體長(zhǎng)臂的擴(kuò)增是宮頸鱗癌中最常存在的基因改變［8-10］,并與宮頸不典型增生演化為侵襲性癌［11］以及宮頸鱗癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)［12］,PIK3CA是定位于3號(hào)染色體的癌基因,其編碼IA類磷脂酰肌醇3-激酶明顯比LSIL組高。這說明PIK3CA高表達(dá)是宮頸鱗癌形成過程中的早期事件,參與宮頸癌變過程，PIK3CA表達(dá)增高意味著低級(jí)別宮頸病變患者的惡化風(fēng)險(xiǎn)增強(qiáng)，因此PIK3CA可能是預(yù)測(cè)LSIL高危風(fēng)險(xiǎn)敏感的生物學(xué)指標(biāo)。GOTO等［15］以宮頸液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本為研究對(duì)象證實(shí)PIK3CA對(duì)于鑒別癌前病變中的重度不典型增生比p16INK4a和Ki-67有更高的特異性，這有利于彌補(bǔ)常規(guī)宮頸涂片和HPV篩查的缺陷，因而具有重要的臨床診斷價(jià)值。我們還發(fā)現(xiàn)，p110α的高表達(dá)與宮頸鱗癌患者的臨床病理特征無顯著性關(guān)聯(lián)，因而p110α可能并不是宮頸鱗癌轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)表型形成的必需因子。

綜上所述,我們的試驗(yàn)結(jié)果表明，PIK3CA過度表達(dá)可能激活PI3K/Akt信號(hào)傳導(dǎo)途徑,參與宮頸癌變過程,因此,PIK3CA有可能成為宮頸癌早期篩查的指標(biāo)，抑制PI3K/Akt通路有可能成為宮頸癌治療新靶點(diǎn)。

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