毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦的含量

毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦的含量【摘要】目的建立測定消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦含量的方法。方法采用毛細管氣相色譜法。色譜柱為PEG-20M石英毛細管柱(30m×mm×μm)；載氣為氮氣；正辛醇為內標；柱溫160℃；氫火焰離子檢測器；檢測器和氣化室的溫度均為250℃；N2流速3ml/min；H2流速30ml/min；空氣流速300ml/min；尾吹氣N2流速30ml/min。結果樟腦、薄荷腦和正辛醇能達到良好分離；樟腦的線性范圍～μg/ml，薄荷腦的線性范圍～μg/ml；樟腦的回收率%～%，薄荷腦的回收率%～%。結論方法簡便、準確、專屬性強、重復性好，可用于消腫止痛酊的質量控制。

【關鍵詞】毛細管氣相色譜法；消腫止痛酊；樟腦；薄荷腦

Abstract：ObjectiveToestablishamethodforGCdeterminationofCamphorandMentholinXiaozhongzhitongTincture.MethodsCapillaryGCwasadopted.Theinternalstandardmethodwasemployedwithoctanolasinternalstandard.TheGCsystemconsistedofaflameionizationdetector,PEG-20Mcapillarycolumn(30m×mm×μm),nitrogenasthecarriergas;oventemperature160℃,detectortemperature250℃,N2:3ml/min,H2:30ml/min,Air:300ml/min，madeup(N2):30ml/andMentholcouldbeseparatedwellunderthechromatographicconditions.ThelinearrangeofCamphorwas～μg/ml(r=2),andthelinearrangeoftheMentholwas～μg/ml(r=5);therecoveryofCamphorwas%～%,andtherecoveryofMentholwas%～%.ConclusionThemethodissimple,sensitive,accurateandhasgoodrepeatability,anditcanbeusedtocontrolthequalityofXiaozhongzhitongTincture.

Keywords：CapillaryGaschromatography;XiaozhongzhitongTincture;Camphor;Menthol

消腫止痛酊是由木香、防風、細辛、五加皮、沉香、樟腦、薄荷腦、兩面針等藥材經過適宜加工制成的廣西民族藥，具有舒筋活絡、消腫止痛之功效。其中的樟腦、薄荷腦能選擇性地刺激人體皮膚或黏膜的冷覺感受器，引起皮膚黏膜血管收縮從而產生消炎、止痛、止癢等作用。樟腦和薄荷腦均為易揮發(fā)組分，含量測定多用氣相色譜法［1，2］，也有采用分光光度法［3］和旋光光度法［4］。消腫止痛酊系易串味藥物，目前尚未見消腫止痛酊質量控制方面的相關報道。為了更好地控制產品質量，本文建立了毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦的含量。樟腦和薄荷腦化學結構式見圖1。

1儀器與試劑

SP-2100氣相色譜儀；KQ-100型超聲波清洗器；電子天平。樟腦對照品；薄荷腦對照品；消腫止痛酊；實驗用水為二次蒸餾水；其余試劑均為分析純。

2方法及結果

內標物溶液的配制

精密量取正辛醇ml，置于50ml的容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

對照品溶液的配制

精密稱取樟腦對照品mg，薄荷腦對照品mg，于25ml的容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。精密吸取該儲備液ml，內標物溶液ml，置于10ml的容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

供試品溶液的配制

精密量取用微孔濾膜過濾后的樣品ml，內標物溶液ml，置于10ml容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

色譜條件

采用SP-2100氣相色譜儀。PEG-20M毛細管色譜柱；載氣為氮氣；氫火焰離子化檢測器；柱溫160℃；檢測器溫度250℃；氣化室溫度250℃；N2流速3ml/min；H2流速30ml/min；Air流速300ml/min；尾吹氣N2流速30ml/min；進樣量為1μl；內標物為正辛醇。結果見圖2～3。

工作曲線的繪制

精密量取對照品儲備液，，，，，ml，分別置于10ml容量瓶中，各加入內標物溶液ml，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，從而配制成一系列濃度的標準溶液。按上述色譜條件進行測定，分別以樟腦和薄荷腦的濃度為橫坐標，以相應峰面積比值為縱坐標，將所得數據進行線性回歸。回歸曲線方程分別為：

