腸桿菌科的分類與鑒定-課件

腸桿菌科的分類與鑒定腸桿菌科是臨床上最常見的一類革蘭氏陰性桿菌，它主要存在于人或動(dòng)物的腸道以及自然界的水源、土壤中。在正常情況下，多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌對(duì)人是無害的，有些菌種還是人體所必需的，這是因?yàn)槟c桿菌科在正常寄生部位和正常寄生數(shù)量的條件下對(duì)人體具有重要的生理作用：2第一節(jié)、

腸桿菌科的生理作用腸桿菌科在正常寄生部位和正常寄生數(shù)量的條件下對(duì)人體具有以下重要的生理作用：1、自然菌膜的保護(hù)作用：腸桿菌科作為一種正常菌群，在腸道粘膜上生長繁殖形成一層自然菌膜。他們是非特異性的局部保護(hù)膜，可使機(jī)體抵抗病原微生物的侵襲和群集。Andreyeva等在兩組HEP—2細(xì)胞上作了如下試驗(yàn)：342、非特異性免疫作用：

正常菌群對(duì)人體是一種抗原刺激，可使機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，從而限制了病原菌的危害性。如大腸埃希氏菌的生理作用之一就是廣譜的免疫原性。有人作了如下試驗(yàn)：53、生物合成作用：

腸桿菌科細(xì)菌能合成核黃素、生物素、葉酸、泛酸、吡多醇、維生素K和B族維生素等重要物質(zhì)。如人體所需的維生素K和B族維生素等在自然食物中極少含有，必須靠大腸埃希氏菌合成，若長期使用抗生素導(dǎo)致大腸埃希氏菌缺失，可造成維生素K和B族維生素的缺乏。64、生物拮抗作用：

腸桿菌科的生物拮抗作用主要靠與病原菌爭奪營養(yǎng)和占據(jù)空間位置來實(shí)現(xiàn)。此外，大腸埃希氏菌還產(chǎn)生大腸菌素和酸性物質(zhì)，抑制志賀氏菌和金葡菌的生長。由此可見，腸桿菌科在正常寄生部位和正常寄生數(shù)量的情況下，不僅對(duì)人體無害，并且有益，但如果其寄生部位和寄生數(shù)量發(fā)生變化，同樣可引起機(jī)體的各類病變。因此，腸桿菌科的多數(shù)細(xì)菌又被稱為“條件致病菌”。此外，腸桿菌科中還有一些細(xì)菌如沙門氏菌屬、志賀氏菌屬是世界公認(rèn)的腸道病原菌。7第二節(jié)、

腸桿菌科的分類與鑒定

8一、腸桿菌科的概念

腸桿菌科包括一大類生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。它們需氧或兼性厭氧生長；營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好；多數(shù)具有周身鞭毛（少數(shù)無鞭毛）；能分解葡萄糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣，多數(shù)能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽；氧化酶（—），觸酶陽性，O/F試驗(yàn)（F型）；DNAG+C=38—60mol%。9大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流10二、腸桿菌科的初步識(shí)別

腸桿菌科弧菌科非發(fā)酵菌群巴氏菌科形態(tài)短桿狀弧狀或逗點(diǎn)狀球桿狀球桿狀鞭毛及位置周毛或無端毛周、端毛或無無氧化酶—++/—+

O/F試驗(yàn)FFO/—F11三、腸桿菌科的初步分群

腸桿菌科現(xiàn)有31個(gè)屬和8個(gè)未分類的生化群121314四、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陽性菌群的分類鑒定

苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陽性菌群共包括三個(gè)菌屬，即：變形桿菌屬、摩爾根氏菌屬、普羅維登斯菌屬。151617181、變形桿菌屬的分類鑒定

變形桿菌屬原來共分為四個(gè)種，即：普通變形桿菌（包括生物2群和生物3群）、奇異變形桿菌、潘尼氏變形桿菌和產(chǎn)粘液變形桿菌。2000年又將普通變形桿菌生物3群命名為豪薩變形桿菌。1920212、摩爾根氏菌屬的分類鑒定

摩爾根氏菌屬只有一個(gè)種，即摩爾根摩爾根氏菌。它又包括兩個(gè)亞種即：摩爾根摩爾根氏亞種和摩爾根西伯尼亞種。兩者的主要區(qū)別在于：后者能分解海藻糖而前者不能。223、普羅維登斯菌屬的分類鑒定

普羅維登斯菌屬包括5個(gè)種即：產(chǎn)堿普羅維登斯菌、雷極普羅維登斯菌、斯圖氏普羅維登斯菌、拉氏普羅維登斯菌和海氏普羅維登斯菌。其中拉氏普羅維登斯菌和海氏普羅維登斯菌主要存在于動(dòng)物體內(nèi)，一般不能從人體分離出，故不具有臨床意義。232425五、葡萄糖酸鹽利用試驗(yàn)陽性菌群的分類鑒定

