三年制醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)?？?臨床檢驗免疫學(xué)-教學(xué)大綱

臨床免疫學(xué)檢驗教學(xué)大綱(ClinicalLaboratoryImmunology)(供三年制醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)?？茖I(yè)使用)前言《臨床檢驗免疫學(xué)》是醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)的重要專業(yè)課之一。它主要講述臨床免疫學(xué)的基本技術(shù)、基本理論及常用的免疫學(xué)診斷方法，以及常見免疫相關(guān)性疾病的免疫學(xué)特征及免疫學(xué)診斷的意義。針對檢驗?？频氖谡n不同與本科層次，它主要強(qiáng)調(diào)的是學(xué)生實驗動手能力的培養(yǎng)，因此學(xué)生應(yīng)熟練掌握臨床檢驗科開展的常用免疫學(xué)檢驗技術(shù)，掌握臨床免疫相關(guān)疾病的免疫學(xué)特征，并能針對不同的臨床病例開展相關(guān)免疫學(xué)項目的診斷，并能對診斷結(jié)果進(jìn)行合理的臨床解釋和分析。目前質(zhì)量控制是檢驗工作的重要組成部分，要求學(xué)生能熟悉關(guān)于免疫檢驗的相關(guān)質(zhì)量控制。本門課程的教學(xué)目的和基本技能訓(xùn)練要求是：通過對臨床免疫檢驗工作較廣泛的認(rèn)識，使學(xué)生對臨床免疫檢驗工作形成較深刻的理解，掌握各種免檢理論和操作技能，養(yǎng)成良好的實驗室工作作風(fēng)，為畢業(yè)后能從事臨床免疫檢驗工作奠定良好的理論和實驗室基礎(chǔ)。臨床免疫檢驗工作涉及面廣，內(nèi)容多，授課必須重點突出，主次分明，詳略得當(dāng)，難點講透，以確保學(xué)有所獲。本大綱是參考中國醫(yī)藥科技出版社出版、呂世靜主編、第二版?臨床免疫學(xué)檢驗?教材制定的,并確定高等醫(yī)學(xué)院校臨床醫(yī)學(xué)類三年制醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)的臨床免疫學(xué)檢驗教學(xué)的目的要求。在每章的“目的要求”項目中，指出掌握、熟悉與了解三級要求。掌握內(nèi)容是本章節(jié)的教學(xué)重點，亦是理論和實驗的重點考試范圍；熟悉內(nèi)容為選擇性講授和學(xué)生自修內(nèi)容；了解內(nèi)容為供學(xué)生自學(xué)和教師選擇性教授。在“教學(xué)內(nèi)容”項目中，劃有橫線條的部分是要求掌握的具體內(nèi)容。通過講授、實驗、電教片學(xué)習(xí)、多媒體課件學(xué)習(xí)、病例討論及自學(xué)等方式進(jìn)行教學(xué)。本課程總學(xué)時為100課時，其中理論講授58學(xué)時，實驗42學(xué)時。本課程為校考課，課程考核成績由平時考核和課終考核組成，其中課終考核采用筆答考試方式，其成績占課程最終成績的60％，平時考核由平時表現(xiàn)和實驗報告兩部分組成，各占20%和20%。各章參考學(xué)時分配表 內(nèi)容 理論學(xué)時數(shù)實驗學(xué)時數(shù)概論1抗原抗體反應(yīng) 一2免疫原和抗血清制備 一3單克隆抗體與基因工程抗體的制備技術(shù) 一3凝集反應(yīng) 一2 沉淀反應(yīng) 4補(bǔ)體系統(tǒng)檢測及應(yīng)用 一2放射免疫技術(shù) 一3熒光免疫技術(shù)3酶免疫技術(shù) 一3化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)2其他標(biāo)記技術(shù) 一3免疫細(xì)胞分離及功能檢測 一6免疫檢驗的質(zhì)量控制 一3 超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測 5 自身免疫性疾病及其免疫檢測 4 免疫增殖性疾病及其免疫檢測 3 免疫缺陷性疾病及其免疫檢測 3移植免疫及其免疫檢測 一3實驗一膠乳凝集試驗（抗"0”及RF檢測）3實驗二免疫電泳試驗 一4實驗三熒光抗體顯微技術(shù)試驗 4實驗四酶聯(lián)免疫吸附試驗1 4實驗五酶聯(lián)免疫吸附試驗23實驗六斑點免疫印跡試驗 4實驗七自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀見習(xí) 一3實驗八補(bǔ)體檢測試驗 一4實驗九外周血單個核細(xì)胞分離 4實驗十免疫印跡法檢測抗ENA 3實驗十一PEG沉淀法檢測循環(huán)免疫復(fù)合物一3實驗十二AlDS病實驗室檢測見習(xí) 3 合計 5842概論目的要求掌握基礎(chǔ)免疫學(xué)的概念及主要內(nèi)容。熟悉臨床檢驗免疫學(xué)的研究對象及其任務(wù)。教學(xué)內(nèi)容.免疫學(xué)概念；功能：免疫防御、免疫自穩(wěn)及免疫監(jiān)視。.免疫系統(tǒng)的組成免疫器官：中樞免疫器官（骨髓及胸腺），外周免疫器官（淋巴結(jié)、脾臟等）；免疫細(xì)胞：淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞）,單核一吞噬細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答的細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等）；免疫分子:免疫球蛋白、補(bǔ)體系統(tǒng)、細(xì)胞因子、粘附因子、CD抗原等..