公共場所衛(wèi)生監(jiān)測微生物檢驗技術演示文稿

公共場所衛(wèi)生監(jiān)測微生物檢驗技術版演示文稿當前第1頁\共有76頁\編于星期五\2點公共場所衛(wèi)生監(jiān)測微生物檢驗技術版當前第2頁\共有76頁\編于星期五\2點

公共場所衛(wèi)生技術服務機構(gòu)承擔的工作?（一）空氣、微小氣候（濕度、溫度、風速）、采光、照明、噪聲等室內(nèi)環(huán)境的衛(wèi)生檢驗、檢測與評價；?（二）顧客用品用具的衛(wèi)生檢驗、檢測與評價；?（三）游泳場（館）和公共浴室水質(zhì)衛(wèi)生檢驗、檢測與評價；?（四）公共場所飲用水（包括：自備水、直飲水、二次供水）衛(wèi)生檢驗、檢測與評價；?（五）集中空調(diào)通風系統(tǒng)的衛(wèi)生檢驗、檢測與評價。當前第3頁\共有76頁\編于星期五\2點2013年公共場所衛(wèi)生監(jiān)測

微生物指標生活飲用水《生活飲用水標準檢驗方法》(GB/T5750)賓館微生物指標

《公共場所衛(wèi)生標準檢驗方法》（GB/T18204-2000）游泳池水微生物指標

《公共場所衛(wèi)生標準檢驗方法》（GB/T18204-2000）集中空調(diào)系統(tǒng)微生物指標

《公共場所集中空調(diào)通風系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》（WS394-2012）當前第4頁\共有76頁\編于星期五\2點

公共場所生活飲用水微生物檢驗指標：菌落總數(shù)、總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲當前第5頁\共有76頁\編于星期五\2點生活飲用水中微生物指標

名稱單位限值菌落總數(shù)CFU/mL100總大腸菌群MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出耐熱大腸菌群MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出大腸埃希氏菌MPN/100mL或CFU/100mL不得檢出賈第鞭毛蟲個/10L<1隱孢子蟲個/10L<1當前第6頁\共有76頁\編于星期五\2點水樣的采集和保存

