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文檔簡介
熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)操作指導(dǎo)書1、適用范圍:AGS AGS4800PCRAGS4800戶選擇界面。選擇用戶后,進入軟件操作界面。2、建一個檢測程序文件單擊建按鈕,建一個檢測程序文件。設(shè)置熱蓋溫度調(diào)整熱蓋溫度(30-105105℃。設(shè)置試管加液量依據(jù)實際試管加液量調(diào)整加液量參數(shù)〔5-100μl25μl。設(shè)置擴增程序單擊“添加”創(chuàng)立一個程序段添加程序名稱,設(shè)置各程序段循環(huán)數(shù)。溫度設(shè)置功能按鈕添加 在當(dāng)前溫度節(jié)結(jié)尾,建一個溫度節(jié)插入 在當(dāng)前溫度節(jié)前添加一個溫度節(jié)刪除 將當(dāng)前溫度節(jié)刪除樣本信息錄入翻開樣本參數(shù)設(shè)置界面2.6.3樣本信息設(shè)置選擇擴增的染料,選中要設(shè)置孔位ID本類型,假設(shè)為標(biāo)準(zhǔn)品可以輸入樣本濃度信息。息。最大樣本濃度輸入值1.00e+10??孜贿x擇單孔選擇 通過鼠標(biāo)單擊選中單個孔位。相鄰孔位選擇 通過單擊鼠標(biāo)并拖動選擇矩形框內(nèi)相鄰孔位或者先選中一個孔位,按住“Shift”功能鍵單擊另一孔位進展選擇。不連續(xù)孔位選擇 通過按“Ctrl功能鍵進展依次追加選擇孔位??孜???孜蝗x 在圖示位置單擊鼠標(biāo)左鍵則全選全部孔位。選擇孔位增減 的孔位。樣本類型設(shè)置置,也可以選擇樣本參數(shù)工程中的樣本類型設(shè)置下拉選擇框進展選擇設(shè)置。樣本類型假設(shè)選擇標(biāo)準(zhǔn)品,需輸入樣本濃度。程序運行參數(shù)保存進展保存操作。文件進展首次保存。、程序運行參數(shù)的導(dǎo)入/本參數(shù)。2、文件運行0.2ml5-100μl離心操作 配置完成試劑樣本的試管在放入儀器之前要用離心機進行離心操作,確保試劑液體處于試管底部,且液體內(nèi)部不含有氣泡。放置試管 假設(shè)樣本數(shù)量少于模塊的孔位數(shù),那么在放置試管時應(yīng)盡的頂部。樣本參數(shù)錄入及分組設(shè)置ID、樣本類型信息。程序運行否設(shè)置正確。退出程序運行。3、檢測結(jié)果的保存及分析5次,將自動跳轉(zhuǎn)到結(jié)果分析界面,并彈出保存熒光數(shù)據(jù)對話框。假設(shè)擴增程序沒有保存,則程序運行完畢后,軟件默認(rèn)按當(dāng)前時間對程序、檢測結(jié)果的分析動分析”復(fù)選框取消選擇,然后調(diào)整“基線設(shè)置”和“閾值”設(shè)置。標(biāo)準(zhǔn)濃度設(shè)置〔HEX〕樣本類型同時被設(shè)置為“標(biāo)準(zhǔn)一個通道的樣本濃度,另外一個通道樣本濃度不進展設(shè)置,則進算。同一分組可以分別設(shè)置FAM和HEX兩組標(biāo)準(zhǔn)濃度樣本。首先設(shè)置待分析分組的至少2個同一通道的標(biāo)準(zhǔn)樣本濃度值。自動分析進“定量分析界面”------選擇待分析熒光通道 進展分析計算當(dāng)前通道各樣本濃度值。求,請確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)樣本濃度設(shè)置是否正確。選擇自動計算,則自動計算各孔位的樣本濃度值與Ct值。通常標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)確定值應(yīng)到達(dá)0.98-1之間,此試驗結(jié)果才能認(rèn)為試驗結(jié)果有效。實際應(yīng)用,請依據(jù)試劑操作說明書規(guī)定條件進展試劑狀態(tài)的判定。手動分析當(dāng)前通道手動分析,使“自動分析”復(fù)選框處于未選中狀態(tài)。校準(zhǔn)或取消線性校準(zhǔn)?;€設(shè)置完成后,勾選“閾值設(shè)置”復(fù)選框,調(diào)整閾值數(shù)值或拖動閾值調(diào)整Ct分析數(shù)據(jù)的保存據(jù)及原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出到“Excel”進展處理。4、分析曲線的保存存抓屏文件。5、析結(jié)果的打印、輸出樣本類型修改“樣本類型”修改按鈕。樣本資料修改選擇“報告→檢驗報告→樣本資料”對樣本資料信息進展添加修改。對需要打印的樣本,打印復(fù)選框進展勾選。設(shè)置打印模板選擇“報告→檢驗報告→報告模板”進展模板設(shè)置。假設(shè)不使用電腦缺省打印機設(shè)置,請指定打印輸出的打印機。打印擴增曲線時,包含分析選中的標(biāo)準(zhǔn)品擴增曲線。選擇待打印樣本資料的樣本進展勾選設(shè)置,完成后選擇確定按鈕進展設(shè)置信息保存。打印報表選擇打印預(yù)覽,確認(rèn)打印選擇是否正確。默認(rèn)選中打印擴增曲線時的預(yù)覽效果圖。打印方法一 覽界面選擇打印按鈕。打印方法二 選擇“報告 打印”按鈕。4、儀器維護保養(yǎng)每星期維護任務(wù)歸檔或備份反響板文件使用不脫毛的布塊擦拭儀器外表每月維護任務(wù):執(zhí)行計算機硬盤碎片整理程序其它維護任務(wù):需要時執(zhí)行以下維護任務(wù),以解決遇到的問題:5、常見的故障與處理沒有擴增曲線:PCR硬盤休眠,沒有收集循
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