臨床檢驗免疫學(xué)的研究對象及任務(wù)免疫學(xué)技術(shù):沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、酶標(biāo)免疫技術(shù)、熒光標(biāo)記免疫技術(shù)等；臨床免疫學(xué)：免疫學(xué)期基礎(chǔ)理論、臨床疾病及免疫學(xué)技術(shù)的結(jié)合.抗原抗體反應(yīng)目的要求掌握抗原抗體的反應(yīng)原理；抗原抗體反應(yīng)的特點。熟悉抗原抗體反應(yīng)的影響因素。了解抗原抗體反應(yīng)的類型。教學(xué)內(nèi)容1?抗原抗體反應(yīng)的原理抗原決定簇與抗體超變區(qū)分子；抗原抗體結(jié)合力；親和力與親合力；親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。.抗原抗體反應(yīng)特點特異性；比例性；可逆性；階段性。.抗原抗體反應(yīng)的影響因素反應(yīng)物自身因素；環(huán)境因素：電解質(zhì)、酸堿度及溫度。.抗原抗體反應(yīng)的類型凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)、標(biāo)記免疫反應(yīng)等。免疫原和抗血清的制備目的要求掌握多克隆抗體的概念；免疫血清（即多克隆抗體）的制備流程；免疫佐劑的概念、種類和作用機(jī)制。熟悉顆粒性抗原、可溶性抗原的制備。了解半抗原性免疫原的制備。教學(xué)內(nèi)容.多克隆抗體概念多種抗原表位；多個B細(xì)胞克??；混合抗體。.免疫血清的制備流程免疫原的制備；佐劑的制備；免疫動物的選擇；免疫程序:免疫原的劑量、免疫途徑及免疫間隔時間；試血；采血；抗血清的鑒定和保存：抗血清的純化。.免疫佐劑概念；種類：氫氧化鋁、明礬、弗氏佐劑等；作用機(jī)制。.半抗原性免疫原載體；半抗原與載體的連接方法；半抗原的鑒定。單克隆抗體與基因工程抗體的制備技術(shù)目的要求掌握單克隆抗體的概念及特性；淋巴雜交瘤技術(shù)的基本原理；基因工程抗體的概念。熟悉單克隆抗體的制備流程。了解基因工程抗體的種類。教學(xué)內(nèi)容.單克F?抗體的概念單一表位；單個B細(xì)胞克??；均一抗體..單克隆抗體的特性高度特異性；高度均一性；弱凝集反應(yīng)和不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)；對環(huán)境敏感性..雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的原理親本細(xì)胞的選擇；細(xì)胞的融合；選擇性培養(yǎng)基的篩選;克隆化培養(yǎng)..單克隆抗體的制備流程抗原提純和動物免疫；制備脾細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞制備；細(xì)胞融合；飼養(yǎng)細(xì)胞制備；雜交瘤細(xì)胞篩選；陽性細(xì)胞克隆化；克隆擴(kuò)大再生產(chǎn)；收集抗體；單抗的純化及鑒定；細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇。.基因工程抗體概念;常見類型：人源化抗體、小分子抗體、抗體融合蛋白、雙特異性抗體及噬菌體抗體庫技術(shù)。凝集反應(yīng)目的要求掌握凝集反應(yīng)的原理、特點；常見的直接凝集反應(yīng)；間接凝集反應(yīng)的分類及常見試驗。熟悉抗球蛋白試驗類型、原理及應(yīng)用。了解冷凝集試驗。教學(xué)內(nèi)容.凝集反應(yīng)原理；特點。.凝集反應(yīng)的分類直接凝集反應(yīng)：玻片凝集試驗（原理及應(yīng)用），試管凝集試驗（原理及應(yīng)用）；間接凝集反應(yīng)：正向間接凝集試驗、反向間接凝集試驗、間接凝集抑制試驗及反向間接凝集抵制。.凝集反應(yīng)的分類膠乳凝集試驗：原理及應(yīng)用：血凝試驗。.抗球蛋白試驗分類；原理；應(yīng)用。沉淀反應(yīng)目的要求掌握沉淀反應(yīng)的概念、分類及特點；免疫濁度原理、評價及應(yīng)用；免疫電泳技術(shù)的原理、評價及應(yīng)用。熟悉凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng)的原理、評價及應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容.沉淀反應(yīng)概念；分類：液體內(nèi)沉淀試驗（絮狀沉淀試驗、免疫濁度測定），凝膠內(nèi)沉淀試驗（單向擴(kuò)散試驗、雙向擴(kuò)散試驗），免疫電泳技術(shù)（對流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳及免疫固定電泳）；特點。.免疫濁度測定原理；分類：透射免疫比濁法、散射免疫比濁法、免疫膠乳比濁法;影響因素；臨床應(yīng)用。.免疫電泳技術(shù)對流免疫電泳：原理，操作要點及應(yīng)用；火箭免疫電泳：原理，操作要點及應(yīng)用；免疫電泳：原理，操作要點及應(yīng)用：免疫固定電泳:原理，操作要點及應(yīng)用..凝膠內(nèi)沉淀試驗單向擴(kuò)散試驗：原理，操作要點及應(yīng)用；雙向擴(kuò)散試驗：原理，操作要點及應(yīng)用。補(bǔ)體檢測及應(yīng)用目的要求掌握補(bǔ)體結(jié)合試驗；血清總補(bǔ)體溶血活性測定試驗。熟悉單個補(bǔ)體成分的測定；補(bǔ)體旁路途徑溶血活性測定試驗。了解補(bǔ)體系統(tǒng)概述。