采樣的原則:1.采集的水樣，必須具有代表性，能真實反映水質(zhì)狀況。2.在實驗室檢測之前水樣中微生物數(shù)量應保持不變。當前第7頁\共有76頁\編于星期五\2點采樣容器1.采樣容器應采用潔凈、無色、無毒的硬質(zhì)玻璃（又稱硼硅玻璃）。樣品瓶必須專瓶專用，切不可用實驗室盛裝過濃溶液的瓶作采樣瓶。通常我們使用500ml的高壓滅菌的細口瓶采樣。2.容器及瓶塞、瓶蓋應能經(jīng)受滅菌的溫度。當前第8頁\共有76頁\編于星期五\2點3.容器洗滌：將容器用自來水和洗滌劑洗滌，并用自來水徹底沖洗后，用10%鹽酸溶液浸泡過夜，然后依次用自來水，蒸餾水洗凈。4.容器滅菌：分干熱和高壓蒸氣滅菌兩種。干熱滅菌要求160℃下維持2h；高壓蒸氣滅菌要求121℃下維持15min，高壓蒸汽滅菌后的容器如不立即使用，應于60℃將瓶內(nèi)冷凝水烘干。滅菌后的容器應在2周內(nèi)使用。當前第9頁\共有76頁\編于星期五\2點水樣采集單獨采樣。同一水源、同一時間采集幾類檢測指標的水樣時，應先采集供微生物學指標檢測的水樣。采樣時應直接采集，不得用水樣涮洗已滅菌的采樣瓶，并避免手指和其他物品對瓶口的沾污。末梢水采集：采樣前用酒精燈灼燒對水管口進行消毒，放水約5分鐘后采集水樣約玻璃瓶的80%。容積整個過程要快，穩(wěn)。不要讓水流過大，以免濺出，管口不要與瓶口接觸，收集完應馬上將瓶塞旋緊。當前第10頁\共有76頁\編于星期五\2點水樣保存方法黑暗處，4℃，4h內(nèi)檢測。如有游離余氯應在采樣瓶消毒前每125ml加0.1mg硫代硫酸鈉溶液(10%)。當前第11頁\共有76頁\編于星期五\2點菌落總數(shù)檢測方法1.平皿計數(shù)法本法適用于生活飲用水及其水源水中菌落總數(shù)的測定。當前第12頁\共有76頁\編于星期五\2點菌落總數(shù)指在一定條件培養(yǎng)后(如培基成分、培養(yǎng)溫度和時間、pH、需氧性質(zhì)等)，1mL水樣中所含菌落的總數(shù)。當前第13頁\共有76頁\編于星期五\2點檢驗步驟生活飲用水?以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中，傾注約15mL已融化并冷卻到45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，立即旋搖平皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。每次檢驗時應做一平行接種，同時另用一個平皿只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作為空白對照。?待冷卻凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，使底面向上，置于36±℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，進行菌落計數(shù)。即為1mL水樣中的菌落總數(shù)。當前第14頁\共有76頁\編于星期五\2點水源水以無菌操作方法吸取1mL充分混勻的水樣，注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中，混勻成1:10稀釋液。?吸取1:10的稀釋液1mL注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中，混勻成1：100稀釋液。按同法依次稀釋成1：1000，1：10000稀釋液籌備用。如此遞增稀釋一次，必須更換一支1mL滅菌吸管。用滅菌吸管取未稀釋的水樣和2個～3個適宜稀釋度的水樣1mL，分別注入滅菌平皿內(nèi)。以下操作同生活飲用水的檢驗步驟。當前第15頁\共有76頁\編于星期五\2點菌落計數(shù)及報告方法菌落計數(shù)方法：先用肉眼觀察，點數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大5倍～10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。?兩個平板若其中一個平皿有較大片狀菌落生長時，應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的平均菌落數(shù)。若片狀菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半皿計數(shù)后乘2以代表全皿菌落數(shù)。然后再求該稀釋度的平均菌落數(shù)。當前第16頁\共有76頁\編于星期五\2點不同稀釋度的選擇及報告方法首先選擇平均菌落數(shù)在30～300之間者進行計算，若只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時,則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。若有兩個稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30～300之間，則視二者之比值來決定，若其比值小于2應報告兩者的平均效。若大于或等于2則報告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。當前第17頁\共有76頁\編于星期五\2點若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應以按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。?若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，則應以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。?若所有稀釋度的平板上均無菌落生長，則以未檢出報告之。當前第18頁\共有76頁\編于星期五\2點如果所有平板上都菌落密布，不要用“多不可計”報告，而應在稀釋度最大的平板上，任意數(shù)其中2個平板1cm2中的菌落數(shù)，除2求出每平方厘米內(nèi)平均菌落數(shù)，乘以皿底面積63.6，再乘其稀釋倍數(shù)作報告。菌落計數(shù)的報告：菌落數(shù)在100以內(nèi)時按實有數(shù)報告，大于100時，采用兩位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計算，為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)也可用10的指數(shù)來表示（見表1“報告方式”欄）。當前第19頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第20頁\共有76頁\編于星期五\2點總大腸菌群定義：一群在36℃條件下培養(yǎng)24～48小時能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌?？偞竽c菌群是衛(wèi)生學上的概念，不是細菌分類學概念，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面并非完全一致。主要包括埃希氏菌屬，克雷伯氏菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬等的細菌。當前第21頁\共有76頁\編于星期五\2點衛(wèi)生學概念總大腸菌群分布較廣，在溫血動物糞便和自然界廣泛存在。人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是總大腸菌群在自然界存在的主要原因。但它也來自植物的土壤，它所包括的微生物在地面水中也可繁殖。糞便中多以典型大腸桿菌為主，而外界環(huán)境中則以總大腸菌群其他型別較多。當前第22頁\共有76頁\編于星期五\2點多管發(fā)酵法本法適用于生活飲用水及其水源水中總大腸菌群的測定?？偞竽c菌群檢測比較簡單，所以被廣泛用做水源的衛(wèi)生指標和食品加工衛(wèi)生狀況的通用指標。也是評價生活飲用水衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標之一。當前第23頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第24頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第25頁\共有76頁\編于星期五\2點EMB分離培養(yǎng)將產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍瓊脂平板上，于36℃±l培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h～24h，觀察菌落形態(tài)，挑取符合下列特征的菌落作革蘭氏染色、鏡檢和證實試驗。?深紫黑色、具有金屬光澤的菌落；?紫黑色、不帶或略帶金屬光澤的菌落；?淡紫紅色、中心較深的菌落。當前第26頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第27頁\共有76頁\編于星期五\2點鏡檢當前第28頁\共有76頁\編于星期五\2點復發(fā)酵當前第29頁\共有76頁\編于星期五\2點結(jié)果報告根據(jù)證實為總大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN（mostprobablenumber，最可能數(shù)）檢索表，報告每100mL水樣中的總大腸菌群最可能數(shù)(MPN)值。?稀釋樣品查表后所得結(jié)果應乘稀釋倍數(shù)。?如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時，可報告總大腸菌群未檢出（注意稀釋度）。當前第30頁\共有76頁\編于星期五\2點耐熱大腸菌群計數(shù)定義：在44.5℃培養(yǎng)24h~48h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。是大腸菌群的一個亞群，主要是埃希氏菌屬和耐熱克雷伯菌屬。它很少在地面水中繁殖，且僅來源于人和溫血動物的糞便，因此其衛(wèi)生學意義更大，檢出之表明飲水已被糞便污染，有可能有腸道致病菌和寄生蟲等病原體的危險。當前第31頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第32頁\共有76頁\編于星期五\2點大腸埃希氏菌定義：大腸埃希氏菌廣泛存在于是人和溫血動物的腸道中，能夠在44.5℃發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、IMViC生化試驗為++--或-+--大腸埃希氏菌主要是用于指示水源近期受到糞便污染。該指標與糞便污染的相關性好當前第33頁\共有76頁\編于星期五\2點檢驗方法多管發(fā)酵法總大腸菌群多管發(fā)酵法初發(fā)酵檢測陽性管，用接種環(huán)挑一環(huán)到EC-MUG管中，44.5℃培養(yǎng)24h±2h，用366nm紫外燈照攝，產(chǎn)生蘭色熒光者為陽性當前第34頁\共有76頁\編于星期五\2點酶底物法大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解四甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide，MUG）使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理，來判斷水樣中是否含有大腸埃希氏菌。定性試驗、定量試驗（10管法、51孔定量盤法）培養(yǎng)基：EC-MUG黃色有藍色熒光者為陽性水樣不變黃有藍色熒光者不屬于陽性當前第35頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第36頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第37頁\共有76頁\編于星期五\2點公共場所衛(wèi)生檢驗、檢測與評價公共場所空氣細菌總數(shù)測定(GB/T18204.1-2000)茶具、毛巾、床上臥具等公共用品的細菌總數(shù)和大腸菌群當前第38頁\共有76頁\編于星期五\2點公共場所空氣細菌總數(shù)檢驗方法

