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從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。在從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中,不僅需要通過(guò)分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中,不僅需要通過(guò)分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特1、用固體培養(yǎng)基分離和純化這方法包括將單個(gè)微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面最常用的分離、培養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基平板。這種由Kock建立的采用平板分離微生物純培養(yǎng)的技術(shù)簡(jiǎn)便易行,稀釋倒平板法首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。涂布平板法因?yàn)閷⑽⑸飸乙合燃拥捷^燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡圖1)。圖1涂布平板法平板劃線法在無(wú)菌平板表面進(jìn)行連續(xù)劃線(圖2),微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并四格法等。圖2平板劃線法稀釋搖管法50℃左右,將待分離的材料用這些試管進(jìn)行梯度稀釋,試管迅速2、用液體培養(yǎng)基分離和純化(一般應(yīng)超過(guò)3、單細(xì)胞(孢子)分離(或單孢子4、選擇培養(yǎng)分離沒(méi)有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)條件能夠滿足一切微生物生長(zhǎng)的需要經(jīng)過(guò)一定時(shí)間培養(yǎng)后使該菌在群落中的數(shù)量上升利用選擇平板進(jìn)行直接分離富集培養(yǎng)pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營(yíng)養(yǎng)等等許多方
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