教學(xué)內(nèi)容.概述補(bǔ)體成分的含量與理化特性：補(bǔ)體成分的含量，補(bǔ)體的理化特性；補(bǔ)體的活化途徑。.補(bǔ)體總活性測定（CH50）原理；方法；評價；應(yīng)用。.補(bǔ)體旁路途徑溶血活性測定原理；方法；評價；應(yīng)用。.補(bǔ)體結(jié)合試驗實驗原理；實試驗方法：試劑準(zhǔn)備，正式試驗；方法評價。.單個補(bǔ)體成分的測定免疫溶血法：原理，方法，評價；免疫化學(xué)法：常用指標(biāo)，常用檢測方法。放射免疫技術(shù)目的要求掌握放射免疫技術(shù)的基本類型；放射免疫分析；免疫放射分析；IRMA與RIA的比較。熟悉常用的放射性核素；免疫復(fù)合物與游離抗原的分離。了解放射免疫分析技術(shù)的應(yīng)用；放射性核素標(biāo)記物的制備、純化及鑒定。教學(xué)內(nèi)容1．概述常用的放射性核素；放射性核素標(biāo)記物的制備：類型及特點；放射性核素標(biāo)記物的純化及鑒定；免疫復(fù)合物與游離抗原的分離：活性碳吸附法，PEG沉淀法，雙抗體法，PR試劑法.放射免疫分析基本原理；技術(shù)要點：抗原抗體反應(yīng)，B和F的分離，放射性測量;數(shù)據(jù)處理：方法評價。.免疫放射分析基本原理：單位點出乂A，雙位點IRMA；技術(shù)要點；方法評價。.IRMA與RIA的比較標(biāo)記對象；反應(yīng)速率；反應(yīng)方式；特異性等。.放射免疫分析技術(shù)的應(yīng)用。熒光免疫技術(shù)目的要求掌握熒光物質(zhì)的類型及特點；熒光抗體技術(shù)。熟悉熒光的基本知識；時間分辨熒光免疫測定技術(shù)。了解熒光標(biāo)記物的制備、鑒定及保存。教學(xué)內(nèi)容.概述熒光的基本知識：熒光，熒光效率，熒光壽命，熒光淬滅；熒光物質(zhì)：FITC,RB200,TRITC,PE等；熒光標(biāo)記物的制備：標(biāo)記方法，標(biāo)記物的純化、鑒定及保存。.熒光抗體技術(shù)標(biāo)本的制作；熒光抗體染色：直接法，間接法，雙標(biāo)記法；熒光顯微鏡檢查：熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)（光源，濾光片，光路，聚光器，鏡頭等）；結(jié)果判斷;臨床應(yīng)用。.時間分辨熒光免疫測定基本原理；技術(shù)類型；方法評價；臨床應(yīng)用。酶免疫技術(shù)目的要求掌握酶免疫技術(shù)的原理及特點；酶聯(lián)免疫吸附試驗的基本原理、類型及原理、操作要點。熟悉酶免疫技術(shù)的分類；ELISA的常用試劑。了解酶標(biāo)記物的制備及鑒定。教學(xué)內(nèi)容.酶免疫技術(shù)概述原理；特點；技術(shù)類型。.ELISA的常用試劑酶和酶作用底物：酶的要求，常用的酶，常用的底物；酶標(biāo)記抗體或抗原（結(jié)合物）：制備、純化及鑒定；固相載體：固相載體的要求,固相載體的種類和選擇，包被與封閉。3．酶免疫技術(shù)的分類酶免疫測定技術(shù)與酶免疫組織化學(xué)技術(shù)；均相酶免疫測定與異相酶免疫測定。4.酶聯(lián)免疫吸附試驗基本原理；方法類型及反應(yīng)原理：夾心法(兩步法，雙位點一步法)，間接法，競爭法，捕獲法等；技術(shù)要點：加樣，溫育，洗板，顯色，終止，結(jié)果判斷?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)目的要求掌握化學(xué)發(fā)光劑、化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型及原理；熟悉化學(xué)發(fā)光免疫分析的臨床應(yīng)用；了解發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)。教學(xué)內(nèi)容.概述化學(xué)發(fā)光；化學(xué)發(fā)光效率。.化學(xué)發(fā)光劑和標(biāo)記技術(shù)化學(xué)發(fā)光劑：直接化學(xué)發(fā)光劑，酶促反應(yīng)發(fā)光劑；發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù)：常用標(biāo)記方法，影響標(biāo)記的因素。.化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型直接化學(xué)發(fā)光免疫分析；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析：辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析，堿性磷酸酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析；電化學(xué)發(fā)光免疫分析；臨床應(yīng)用。其他標(biāo)記技術(shù)目的要求掌握生物素-親和素系統(tǒng)的特點、類型及原理；免疫印跡試驗；斑點酶免疫吸附試驗；酶聯(lián)免疫斑點試驗。熟悉生物素-親和素系統(tǒng)的應(yīng)用；膜載體免疫測定的種類；常用的固相膜。了解生物素的理化性質(zhì)與標(biāo)記；親和素、鏈霉親和素的理化性質(zhì)與標(biāo)記；固相膜免疫測定技術(shù)的評價。教學(xué)內(nèi)容.生物素及活化生物素理化性質(zhì)；標(biāo)記。.親和素、鏈霉親和素理化性質(zhì)；標(biāo)記。.生物素-親和素系統(tǒng)的特點靈敏度，特異性，穩(wěn)定性，適應(yīng)性，其他。.