（GB/T18204.1-2000）撞擊法：將集菌的營養(yǎng)瓊脂平板置36±1℃培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。自然沉降法：將已采樣平板置36±1℃培養(yǎng)48h，計數(shù)每塊平板上菌落數(shù)，求出全部采樣點的平均菌落數(shù)。當前第39頁\共有76頁\編于星期五\2點公共場所空氣細菌總數(shù)結(jié)果報告撞擊法

計算公式：細菌總數(shù)=平皿菌落數(shù)/（采樣器流量*采樣時間）結(jié)果單位：cfu/m3

自然沉降法

計算公式：細菌總數(shù)=平均每皿菌落數(shù)結(jié)果單位：cfu/皿當前第40頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具細菌總數(shù)檢驗方法

（GB/T18204.2-2000）采樣：用滅菌生理鹽水濕潤棉拭子，在茶具與口唇接觸的內(nèi)外緣涂抹50cm2，既1-1.5cm高處一圈。用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分，將棉拭子放入10mL生理鹽水內(nèi)，4h內(nèi)送檢。此液作為1:10當前第41頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具細菌總數(shù)檢驗方法將采來的1:10樣品涂抹液（棉拭子涂抹）充分混勻，再取1:10樣液1mL于9mL的NS中充分混勻為1:100樣液。兩稀釋度各吸樣液于兩個平皿中，每皿1mL。最后注入營養(yǎng)瓊脂，置36±1℃培養(yǎng)48h計數(shù)菌落數(shù)。同時做空白對照。當前第42頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具細菌總數(shù)結(jié)果報告計算公式：細菌總數(shù)=平均菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)/50單位：cfu/cm2當前第43頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具大腸菌群檢驗方法