樟腦：Y=2,r=2

薄荷腦：Y=8,r=5

樟腦在～μg/ml線性良好；薄荷腦在～μg/ml線性良好。

精密度實驗

對同一對照品溶液，連續(xù)進樣6次，按照上述色譜條件進行測定，分別求出樟腦和薄荷腦峰面積與內標物峰面積的比值。樟腦的RSD為%；薄荷腦的RSD為%。實驗表明，精密度良好。

重復性實驗

取同一批供試品，按“”項下分別配制6份。按照上述色譜條件進行測定，分別求出樟腦和薄荷腦的含量。結果樟腦的RSD為%，薄荷腦的RSD為%。實驗表明，重復性良好。

加樣回收率實驗

在已知量的供試品溶液中，精密加入一定量對照品儲備液和內標物溶液，配制成線性范圍內高、中、低3個濃度的溶液。在上述色譜條件下進行測定。結果樟腦的回收率為%～%；薄荷腦的回收率為％～%。結果見表1～2。表1樟腦的加樣回收率表2薄荷腦的加樣回收率

穩(wěn)定性實驗

取同一個供試品溶液，在上述色譜條件下，每隔2h進樣1次，共進樣5次，分別求出樟腦和薄荷腦峰面積與內標物峰面積的比值。結果：樟腦的RSD為%，薄荷腦的RSD為%。實驗表明：供試品溶液在10h內穩(wěn)定。

樣品中樟腦、薄荷腦的含量測定按“”項下方法配制4種批號的供試品溶液，在上述色譜條件下進行測定。結果見表3。表3消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦的含量測定結果

3討論

酊劑中乙醇含量的測定

酊劑的制備過程中所用溶劑為乙醇，由于制劑中乙醇含量的高低對于制劑中有效成份的含量、所含雜質的類型和數量以及制劑的穩(wěn)定性等都有影響，所以《中國藥典》規(guī)定對該類制劑需做乙醇含量的檢查［5］。本實驗在下述色譜條件下對消腫止痛酊中的乙醇含量進行了測定，色譜條件：程序升溫，初始溫度80℃，以5℃/min升溫至110℃；氫焰離子化檢測器；檢測器溫度200℃；氣化室溫度200℃；載氣為氮氣；進樣量為1μl；內標法測定；內標物為正丙醇。結果，測得樣品中的乙醇含量為％，符合其質量標準的規(guī)定。

內標物的選擇

本實驗分別選用了萘、正辛醇、冰片、水楊酸甲酯作為內標物，綜合他們各自的分子量、沸點及出峰情況等因素，最后選定正辛醇為最佳的內標物，且供試品溶液在正辛醇峰的位置上沒有出現色譜峰，不存在干擾。

樣品溶解性的考察

由于內標物正辛醇不溶于水，不能用水作為稀釋溶劑；且用無水乙醇作溶劑稀釋樣品時，發(fā)現溶液渾濁，結合樣品中乙醇的含量為%，所以本實驗采用50%乙醇作為稀釋溶劑。結果樣品澄清透明，而且內標物正辛醇可以與50%乙醇互溶。

色譜條件的選擇

柱溫是色譜峰分離的一個重要參數，直接影響分離效果和分析速度［6］。文獻中測定樟腦和薄荷腦的含量多采用程序升溫的方法［7］。本實驗曾比較了程序升溫110～180℃，升溫速率分別為5，10，15，20，30℃/min，以及恒溫120，140，160，180℃等測定條件，結果發(fā)現采用程序升溫的方法，色譜峰拖尾因子高，重復性差；而采用恒溫160℃時，可以達到各色譜峰基線分離，分離度大于，且分析時間適中，峰形對稱，重復性高。

本文建立的測定消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦含量的方法，簡便、快速，結果準確、可靠，可用于消腫止痛酊的質量控制。

【參考文獻】

［1］李結瓊.毛細管氣相色譜法測定通竅救心油中樟腦的含量［J］.海峽藥學，2006,18:62.

［2］李國穎.氣相色譜法測定薄荷水(濃)和薄荷油中薄荷腦的含量［J］.廣東藥學院學報，2002,18:191.

［3］方維軍,陳堅,吳芳.雙波長分光光度法測定復方薄荷洗劑的含量［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2001,21(12):727.

［4］張正康.旋光光度法測定薄荷腦的成