生物素-親和素系統(tǒng)的類型及原理BAB法，ABC法，BA法.生物素-親和素系統(tǒng)在各檢測技術(shù)中的應(yīng)用在ELISA中的應(yīng)用；在均相酶免疫測定中的應(yīng)用；在熒光免疫技術(shù)中的應(yīng)用；在放射免疫測定中的應(yīng)用；在分子生物學(xué)中的應(yīng)用。.概述常用的固相膜；固相膜測定技術(shù)的評價。.膜載體免疫測定的種類斑點酶免疫吸附試驗；免疫印跡試驗；酶聯(lián)免疫斑點試驗。.斑點酶免疫吸附試驗原理；技術(shù)要點；應(yīng)用;評價。.免疫印跡試驗原理；技術(shù)要點；臨床應(yīng)用;評價；注意事項。.酶聯(lián)免疫斑點試驗(ELISPOT)原理；技術(shù)要點；評價；應(yīng)用。免疫細(xì)胞分離及檢測目的要求.掌握免疫細(xì)胞的分離技術(shù)；掌握T細(xì)胞數(shù)量檢測及臨床意義；掌握T細(xì)胞功能檢測;掌握B細(xì)胞數(shù)量檢測及臨床意義；掌握B細(xì)胞功能檢測及臨床意義..熟悉淋巴細(xì)胞表面主要標(biāo)志；NK細(xì)胞數(shù)量及功能檢測..了解中性粒細(xì)胞數(shù)量及功能檢測；吞噬細(xì)胞數(shù)量及功能檢測．教學(xué)內(nèi)容免疫細(xì)胞的分離外周血單個核細(xì)胞分離：原理，操作，影響因素；淋巴細(xì)胞的分離；T/B細(xì)胞的分離；T細(xì)胞亞群的分離：親和板結(jié)合分離法，磁性微球分離法，熒光激活細(xì)胞分離儀（FACS）分離法.T細(xì)胞數(shù)量及臨床意義數(shù)量檢測：間接免疫熒光法，免疫細(xì)胞化學(xué)法，￡花環(huán)形成試驗功能檢測；臨床意義.T細(xì)胞功能檢測淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗；淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒性檢測；相關(guān)細(xì)胞因子的檢測；"型超敏反應(yīng)皮試.B細(xì)胞數(shù)量及臨床意義數(shù)量檢測：花環(huán)技術(shù)，免疫熒光法檢測sm?:臨床意義.B細(xì)胞功能檢測B細(xì)胞增殖能力的試驗；溶血空斑試驗；ELISPOT:體內(nèi)試驗.NK細(xì)胞檢測數(shù)量檢測；功能檢測：趨化功能，吞噬功能，滅菌功能.中性粒細(xì)胞檢測數(shù)量檢測；功能檢測：趨化功能，吞噬功能，滅菌功能：NBT還原試驗.吞噬細(xì)胞檢測數(shù)量檢測；功能檢測：趨化功能，吞噬功能，滅菌功能.免疫檢驗的質(zhì)量控制目的要求掌握實驗方法診斷效率評價；免疫檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制。熟悉質(zhì)控的相關(guān)基本概念；免疫檢測的室間質(zhì)量評價。教學(xué)內(nèi)容．質(zhì)控的相關(guān)基本概念質(zhì)量控制；準(zhǔn)確度；回收試驗；精密度；重復(fù)性試驗；正態(tài)分布。.實驗方法診斷效率評價敏感性;特異性;假陽性;假陰性率;預(yù)測值。.免疫檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制測定前的質(zhì)量控制：室驗室的環(huán)境設(shè)施及設(shè)備，理想的試劑和方法，人員培訓(xùn)；測定中的質(zhì)量控制：質(zhì)控品，標(biāo)本的收集及處理，標(biāo)準(zhǔn)化操作;統(tǒng)計學(xué)質(zhì)量控制:基線測定，LeveyJennings質(zhì)控圖法，“即該法”質(zhì)控法;失控處理及分析。.免疫檢驗的室間質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量評價的意義；室間質(zhì)量評價的程序設(shè)計和運(yùn)作;室間質(zhì)量評價的方式；參評實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作程序；評分方式。超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測目的要求.掌握I型超敏反應(yīng)的實驗室檢測；11型超敏反應(yīng)的實驗室檢測；111型超敏反應(yīng)的實驗室檢測；"型超敏反應(yīng)的實驗室檢測..熟悉I型超敏反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制及常見疾病；II型超敏反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制及常見疾?。簧叫统舴磻?yīng)的發(fā)病機(jī)制及常見疾?。?型超敏反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制及常見疾病測.教學(xué)內(nèi)容1.I型超敏反應(yīng)：發(fā)生機(jī)理；常見疾病；實驗室檢測:I型超敏反應(yīng)皮膚試驗、血清IgE檢測、相關(guān)細(xì)胞檢測.2?∏型超敏反應(yīng)：發(fā)生機(jī)理：常見疾??；實驗室檢測：抗血細(xì)胞抗體檢測3.111型超敏反應(yīng)：發(fā)生機(jī)理；常見疾??；實驗室檢測：循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測（聚乙二醇法、補(bǔ)體相關(guān)測定法、抗球蛋白測定法、細(xì)胞技術(shù)測定法）4.W型超敏反應(yīng)：發(fā)生機(jī)理：常見疾?。