葡萄糖酸鹽利用試驗(yàn)陽性菌群包括5個(gè)菌屬，即：腸桿菌屬、泛桿菌屬、克雷伯氏菌屬、沙雷氏菌屬和哈夫尼亞菌屬。26271、腸桿菌屬和泛桿菌屬的

分類鑒定

腸桿菌屬目前共分為11個(gè)種，即；產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌、坂崎腸桿菌、格高菲腸桿菌、泰洛腸桿菌、河生腸桿菌、中間腸桿菌、阿氏腸桿菌、致癌腸桿菌、溶解腸桿菌、超壓腸桿菌。其中與人類關(guān)系密切、具有較大臨床意義的只有前四個(gè)種。泛桿菌屬有2個(gè)種即：聚團(tuán)泛桿菌（聚團(tuán)腸桿菌，聚團(tuán)多源菌）、彌散泛桿菌。其中只有聚團(tuán)泛桿菌具有臨床意義，而彌散泛桿菌從未從人類標(biāo)本中分離出。28293031322、克雷伯氏菌屬的分類鑒定

克雷伯氏菌屬現(xiàn)在分為2個(gè)種，即：肺炎克雷伯氏菌、催產(chǎn)（產(chǎn)酸）克雷伯氏菌。其中肺炎克雷伯氏菌又包括肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種、肺炎克雷伯氏菌臭鼻亞種和肺炎克雷伯氏菌鼻硬結(jié)亞種三個(gè)亞種。原來屬于該菌屬的土生、植生和解鳥氨酸克雷伯氏菌，2001年后被劃歸為勞特氏菌屬?？死撞暇鷮俚?個(gè)種均具有臨床意義。33343536373、沙雷氏菌屬的分類鑒定

沙雷氏菌屬包括8個(gè)種：粘質(zhì)沙雷氏菌、液化沙雷氏菌、深紅色沙雷氏菌、臭味(氣味）沙雷氏菌、蟲媒（嗜蟲）沙雷氏菌、普城（普利矛斯）沙雷氏菌、無花果沙雷氏菌。另有一個(gè)分類地位尚未確定的泉居沙雷氏菌。其中從粘質(zhì)沙雷氏菌中又分出一個(gè)生物1群；臭味(氣味）沙雷氏菌又分為生物1群和生物2群。沙雷氏菌屬中具有臨床意義的有三個(gè)種，即：粘質(zhì)沙雷氏菌、液化沙雷氏菌、深紅色沙雷氏菌。383940414、哈夫尼亞菌屬的分類鑒定

該菌屬只有一個(gè)種，即：蜂房哈夫尼亞菌。其特點(diǎn)是；不分解乳糖；發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；動(dòng)力“+”；I“—”；V-P“+”；C“+”；賴氨酸“+”；鳥氨酸“+”；H2S“—”;山梨醇“—”；棉籽糖“—”。42（六）、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陰性；葡萄糖酸鹽利用試驗(yàn)陰性菌群的分類鑒定

臨床上可以見到的苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陰性；葡萄糖酸鹽利用試驗(yàn)陰性菌群包括埃希氏菌屬、志賀氏菌屬、沙門氏菌屬、枸櫞酸桿菌屬和愛德華氏菌屬五個(gè)屬，以及耶爾森氏菌屬中的小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌。4344451、埃希氏菌屬的分類鑒定

埃希氏菌屬共分為5個(gè)種，即：大腸埃希氏菌、蟑螂埃希氏菌、弗格森埃希氏菌、赫爾曼埃希氏菌、傷口埃希氏菌。最近還發(fā)現(xiàn)了一個(gè)未被確定的新種，稱為不脫胺/凝聚埃希氏菌。在這些種中，最具臨床價(jià)值的只有大腸埃希氏菌一個(gè)種。464748大腸埃希氏菌是典型的腸道正常寄生菌，但有5個(gè)血清型可引起嚴(yán)重腹瀉。這5個(gè)血清型分別是：腸毒素型大腸埃希氏菌（ETEC）、腸致病型大腸埃希氏菌（EPEC）、腸侵襲型大腸埃希氏菌（EIEC）、腸出血型大腸埃希氏菌（EHEC）（常見者有：O157:H7）、腸凝聚型大腸埃希氏菌（EAggEC）。這5種致病性大腸埃希氏菌的鑒定主要靠血清學(xué)反應(yīng)。492、志賀氏菌屬的分類鑒定

志賀氏菌屬分為4個(gè)血清群，A群為痢疾志賀氏菌；B群為福氏志賀氏菌；C群為鮑義德志賀氏菌；D群為宋內(nèi)志賀氏菌。這4個(gè)血清型的鑒定主要靠血清學(xué)反應(yīng)。503、枸櫞酸桿菌屬的分類鑒定

