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白血病淋巴瘤免疫分型1本文檔共33頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分2流式細(xì)胞術(shù)的基本概念流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry,簡稱FCM)是一種可以快速、準(zhǔn)確、客觀,并且同時(shí)檢測單個微粒(通常是細(xì)胞)的多項(xiàng)特性的技術(shù),同時(shí)可以對特定群體加以分選研究對象為生物顆粒,如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征,并加以定量本文檔共33頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分3散射光信號和熒光信號前向角散射光(FSC,ForwardScatter) 入射激光的前向散射光信號 細(xì)胞相對大小及其表面積側(cè)向角散射光(SSC,SideScatter) 入射激光90角的散射光信號 細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對復(fù)雜性熒光素與特異抗體結(jié)合,熒光抗體與細(xì)胞抗原結(jié)合越多,產(chǎn)生的熒光信號越強(qiáng)。本文檔共33頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分4CD45/SS示意圖本文檔共33頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分5抗原分布
表面,胞漿,核內(nèi)是共同檢測還是分別檢測?表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNACD3,4,8,tetramer+CytokinesCD3,4,8,tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8,tetramer+Cytokines+DNA本文檔共33頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分6設(shè)門08-03307本文檔共33頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分7設(shè)門全部細(xì)胞門內(nèi)細(xì)胞08-03307本文檔共33頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分8本文檔共33頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分9血液腫瘤分類進(jìn)程本文檔共33頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分10白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)
白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標(biāo)志是表達(dá)于正常造血細(xì)胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細(xì)胞,但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原,因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對白血病/淋巴瘤進(jìn)行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細(xì)胞,必須對正常造血細(xì)胞分化抗原的表達(dá)模式有充分的了解。只有熟悉正常細(xì)胞的抗原表達(dá)模式,才能辨認(rèn)白血病/淋巴瘤細(xì)胞的存在。本文檔共33頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分11細(xì)胞類型鑒定Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.Steltzeretal(1993)AnnNYAcadSci667:265-280本文檔共33頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分12CD45/SS示意圖正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞老化粒細(xì)胞、噬酸細(xì)胞早幼—成熟粒細(xì)胞M3、CML單核細(xì)胞M4、M5LGL淋巴細(xì)胞CLL、ALL、CLD正常前體細(xì)胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALL成熟紅細(xì)胞、血小板M6、M7、MM細(xì)胞碎片Pre-B-ALL
非血液來源細(xì)胞本文檔共33頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分13B淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine本文檔共33頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分14T淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine本文檔共33頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分15粒細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine本文檔共33頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分16單核細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine本文檔共33頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分17非腫瘤T淋巴細(xì)胞表型本文檔共33頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分18非腫瘤B淋巴細(xì)胞表型本文檔共33頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分19非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型本文檔共33頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分20非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型本文檔共33頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分21白血病免疫分型根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原,確定其系列來源。如:淋系T/B、粒單系、紅系、巨核系等。根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列分化其相關(guān)抗原進(jìn)一步分型。如:早前B,前B,普通B…本文檔共33頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分22初治急白分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如:CD71、GPA、CD41、CD61本文檔共33頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分23AML-M3本文檔共33頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分24AML-M4本文檔共33頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分25AML-M4本文檔共33頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分26初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageCommonThymocyteMatureThymocyteCD2+CD5+DualCD4+/CD8+sCD3-CD2+CD5+CD4+orCD8+sCD3+CD2-/+CD5-/+sCD3-CD4-CD8-TdT+CD10-clg-sig-Pre-BCD10+cig+TdT+sig-Bsig+CD10+/-clg+/-TdT-CommonTdT+CD10+clg-sig-EarlyThymocyteEarlyB-Precursor本文檔共33頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分27B-ALL本文檔共33頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分28Pre-BALL本文檔共33頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分29
白血病免疫分型的價(jià)值確定ALL的細(xì)胞類型(B細(xì)胞或T細(xì)胞)和ALL的分化階段。鑒定AML的特征。對形態(tài)學(xué)上未分化的急性白血病有助于鑒定細(xì)胞類型。診斷一些少見類型的白血病。如:M6、M7、M0等。本文檔共33頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分30多發(fā)性骨髓瘤(MM)
多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞異常增生性疾病。正常漿細(xì)胞為CD38+/CD45dim/-,使用CD38/CD45雙標(biāo)記檢測外周血和骨髓標(biāo)本,可以準(zhǔn)確劃定漿細(xì)胞群。通常使用CD38和CD45,結(jié)合輕鏈檢查,對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行分析。另外,正常漿細(xì)胞的表面標(biāo)記為CD19+/CD56-,而多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞通常為CD19-/CD56+。CD138目前認(rèn)為是漿細(xì)胞最特異的指標(biāo)。這樣,使用流式細(xì)胞儀對外周血或骨髓標(biāo)本進(jìn)行多參數(shù)分析,并計(jì)算異常漿細(xì)胞含量,對于多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評估具有重要意義。
本文檔共33頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分31MM本文檔共33頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分32流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。2、細(xì)胞太多聚集或成團(tuán)也可能沒有足夠的分析細(xì)胞。3、硬化的組織也很難得到足夠的分析細(xì)胞。4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。5、比例太低的單克隆B細(xì)胞很難檢測到。本文檔共33頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期三\7點(diǎn)41分33流式免疫表
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