簩嶒炇覚z測："型超敏反應(yīng)皮膚試驗.自身免疫性疾病及其免疫檢測目的要求掌握常見自身抗體檢測及臨床意義；自身抗體檢測的應(yīng)用原則；常見的自身免疫性疾病的免疫檢測。熟悉自身免疫性疾病的分類、共同特征及常見自身免疫性疾??；自身免疫性疾病的相關(guān)實驗檢測。3．了解自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制和免疫損傷機(jī)制。教學(xué)內(nèi)容1．自身免疫性疾病概述分類；共同特征；常見的自身免疫性疾病。2．自身免疫病的發(fā)病機(jī)制和免疫損傷機(jī)制抗原因素；免疫調(diào)節(jié)因素；遺傳因素；凋亡因素；超敏反應(yīng)。.常見自身抗體類風(fēng)濕因子及相關(guān)抗體：檢測及臨床意義;抗核抗體：檢測方法、臨床意義；抗角蛋白抗體：檢測及臨床意義;抗dsDNA抗體：檢測方法、臨床意義；抗ENA抗體：檢測方法、臨床意義；其他自身抗體。.自身抗體檢測的應(yīng)用原則篩選實驗；確診實驗。.自身免疫性疾病的相關(guān)實驗檢測球蛋白檢測；補(bǔ)體檢測；淋巴細(xì)胞檢測；細(xì)胞因子檢測；循環(huán)免疫復(fù)合物檢測等。.常見自身免疫性疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡：發(fā)病機(jī)制，免疫檢測；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎:發(fā)病機(jī)制，免疫檢測。免疫增殖性疾病及其免疫檢測目的要求掌握多發(fā)性骨髓瘤；單克隆免疫球蛋白常用的檢測方法及檢測原則。熟悉免疫增殖性疾病的概念；其他常見免疫球蛋白增殖病。了解免疫增殖性疾病的分類；免疫增殖性疾病的免疫損傷機(jī)制。教學(xué)內(nèi)容免疫球蛋白異常增殖性疾病概念；分類；免疫損傷機(jī)制：漿細(xì)胞異常增殖；正常體液免疫抑制；免疫球蛋白異常增殖所造成的病理損傷，溶骨性病變。免疫球蛋白異常增殖性疾病的免疫損傷機(jī)制。.常見免疫球蛋白增殖病多發(fā)性骨髓瘤;巨球蛋白血癥；重鏈?。惠p鏈?。涣夹詥慰寺”N球蛋白血癥。.單克隆免疫球蛋白的檢測血清區(qū)帶電泳；免疫電泳；免疫固定電泳；血清免疫球蛋白定量。.單克隆免疫球蛋白的檢測原則免疫缺陷性疾病及其免疫檢測目的要求掌握免疫缺陷病的特征；原發(fā)性免疫缺陷病的免疫學(xué)檢測；獲得性免疫缺陷病的檢測。熟悉免疫缺陷病的分類；獲得性免疫缺陷綜合征概述。了解免疫缺陷病的發(fā)病因素。教學(xué)內(nèi)容.概述免疫缺陷病的分類：原發(fā)性免疫缺陷病、繼發(fā)性免疫缺陷??；免疫缺陷病的拄征：易感染、易伴發(fā)惡性腫瘤、易伴發(fā)自身免疫病。.原發(fā)性免疫缺陷病原發(fā)性B細(xì)胞缺陷：X性連鎖無丙種球蛋白血癥，X性聯(lián)高IgM綜合征等；原發(fā)性T細(xì)胞缺陷：先天性胸腺發(fā)育不全綜合癥等；重癥聯(lián)合免疫缺陷：性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷等；原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷：慢性肉芽腫病等；原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷：遺傳性血管神經(jīng)性水腫等。．獲得性免疫缺陷綜合征概述病原學(xué)；致病機(jī)制；臨床特點；免疫學(xué)特征。.原發(fā)性免疫缺陷病的免疫學(xué)檢測B細(xì)胞缺陷病的檢測：血清Ig測定，同種血型凝集素的測定，特異性抗體產(chǎn)生能力測定，B細(xì)胞表面膜免疫球蛋白（SmIg）的檢測，CD抗原檢測；T細(xì)胞缺陷病的檢測:T細(xì)胞功能檢測，T細(xì)胞數(shù)量及其亞群檢測；吞噬細(xì)胞免疫缺陷病的檢測：白細(xì)胞計數(shù)，趨化功能檢測，吞噬和殺傷試驗，NBT還原試驗，黏附分子檢測;補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病的檢測：總補(bǔ)體活性，單個組分的測定；.獲得性免疫缺陷病的檢測HIV抗原檢測；HIV抗體檢測：初篩試驗、確認(rèn)試驗；CD4+T細(xì)胞計數(shù)；其他檢測。移植免疫及其免疫檢測目的要求.掌握組織配型。.熟悉排斥反應(yīng)的種類及發(fā)生機(jī)制。.了解排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測；排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療。教學(xué)內(nèi)容排斥反應(yīng)的種類及發(fā)生機(jī)制超急性排斥反應(yīng)；急性排斥反應(yīng)；慢性排斥反應(yīng)；移植物抗宿主反應(yīng)。HLA分型血清學(xué)分型法；細(xì)胞學(xué)分型法：單向MLC,雙向MLC；分子生物學(xué)分型法:RFLP與PCR-RFLP分型法，PCR-SSO分型法，PCR-SSP分型法，PCR-SSCP分型法，SBT分型法。排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療組織配型：HLA配型，HLA交叉配型與預(yù)存抗體的檢測，群體反應(yīng)性抗體的檢測；移植物與受體的預(yù)處理；免疫抑制措施：免疫抑制劑的應(yīng)用，對移植抗原特異性免疫耐受誘導(dǎo)。