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第一篇第四章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器詳解演示文稿本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第1頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分優(yōu)選第一篇第四章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第2頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法貼壁培養(yǎng)(單層細(xì)胞培養(yǎng))

分散的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)瓶中很快(幾十分鐘至幾小時(shí))就貼附在瓶壁上,

稱(chēng)為細(xì)胞貼壁,

貼壁后的細(xì)胞形態(tài)形成多態(tài)性,

呈單層生長(zhǎng),

所以此法又叫單層細(xì)胞培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)

細(xì)胞在培養(yǎng)器中自由懸浮生長(zhǎng)的過(guò)程,不貼壁,主要用于懸浮型細(xì)胞培養(yǎng),如淋巴細(xì)和腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第3頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分固定化培養(yǎng)一種包埋培養(yǎng)。對(duì)兩類(lèi)細(xì)胞都適用,細(xì)胞生長(zhǎng)密度高,抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)。懸浮型細(xì)胞常用海藻酸鈣包埋,貼壁型細(xì)胞常用膠原包埋。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第4頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可生產(chǎn)的生物制品1.病毒疫苗:口蹄疫(FMD)、狂犬疫苗等2.非抗體免疫調(diào)節(jié)劑:干擾素(IFN)、白介素(IL)等3.多肽生長(zhǎng)因子:神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)4.酶:組織血纖維溶酶原激活劑(t-PA)5.激素:紅細(xì)胞生成素(EPO)、促黃體生成素(LH)6.病毒殺蟲(chóng)劑7.腫瘤特異性抗原:癌胚抗原(CEA)8.單克隆抗體9.皮膚重植10.細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第5頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品工藝實(shí)例1.組織纖溶酶激活劑生產(chǎn)工藝流程細(xì)胞單層細(xì)胞懸液細(xì)胞培養(yǎng)物培養(yǎng)培養(yǎng)液提取液層析液濃縮液層析液tPA成品分散分離提取層析純化濃縮層析精制凍干2.抗HBsAS的單克隆抗體生產(chǎn)工藝流程培養(yǎng)液雜種細(xì)胞混合物大鼠骨髓瘤+免疫大鼠脾淋巴細(xì)胞融合融合混合物篩選克隆化雜交瘤克隆系種質(zhì)培養(yǎng)細(xì)胞種質(zhì)擴(kuò)大培養(yǎng)分離粗制McAb精制層析液超慮濃縮液凍干McAb精品本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第6頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)1.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,易受微生物污染,培養(yǎng)時(shí)需要抗生素;2.動(dòng)物細(xì)胞較微生物大得多,無(wú)細(xì)胞壁,機(jī)械強(qiáng)度低,適應(yīng)環(huán)境能力差;3.培養(yǎng)過(guò)程需氧量少,且不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌;4.在機(jī)體中,細(xì)胞相互粘連以集群形式存在;5.培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)物分布于細(xì)胞內(nèi)外,成本高,產(chǎn)品價(jià)格昂貴;6.大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),不可套用微生物反應(yīng)的經(jīng)驗(yàn);7.原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第7頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分無(wú)論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞,深層培養(yǎng)的操作方式可分細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式。分批式操作操作簡(jiǎn)單、是最常用的操作方式。分批式培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞的生長(zhǎng)可分為延遲期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期分批式培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第8頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分流加式操作半連續(xù)式操作細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式能夠調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。連續(xù)操作能提高細(xì)胞密度,應(yīng)用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞。灌注培養(yǎng)大大提高細(xì)胞密度,有助于產(chǎn)物的表達(dá)和純化。本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第9頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第10頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第11頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第12頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第13頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第14頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器氣升式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器氣升式培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn):

①?zèng)]有移動(dòng)部件;②完全密封;③便于無(wú)菌操作;④設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單;⑤便于放大生產(chǎn);⑥氧的轉(zhuǎn)換率高。本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第15頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器細(xì)胞培養(yǎng)流程本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第16頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第17頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器優(yōu)點(diǎn):

①培養(yǎng)體積小,細(xì)胞高密度生長(zhǎng);②有濃縮產(chǎn)品的功能;③產(chǎn)物純度高;④自動(dòng)化程度高,細(xì)胞生長(zhǎng)周期長(zhǎng)。缺點(diǎn):

中空纖維價(jià)格昂貴,生產(chǎn)成本高。本文檔共20頁(yè);當(dāng)前第18頁(yè);編輯于星期三\9點(diǎn)12分動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器微囊細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器特點(diǎn):①細(xì)胞密度大;②產(chǎn)物濃度高;

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