臨床檢驗全血細胞

關于臨床檢驗全血細胞第1頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三質控物是一種用于檢驗工作中檢查分析過程或儀器準確性和精密度的物質，是統(tǒng)計質量控制的關鍵物質，特別對利用實驗室間比對進行能力驗證至關重要。在實施能力驗證計劃時，組織方應確保能力驗證中出現(xiàn)的不滿意結果不歸咎于樣品之間或樣品本身的變異性。因此，對于能力驗證樣品的檢測特性量，必須進行均勻性檢驗和（或）穩(wěn)定性檢驗。第2頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三目前全血細胞質控物在生產過程中，由于技術不斷規(guī)范，并且嚴格控制添加物的種類和數量，基體效應越來越小，因此對全血細胞質控物均勻性與穩(wěn)定性的評價非常重要。本文介紹利用本文介紹應用《CNAS—GL03能力驗證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》對全血細胞質控物均勻性與穩(wěn)定性的評價方法。第3頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三材料與方法（一）材料

四川邁克公司生產的全血細胞質控物；日本sysmex公司生產的sysmexXT-1800i五分類血細胞分析儀及其配套試劑。第4頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三

（二）方法

1.評價前準備：（1）評價項目選擇：均一性評價選擇四個全血細胞測定項目：WBC﹑RBC﹑Hb﹑PLT。穩(wěn)定性評價選擇三個穩(wěn)定性較差的項目MCV﹑HCT﹑PLT。

(2)樣本選擇：均勻性檢驗按照總體單元<500時，取樣數為15～25；總體單元>500時，取樣數為，本研究的質控物單元總數為250，因此隨機取樣數定為20瓶。穩(wěn)定性檢驗在質控物儲存期間每次隨機抽取3瓶份樣本。（3）檢測系統(tǒng)的準備：選擇技術熟練并經過系統(tǒng)培訓的操作人員；儀器應維護保養(yǎng)，并按要求校準;實驗環(huán)境條件、儀器工作應控制在最佳狀態(tài)。第5頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三2.評價方法：（1）均勻性檢驗：

將20瓶全血質控物(編號A～T)，嚴格按照說明書操作要求，每瓶各檢測一次，求出瓶間方差（）,代表質控物的瓶間不均勻性與瓶內不均勻性（在均勻溶液中，瓶內不均勻性主要為檢測系統(tǒng)的隨機誤差）的總和，取編號為A的質控樣本插入瓶間共檢測20次，求出瓶內方差（），代表瓶內不均勻性。

第6頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三

通過計算F=/進行方差分析，判斷瓶間與瓶內檢測有無系統(tǒng)誤差，如果F小于統(tǒng)計檢驗的臨界值，則認為均勻性符合要求，反之則認為均勻性不符合要求；

通過計算不均勻性誤差（為瓶間相對標準差，代表瓶間不均性；為瓶內相對標準差，代表瓶內不均性），推算出質控樣本的不均勻性誤差（亦即瓶間誤差），判斷不均勻性誤差是否達到規(guī)定的質量要求。第7頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三（2）穩(wěn)定性檢驗：將3份全血質控樣本（編號A～C），在規(guī)定期限內，每份樣本分別在初期、1個月、3個月、5個月后重復測定5次，以任一次測量所得該物質的特性均值為，標準差為S，測量次數為n。以被評價質控物初期重復測定的特性均值作為標準值（μ

），通過計算進行t檢驗，結果與t分布的臨界值進行比較，判斷質控物穩(wěn)定性是否在儲存期限內發(fā)生變化。第8頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三結果參數Hb（g/L）RBC（×1012/L）WBC（×109/L）PLT（×109/L）瓶間瓶內瓶間瓶內瓶間瓶內瓶間瓶內檢測瓶數（次數）20202020均值146.6146.25.05.16.06.0241240S1.361.060.090.070.100.085.964.16S21.851.120.00810.00490.010.006435.617.3RS%0.930.731.801.371.671.332.471.73F值1.651.651.562.06結果判定（P>0.05）（P>0.05）（P>0.05）（P>0.05）均勻性符合要求不均勻性誤差（RS%）0.581.161.011.76結果判定瓶間變異可接受表1全血質控物均勻性檢驗檢測結果第9頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三項目MCV（fl）HCT(%)PLT（×109/L）均數標準差均數標準差均數標準差初期特性值84.21.4143.21.322425.181月后83.41.3543.51.32405.243月后83.61.5943.91.442395.375月后84.61.7744.41.452395.615個月總計83.61.5743.91.402395.41t值0.660.860.96結果判定P>0.05該項目5個月內穩(wěn)定性良好P>0.05該項目5個月內穩(wěn)定性良好P>0.05該項目5個月內穩(wěn)定性良好表2全血質控物穩(wěn)定性檢驗檢測結果第10頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三討論均勻性與穩(wěn)定性是質控物應具有的兩個重要的性能指標。穩(wěn)定性是指在特定的環(huán)境條件下，用特定的方法檢測特定量值保持在規(guī)定范圍內的性質，一般希望質控物穩(wěn)定性越長越好，這樣可以在較長時間內觀察分析過程中檢驗質量的變化，但全血細胞質控物的穩(wěn)定期較短，一般在2℃～8℃可以穩(wěn)定3～6個月。第11頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三均勻性是由于物質內部結構的化學作用、重力作用與吸附因素等引起的各部位組成的差異，或由于分裝單元混勻不足、污染等造成分析物的不均勻。質控物的均勻性包含了瓶間不均勻性和瓶內不均勻性，對全血細胞這種懸浮狀的質控物，在生產時一定要充分混勻，減少因分裝所致的瓶間差異，使用時一定按照說明書要求充分混勻，這樣才能減少因混勻操作不當引起瓶內物質的不均勻，使用完后應盡快蓋上瓶蓋，并放回冰箱，避免液體蒸發(fā)造成誤差。臨床檢驗開展室內質控主要是檢驗檢測結果的不精密度，如果質控物的均勻性不好，將會導致室內質控的假失控；在室間質評中，如果均勻性不好，將會造成質評結果的真實性，因此只有均勻性好的質控物，才能獲得室內質控和室間質評的真實結果。第12頁，講稿共15頁，2023年5月2日，星期三質控物的均勻性一般規(guī)定血紅蛋白的瓶間變異<1%,細胞計數的瓶間變異<3%。穩(wěn)定性檢驗時，要求一定要先進行均勻性檢驗，均勻性合格后，在規(guī)