枸櫞酸桿菌屬包括11個(gè)種即：弗勞地、異型、丙二酸鹽陰性（無丙二酸鹽）、布拉克、法摩、腐蝕、絲得雷、魏氏、楊格、吉爾、莫利尼枸櫞酸桿菌。但在臨床上只有弗勞地枸櫞酸桿菌、異型枸櫞酸桿菌和丙二酸鹽陰性（無丙二酸鹽）枸櫞酸桿菌可以見到并有臨床意義。5152534、愛德華氏菌屬的分類鑒定

愛德華氏菌屬目前分為3個(gè)種：遲緩愛德華氏菌、?？茞鄣氯A氏菌、鯰魚愛德華氏菌。其中遲緩愛德華氏菌又分為野生型和生物1型兩個(gè)血清型。5455565、沙門氏菌屬的分類鑒定

沙門氏菌屬是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬。按Kauffman—White的分類標(biāo)準(zhǔn)，有2200種以上的血清型。可根據(jù)沙門氏菌的菌體抗原（O抗原）分群；再根據(jù)其鞭毛抗原（H抗原）分型。57目前公認(rèn)的分類方法是將沙門氏菌分為6個(gè)亞屬（亞屬1—6），其中亞屬3又分為3a和3b。這6個(gè)亞屬分別是：亞屬1豬霍亂沙門氏菌亞屬2薩拉姆沙門氏菌亞屬3a亞利桑那沙門氏菌亞屬3b雙向（第）亞利桑那沙門氏菌亞屬4豪頓沙門氏菌亞屬5邦戈?duì)柹抽T氏菌亞屬6腸沙門氏菌在這6個(gè)亞屬中，絕大多數(shù)（>99%）沙門氏菌的臨床分離株屬亞屬1的菌種。5859沙門氏菌的分類和鑒定主要依據(jù)是其抗原構(gòu)造。根據(jù)Kauffman—White的分類原則：若含有沙門氏菌的菌體和鞭毛抗原，則生化反應(yīng)不典型也應(yīng)鑒定為沙門氏菌；若不含沙門氏菌的菌體和鞭毛抗原，則生化反應(yīng)典型也不應(yīng)鑒定為沙門氏菌。60附1.沙門氏菌屬的抗原構(gòu)造

沙門氏菌屬有三種抗原成分：菌體抗原（O抗原；Ohnehauch）；鞭毛抗原（H抗原；Hauch）；包膜抗原（K抗原；Kapsel）。611、菌體抗原（O抗原）：

化學(xué)本質(zhì)：多糖——類脂——蛋白質(zhì)復(fù)合物特性：耐熱，加熱100℃2h不被破壞，也不被0.1%石碳酸和酒精破壞。62種類：菌體抗原的種類很多，迄今已發(fā)現(xiàn)有58種，分別用阿拉伯?dāng)?shù)字O1——O67表示。在這58種O抗原中，有的是許多沙門氏菌所共有的，有的是某種沙門氏菌所獨(dú)有的。我們把含有共同O抗原的沙門氏菌組成一個(gè)群，這樣可以把2200多種沙門氏菌分成42個(gè)血清群，分別以“A、B、C、D……直至Z”表示，“Z”以后再以“O51——O67”表示（無O64）。對(duì)人致病的沙門氏菌均屬“A、B、C、D、E、F”六群。菌體抗原（O抗原）是沙門氏菌分群的依據(jù)。632、鞭毛抗原（H抗原）：

化學(xué)本質(zhì)：蛋白質(zhì)。性質(zhì)：不耐熱、不穩(wěn)定，加熱或用酒精處理均可破壞。H抗原經(jīng)甲醛處理后，可將O抗原全部遮蓋，從而制成“H抗原”。種類：H抗原有“兩相”，即“第一相”和“第二相”?！暗谝幌唷庇址Q“特異相”，用“a、b、c、d……z”表示，“z”以后用“z1……z65”表示。第一相H抗原是沙門氏菌分型的依據(jù)。

“第二相”又稱“非特異相”，用阿拉伯?dāng)?shù)字“1、2、3……”表示。H抗原具有“交相分生”現(xiàn)象。643、包膜抗原（K抗原）：

種類：K抗原包括“Vi抗原”、“M抗原”和“5抗原”三類。具有分類意義的是“Vi抗原”?！癡i抗原”是一種酸性多糖的復(fù)合物，即：聚N——乙酰——D——半乳糖胺糖醛酸。它對(duì)“O抗原”具有遮蔽作用，可阻止“O抗原”與相應(yīng)血清發(fā)生凝集，并能保護(hù)沙門氏菌免受吞噬細(xì)胞的吞噬和保護(hù)細(xì)菌不被相應(yīng)的抗體在補(bǔ)體介導(dǎo)下裂解，故能增加沙門氏菌的侵襲力（Virulence），因此被稱為“Vi抗原”。“Vi抗原”不耐熱、不穩(wěn)定，加熱和傳代均能使其破壞。65附2.沙門氏菌屬血清學(xué)鑒定

方法舉例

1．先根據(jù)主要菌體抗原分群。A群——O2；B群——O4；C群——O6；D群——O9；E群——O3；F群——O112．