（GB/T18204.3-2000）當前第44頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具大腸菌群檢驗發(fā)酵法：取測定茶具菌落總數(shù)剩余樣品，倒入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵溶液中，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h后進行觀察。陰性報告。陽性進一步接種EMB、乳糖發(fā)酵管。紙片法：用滅菌生理鹽水濕潤5cm×5cm大腸菌群快速檢測紙片兩張，分別粘貼在茶具內(nèi)、外緣口唇接觸處，約30S后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h后進行觀察。結(jié)果報告當前第45頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具大腸菌群發(fā)酵法檢驗步驟推測性試驗：將測定細菌總數(shù)剩余的檢樣倒入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵液中，置36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。證實試驗：自推測性試驗陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，接種EMB平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。挑取可疑菌落染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管做復發(fā)酵試驗，36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。當前第46頁\共有76頁\編于星期五\2點茶具大腸菌群紙片法檢驗步驟將已采樣的大腸菌群測定紙片置36±1℃培養(yǎng)16～18h觀察結(jié)果。結(jié)果判定：若紙片保持紫藍色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃并在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點或片狀紅暈為陽性。當前第47頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具細菌總數(shù)檢驗方法

（GB/T18204.4-2000）涂抹法：25c㎡(5cm×5cm)面積范圍;床單、被單在上下兩部各25c㎡面積范圍內(nèi)有順序地來回涂抹，將棉拭子放人10mL生理鹽水內(nèi)，4h內(nèi)送檢戳印法當前第48頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具細菌總數(shù)涂抹法

檢驗步驟將采來的1:10樣品涂抹液（棉拭子涂抹）充分混勻，再取1:10樣液1mL于9mL的NS中充分混勻為1:100樣液。兩稀釋度各吸樣液于兩個平皿中，每皿1mL。最后注入營養(yǎng)瓊脂，置36℃培養(yǎng)48h計數(shù)菌落數(shù)。同時做空白對照。當前第49頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具細菌總數(shù)結(jié)果報告計算公式：細菌總數(shù)=平均菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)/2單位：cfu/25cm2當前第50頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具大腸菌群檢驗方法

（GB/T18204.5-2000）發(fā)酵法紙片法當前第51頁\共有76頁\編于星期五\2點采樣涂抹法：用測定細菌總數(shù)時采集的樣品，無需重采。紙片法：用滅菌生理鹽水濕潤5cm×5cm大腸菌群快速測定紙片兩張，分別粘貼在毛巾、床上臥具規(guī)定部位和面積范圍內(nèi)，約30s后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。培養(yǎng)。當前第52頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具大腸菌群發(fā)酵法

檢驗步驟推測性試驗：將測定細菌總數(shù)剩余的檢樣倒入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵液中，置36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。證實試驗：自推測性試驗陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，接種EMB平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。挑取可疑菌落染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管做復發(fā)酵試驗，36±1℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。當前第53頁\共有76頁\編于星期五\2點毛巾、床上臥具大腸菌群紙片法

檢驗步驟將已采樣的大腸菌群測定紙片置36±1℃培養(yǎng)16～18h觀察結(jié)果。結(jié)果判定：若紙片保持紫藍色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃并在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點或片狀紅暈為陽性。當前第54頁\共有76頁\編于星期五\2點理發(fā)用具微生物檢驗方法-金黃色葡萄球菌測定指在BaurdParker培養(yǎng)基或血平板培養(yǎng)基上生長良好，分解甘露醇產(chǎn)酸；血漿凝固酶陽性的革蘭氏陽性葡萄球菌。?菌落直徑為2～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。當前第55頁\共有76頁\編于星期五\2點金黃色葡萄球菌檢測取大腸菌群檢測后剩余的5mL待檢樣品，放入45mL7.5%氯化鈉肉湯或胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，36℃±1℃增菌24h。分離于P-k培養(yǎng)基（或用血平皿），36℃±1℃24h。挑取典型菌落作涂片鏡檢、甘露醇發(fā)酵試驗和血漿凝固酶試驗當前第56頁\共有76頁\編于星期五\2點當前第57頁\共有76頁\編于星期五\2點