排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測的臨床意義；尿微量蛋白檢測的臨床意義；急性時相反應(yīng)物質(zhì)檢測的臨床意義；免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測的臨床意義。實驗一間接膠乳凝集試驗（抗“0”及RF檢測）目的要求.掌握膠乳凝集試驗試驗（抗“O”及RF）的原理、操作過程及結(jié)果判斷。.熟悉抗“O”及RF的臨床意義。.了解影響抗“O”及RF檢測的因素。教學(xué)內(nèi)容.試劑及儀器：抗“O”檢測試劑盒、RF的檢測試劑盒、陽性血清、待測血清。.操作方法：加血清→加診斷試劑一混勻反應(yīng)→結(jié)果判斷。.半定量分析的探討。4．臨床意義。.注意事項。實驗二免疫電泳試驗?zāi)康囊?掌握免疫電泳的原理、操作過程及結(jié)果判斷。.熟悉免疫電泳的臨床應(yīng)用。.了解免疫電泳的操作注意事項。教學(xué)內(nèi)容.試劑及儀器：0.05mol∕LpH8.6巴比妥緩沖液；瓊脂粉；兔抗人全血清；正常人血清和白蛋白溶液；電泳儀；電泳槽；37℃溫箱等。.操作方法:制備瓊脂板→加樣→電泳一雙擴(kuò)散。.結(jié)果判斷：沉淀線的數(shù)量、位置和形狀的觀察。.注意事項。.應(yīng)用與評價。實驗三熒光抗體顯微技術(shù)實驗?zāi)康囊?掌握間接免疫熒光法檢測ANA原理及操作過程。.熟悉間接免疫熒光法檢測ANA的結(jié)果判斷。.了解免疫熒光技術(shù)的常見影響因素。教學(xué)內(nèi)容.抗原片的制備：剖取小鼠肝一剪塊一印片一晾干。.操作方法:血清滴加在肝印片上，37℃、30min-沖洗一滴加熒光抗體，37℃、30min一沖洗一甘油封片一熒光顯微鏡鏡檢.結(jié)果判斷熒光強(qiáng)度及核型的觀察。.注意事項。實驗四酶聯(lián)免疫吸附實驗1目的要求.掌握酶標(biāo)儀的軟件操作和洗板機(jī)的使用。.熟悉乙肝兩對半（ELISA方法）測定的軟件設(shè)置；洗板程序的設(shè)置。.了解洗板機(jī)的維護(hù)方法。教學(xué)內(nèi)容.酶標(biāo)儀的軟件操作:啟動軟件一配置孔位一填寫信息一啟動儀器一計算一保存一打印報告一退出。.洗板機(jī)常用技術(shù)指標(biāo)：殘留量，加液量，清洗頭等。.洗板機(jī)的使用:開機(jī)一沖洗管路一程序設(shè)置一啟動。.乙肝兩對半（ELISA方法）測定的軟件設(shè)置。實驗五酶聯(lián)免疫吸附實驗2目的要求1．掌握乙肝兩對半的檢測原理、操作過程及結(jié)果評判。2．熟悉影響乙肝兩對半檢測的因素。3．了解乙肝兩對半的臨床意義。教學(xué)內(nèi)容1．試劑和儀器：乙肝兩對半檢測試劑盒；酶標(biāo)儀；洗板機(jī)。.操作過程：分別按各項檢測說明書對待檢血清檢測。.結(jié)果評判：計算COV值，判定陰陽性：綜合5項檢測結(jié)果，對測定樣本患者作出實驗診斷。4．操作中的注意事項。5．實驗診斷的臨床意義：陰性、小三陽、大三陽、疫苗接種者等。實驗六斑點免疫印跡試驗?zāi)康囊?．掌握斑點免疫印跡的原理及操作過程。2．熟悉斑點免疫印跡的常見影響因素。3．了解斑點免疫印跡的臨床應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容.主要試劑：抗原、酶標(biāo)抗體、DBA顯色液、封閉液、洗滌液等。.實驗操作:NC膜預(yù)處理→抗原包被→封閉→加樣→孵育→洗滌→加酶標(biāo)二抗→孵育→洗滌→加底物→孵育→顯色→結(jié)果觀察。3．結(jié)果判斷：陰性:無色；陽性:明顯棕色斑點。實驗七自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀見習(xí)目的要求．掌握自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測原理。．熟悉自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的操作過程及結(jié)果分析。．了解自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀日常維護(hù)及常見故障排除。教學(xué)內(nèi)容.自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀原理介紹。.自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的操作過程及結(jié)果分析。.自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的臨床應(yīng)用。.自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的日常維護(hù)及常見故障排除。實驗八補(bǔ)體檢測試驗?zāi)康囊?掌握掌握補(bǔ)體檢測原理及操作過程。.熟悉補(bǔ)體檢測的常見影響因素。.了解補(bǔ)體檢測的臨床應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容.試劑和儀器：試劑1：Tris緩沖液、PEG6000；試劑2：羊抗人C3抗血清.援韭過程：分別按各項檢測說明書對待檢血清檢測。3．操作中的注意事項。4．補(bǔ)體檢測的臨床應(yīng)用。實驗九外周血單個核細(xì)胞分離目的要求1．掌握外周單個核細(xì)胞分離的原理和方法。2．熟悉該實驗的操作過程及影響因素。教學(xué)內(nèi)容1．淋巴細(xì)胞分離液準(zhǔn)備。.