公共場所拖鞋微生物檢驗方法-

霉菌和酵母菌測定指在一定條件培養(yǎng)后，50cm2面積檢樣中所含有的霉菌和酵母菌落數(shù)。霉菌和酵母菌主要作為判定被檢樣品被霉菌和酵母菌污染程度的標志，以便對被檢樣進行衛(wèi)生學評價時提供依據(jù)。當前第58頁\共有76頁\編于星期五\2點將無菌棉拭子蘸取無菌生理鹽水，在每只拖鞋鞋面與腳趾接觸處5cm×5cm面積上，有順序地均勻涂抹3次（一雙拖鞋為一份樣品）后，用滅菌剪刀將棉拭子手執(zhí)部分剪斷，將棉拭子放入10mL裝有玻璃珠的無菌鹽水管中。?將盛有棉拭子的鹽水管在手心用力振蕩100次，再用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。此液為1:10稀釋液。?依次做10倍遞增稀釋，根據(jù)樣品的污染情況，選擇3個合適的稀釋度。?將溶化并冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基注入滅菌的平皿中，待瓊脂凝固后，倒置于25～28℃溫箱中，3天后開始觀察，共培養(yǎng)觀察一周。當前第59頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水微生物指標細菌總數(shù)大腸菌群當前第60頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水細菌總數(shù)檢驗方法

（GB/T18204.9-2000）取樣液到2只平皿中，每皿1mL；另取樣液1mL到9mL滅菌生理鹽水中作1：10稀釋，取稀釋液到2只平皿中，每皿1mL。最后注入營養(yǎng)瓊脂置36℃培養(yǎng)48h計數(shù)菌落數(shù)。同時做空白對照。當前第61頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水細菌總數(shù)結(jié)果報告計算公式：細菌總數(shù)=平均菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)單位：cfu/mL當前第62頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水大腸菌群檢驗方法

（GB/T18204.10-2000）發(fā)酵法濾膜法當前第63頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水大腸菌群發(fā)酵法

檢驗步驟推測性試驗：在2個裝有50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管內(nèi)各加入100mL水樣，在10支裝有5mL三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管內(nèi)各加入10mL水樣，36℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。證實試驗：自推測性試驗陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，接種EMB平板上，置36℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。挑取可疑菌落染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管做復發(fā)酵試驗，36℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。當前第64頁\共有76頁\編于星期五\2點游泳池水大腸菌群濾膜法

檢驗步驟水樣過濾，濾膜截留細菌面向上，貼緊乳糖瓊脂分離培養(yǎng)基，置36℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。典型菌落染色鏡檢挑取可疑菌落染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管做復發(fā)酵試驗，36℃培養(yǎng)24h觀察結(jié)果。當前第65頁\共有76頁\編于星期五\2點集中空調(diào)系統(tǒng)微生物指標送風中細菌總數(shù)、真菌總數(shù)、β-溶血性鏈球菌風管內(nèi)表面細菌總數(shù)、真菌總數(shù)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團菌當前第66頁\共有76頁\編于星期五\2點送風中細菌總數(shù)檢驗方法

（WS394-2012附錄D）送風中細菌總數(shù)：集中空調(diào)通風系統(tǒng)送風中通過六級篩孔空氣撞擊式采樣器采集的樣品，計數(shù)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35~37℃、48h培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)。以每立方米空氣中菌落形成單位（CFU/m3）報告。當前第67頁\共有76頁\編于星期五\2點送風中真菌總數(shù)檢驗方法

（WS394-2012附錄E）送風中真菌總數(shù)：集中空調(diào)通風系統(tǒng)送風中通過六級篩孔空氣撞擊式采樣器采集的樣品，計數(shù)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)28℃、5d培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)。以每立方米空氣中菌落形成單位（CFU/m3）報告。當前第68頁\共有76頁\編于星期五\2點送風中β-溶血性鏈球菌檢驗方法

（WS394-2012附錄F）送風中β-溶血性鏈球菌：集中空調(diào)通風系統(tǒng)送風中通過六級篩孔空氣撞擊式采樣器采集的樣品，計數(shù)在血瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35~37℃、24h~48h培養(yǎng)所形成的典型菌落數(shù)。以每立方米空氣中菌落形成單位（CFU/m3）報告。當前第69頁\共有76頁\編于星期五\2點風管內(nèi)表面微生物檢驗方法

（WS394-2012附錄I）風管內(nèi)表面微生物檢測主要包括細菌總數(shù)和真菌總數(shù)。采