操作步驟:稀釋抗凝血→加入淋巴細(xì)胞分離液面→離心一吸取白膜層細(xì)胞懸液→洗滌細(xì)胞→細(xì)胞計數(shù)及臺盼藍(lán)染色觀察。.結(jié)果判斷：細(xì)胞獲得量，細(xì)胞存活率。.影響因素實驗十免疫印跡法檢測抗ENA目的要求.掌握免疫印跡實驗檢測ENA的原理及操作過程。.熟悉免疫印跡實驗檢測ENA的結(jié)果分析。.了解免疫印跡實驗檢測ENA常見影響因素及臨床意義。教學(xué)內(nèi)容.試劑及儀器：ENA多肽抗體譜檢測試劑盒；37。C孵箱。.操作步驟:血清加入印跡膜條，37℃、30min→洗滌→加入酶標(biāo)抗體，37℃、30min一加入底物，顯色，終止。.結(jié)果判斷:同標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較，確定陽性自身抗體。.臨床意義分析。.注意事項。實驗十^一PEG沉淀法檢測循環(huán)免疫復(fù)合物目的要求.掌握PEG法檢測循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)的原理、操作過程、結(jié)果判斷及計算方法。.熟悉影響該方法的因素。教學(xué)內(nèi)容.血樣本處理：制作3次凍融血、脂血和溶血標(biāo)本。.操作步驟：加入聚乙二醇及樣品→4。C放置1小時→分光光度計測吸收光。.結(jié)果分析：凍融血、脂血和溶血對CIC測定的影響。實驗十二AIDS病實驗室檢測見習(xí)目的要求.掌握AIDS篩選實驗及確認(rèn)實驗原理。.熟悉AIDS篩選實驗及確認(rèn)實驗操作過程、結(jié)果分析。.了解實驗的影響因素。教學(xué)內(nèi)容LAIDS篩選實驗及確認(rèn)實驗介紹。2.AIDS篩選實驗及確認(rèn)實驗操作過程講解及演示。3．實驗影響因素常用專業(yè)英文詞匯表免疫學(xué)immunology免疫防御immunologicaldefence免疫自穩(wěn)Immunologicalhomeostasis免疫監(jiān)視Immunologicalsurveillance免疫學(xué)檢驗laboratoryimmunology臨床免疫學(xué)Clinicalimmunology免疫應(yīng)答Immunologicalresponse識別階段Recognitionphase活化階段Activationphase效應(yīng)階段EffectphaseT輔助細(xì)胞Thelpcell抗體AntibodyT殺傷細(xì)胞Tkillcell免疫系統(tǒng)Immunesystem骨髓Bonemarrow胸腺thymus巨噬細(xì)胞macrophage再循環(huán)Recirculation歸巢受體Homingreceptor抗原遞呈細(xì)胞Antigenpresentingcells,APC淋巴細(xì)胞lymphocyteT細(xì)胞受體Tcellreceptor,TCR簇分化抗原Clusterofdifferentiation,CD自然殺傷細(xì)胞Naturalkillercells,NK免疫球蛋白Immunogolbin,Ig補(bǔ)體Complement,C細(xì)胞因子Cytokine細(xì)胞粘附因子Celladhesionmolecules,CAM免疫病理學(xué)immunopathlogy移植免疫學(xué)Transplantationimmunology自體移植autograft同種同基因移植Syngrft同種異基因移植allograft異種移植xenograft排斥反應(yīng)rejection腫瘤免疫學(xué)Tumorimmnonology感染免疫學(xué)Infectionimmunology免疫學(xué)檢驗Laboratoryimmunology抗原抗體反應(yīng)Antigen-antibodyreaction疏水結(jié)合力Hydrophobicinteractions親和力affinity親合力avidity特異性specificity交叉反應(yīng)Crossreaction可逆性reversibility比例性proportionality疏水作用力hydrophobicinteractions等價帶equivalencezone帶現(xiàn)象Zonephenomenon前帶przone后帶postxone標(biāo)記免疫技術(shù)Immunolabellingtechnique免疫原immunogen免疫佐劑immunoadjuvant抗血清antiserum多克隆抗體Polyclonalantibody,pcAb載體carrier聚乙二醇Polyethyleneglycol,PEG單克隆抗體Monoclonalantibody,McAb有限稀釋法Limitingdilution人源化抗體humanizedantibody,HAb基因工程抗體Geneticengineeringantibody可變區(qū)片段Fragmentofvariable,Fv凝集反應(yīng)Agglutinationteaction直接凝集反應(yīng)Directagglutinationteaction間接凝集反應(yīng)indirectagglutinationteaction血凝試驗Hemaagglutintiontest膠乳凝集試驗Latexagglutinationtest抗球蛋白試驗Antiglobulintest沉淀反應(yīng)Precipitationreaction單向擴(kuò)散試驗singlediffusiontest對流免疫電泳counterimmunoelectroporesis,CIEP火箭免疫電rocketimmunoelectrophoresis,交叉免疫電crossedimmunoelectrophoresis,泳RIE泳CIEP免疫濁度測定immunoturbidimetry免疫電泳技術(shù)Immunoelectrophoresistechnique免疫電泳Immunoelectrophoresis,IEP免疫固定電泳ImmunofixationalelectrophoresisIFE免疫膠乳比濁法Immunolatexturbidimetry速率散射比濁法Ratenephelometry外周血單個核細(xì)胞Peripheralbloodmononuclearcells,PBMC淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化Lymphobasttransformation刺激指數(shù)Stimulatingindex酶聯(lián)免疫斑點試驗Enzyme-linkedimmunospottest,ELISPOT細(xì)胞因子cytokine細(xì)胞粘附因子Celladhesionmolecule放射免疫分析radioimmunoassay,RIA免疫放射分析immunoradiometricassay,IRMA放射配體結(jié)合分析radioligandbindingassay，RBA放射受體分析radioreceptorassay,RRA高劑量鉤狀效應(yīng)highdosehookeffect異硫氰酸熒光素fluoresceinisothiocyanate,FITC熒光fluorescence熒光抗體技術(shù)fluorescenceantibodytechnique,FAT熒光免疫測定fluorescenceimmunoassay熒光免疫組fluorescence織化學(xué)技術(shù)immunohistochemistrytechnique鉤狀效應(yīng)hookeffect固相酶免疫測定solidphaseenzymeimmunoassay,SPEIA堿性磷酸酶alkalinephosphatase,Ap克隆酶供體免疫分析clonedenzymedonorimmunoassay,CEDIA辣根過氧horseradishperoxidase,HPR酶放大免疫enzyme-multiplied化物酶測定技術(shù)immunoassaytechcique,EMIT酶免疫吸附試驗enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA酶免疫技術(shù)enzymeimmunoassay,EIA質(zhì)量保證Qualityassurance,QA室內(nèi)質(zhì)量控制Internalqualitycontrol,IQC室間質(zhì)量評價Externalqualityassessment,EQA重復(fù)性條件Repeatabilitycomdition均值run標(biāo)準(zhǔn)差Standarddeviation,SD變異系數(shù)Coefficientofvariation,CV最佳條件下的變異Optimalconditionsvariance,OCV常規(guī)條件下的變異Routineconditionvariation,RCV國際標(biāo)準(zhǔn)品Internationalstandard,IS速發(fā)性超敏反應(yīng)Immediatehypersensitivity放射變應(yīng)原吸附試驗Radioallergosorbenttest,RAST遲發(fā)型超敏Delayedtypehypersensitivity,自身免疫耐Autoimmune-tolerance反應(yīng)DTH受自身免疫autoimmunity自身抗體autoantibody自身免疫性Autoimmunedisease,AID系統(tǒng)性紅斑Systemiclupuserythematosus,疾病狼瘡SLE類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎Rheumatoidarthritis,RA抗核抗體Antinuclearantibody,ANA間接免疫熒Indirectimmunofluorescence,可提取核抗Extractablenuclearantigens光法IIF原類風(fēng)濕因子Rheumatoidfactor,RF抗角蛋白抗體Antikeratinantibody,AKA免疫復(fù)合物Immunecomplex,IC循環(huán)免疫復(fù)合物Circulatingimmunecomplex,CIC電化學(xué)發(fā)光免疫分析electrochemiluminescenceimmunoassay,ECLIA化學(xué)發(fā)光chemiluminescence化學(xué)發(fā)光酶chemiluminescenceenzyme化學(xué)發(fā)光免chemiluminescence免疫分析immunoassay,CLEIA疫分析immunoassay,CLIA魯米諾luminol生物發(fā)光bioluminescence床邊檢驗pointofcaretest，POCT斑點金免疫滲濾試驗dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA斑點酶免dotenzymelinked放射免疫沉radioimmunoprecipitation疫吸附試驗immunosorbentassay,Dot-ELISA淀試驗assay,RIPA固相膜免solidphasemembrane-based金免疫層析goldimmunochromatography疫測定immunoassay試驗assay,GICA金免疫滲濾試驗goldimmuno