土壤堿解性氮的含量測定

土壤堿解性氮的含量測定（擴散吸收法）一、 目的要求土壤堿解性氮的含量可以反映出近期內(nèi)土壤氮素的供應(yīng)狀況，對指導(dǎo)合理施用氮肥有一定的意義。堿解擴散吸收法操作簡便，結(jié)果重現(xiàn)性較好，而且與作物的需氮情況有一定的相關(guān)性。故要求較能熟練地掌握本方法的操作技能。圖4--10擴散皿二、 方法原理用一定濃度的堿液水解土壤樣品，使土壤中的有效氮堿解并轉(zhuǎn)化為氨而不斷擴散逸出，逸出的氨被硼酸吸收后，再用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)消耗鹽酸溶液的量，就可計算出土壤堿解氮的含量。圖4--10擴散皿三、 儀器試劑（一） 儀器用具天平（感量0.0lg）、恒溫箱、擴散皿、半微量滴定管（10ml）、皮頭吸管（10ml）。（二） 試劑配制1moL-iNaOH溶液稱取三級氫氧化鈉40g溶于蒸餾水中，冷卻后稀釋至1L。堿性膠液取40g阿拉伯膠和50ml水同放于燒杯中，加熱至70?80°C，攪拌溶解后放涼。加入20ml甘油和20mlK2CO3水溶液，攪勻、放涼，離心除去不溶物，將清液貯于玻璃瓶中備用。2%硼酸--指示劑混合液見土壤全氮量測定。四、 操作步驟1.稱取通過lmm篩的風(fēng)于土樣2.00g，放入擴散皿外室，輕輕旋轉(zhuǎn)擴散血，使樣品鋪平。在擴散皿內(nèi)室加入2%硼酸指示劑混合液2ml（此時為紅紫色，若出現(xiàn)藍色應(yīng)吸出變藍的硼酸液，再重新加2ml硼酸指示劑混合液）。在擴散血外室邊緣涂堿性膠液，蓋上毛玻璃并旋轉(zhuǎn)數(shù)次，使毛玻璃與擴散血邊緣完全密封。慢慢推開毛玻璃一邊，使擴散皿露出一條狹縫，用皮頭吸管加囚molL-1NaOH溶液10ml于擴散皿外室，立即將毛玻璃蓋嚴，并用橡皮筋固定毛玻璃。水平地旋轉(zhuǎn)擴散皿，使土壤與堿液充分混勻，隨后放入40C的恒溫箱中保溫24h。取出擴散皿，以0.01molL-1HCI標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定擴散皿內(nèi)室，溶液由藍色到紅紫色即為終點。記錄所用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）。同時作空白測定。五、 結(jié)果計算土壤堿解性氮（mgkg-1）=箜~、〉xChC014x106M式中V：滴定樣品消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，ml；V。：滴定空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，ml；CHCI:鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，moL-1；0.014:氮原子的毫摩爾質(zhì)量，gmol-1；M：風(fēng)干上樣品質(zhì)量，g;106：換算為mgkg-1的系數(shù)。

六、說明1.測定中的注意事項同土壤全氮量測定中的擴散吸收法。本方法測定結(jié)果不包括硝態(tài)氮在內(nèi)。如果要包括硝態(tài)氮在內(nèi)，測定時需在擴散皿外室的土樣中加入0.2gFeSO4.7H2O（化學(xué)純）和0.1mlAg2SO4（化學(xué)純）飽和溶液，再加10ml1molL-iNaOH溶液，按上述步驟進行堿解擴散。參考指標(biāo)土壤堿解氮含量分級參考指標(biāo)等級 豐富 中等 缺堿解氮的含量（mgkg-1） >100 50-100 <50復(fù)習(xí)思考題土壤堿解性氮包括哪些形態(tài)的氮素？測定堿解性氮有什么意義？用擴散吸收法測定堿解性氮，為了取得可靠的結(jié)果，在操作中應(yīng)注意哪些問題?技能訓(xùn)練三土壤速效磷的測定（碳酸氫鈉法）圖4—11土壤有效磷測定0.5原磷Ca-PAI-P比的可來，一、目的要求通過實驗實習(xí)要求掌握molL-1圖4—11土壤有效磷測定0.5原磷Ca-PAI-P比的可來，二、 方法原理石灰性土壤中的磷主要以（磷酸鈣鹽）的形態(tài)存在，中性土壤中Ca-P、（磷酸鋁鹽）、Fe-P（磷酸鐵鹽）均占有一定例。用0.5molL-1NaHCO3浸提，可以抑制Ca2+活性，相應(yīng)地提高了Ca-P的溶解度，同時也使某些活性Fe-P、AI-P起水解作用而被浸提出溶液中存在的OH-、HCO3-、CO3-2等陰離子還可把吸附態(tài)磷代換下來。因此，碳酸氫鈉不僅適用于石灰性土壤，也適用于中性和酸性土壤中速效磷的提取。浸提液中的磷，在一定酸度下用硫酸鉬銻抗還原顯色成磷鉬藍，藍色的深淺在一定濃度范圍內(nèi)與磷的濃度呈正比，故可用比色法進行測定。三、儀器試劑（一） 儀器用具天平（感量為0.01g）、恒溫振蕩機、分光光度計或光電比色計、三角瓶（100ml、150ml）、移液管（10ml、5ml刻度移液管）、容量瓶（50ml）、量筒（50ml）、漏斗、無磷濾紙等。（二） 試劑配制0.5molL-1NaHCO3溶液取42gNaHCO3（化學(xué)純）溶于800ml蒸餾水中，稀釋至約980ml，用2molL-1NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH8.5（用酸度計測定），最后稀釋至1L，貯于塑料瓶中。貯存期超過一個月，使用前需重新校正pH值。無磷活性炭（化學(xué)純）粉末狀，不含磷。若含磷應(yīng)先將活性炭用1:1HCI浸泡過夜，然后在平板漏斗上抽氣過濾，用蒸餾水洗4?5次。再用0.5molL-1NaHCO3溶液浸泡過夜，然后在平板漏斗上抽氣過濾，最后用蒸餾水洗去NaHCO3，并檢查到無磷為止，烘干備用。硫酸-鉬銻抗貯備液稱取12.00g鉬酸銨（分析純）溶于25ml蒸餾水中。另將濃硫酸（比重1.84二級）176ml緩緩注入800ml水中，冷卻后加入0.30g酒石酸銻鉀（二級）攪溶。再將兩溶液相混合，加水至4L，搖勻，貯于棕色瓶中。硫酸鉬銻抗顯色劑使用前取0.53g抗壞血酸（左旋、二級）溶于100ml鉬銻抗貯存液中，搖勻，避光存放。此試劑有效期在室溫下為24h，在2?8。。的冰箱中可貯存7d。磷標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取經(jīng)105°C烘干的磷酸二氫鉀（二級）0.4394g，溶于200ml水中，加入5ml濃硫酸，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，用水定容，搖勻，此為100mgL-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液可長期保存。用時稀釋20倍即為5mgL-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液不宜久存。四、 操作步驟稱取通過lmm篩孔的風(fēng)干上樣2.50g放入150ml三角瓶中，加入一小勺無磷活性炭和50m10.5moL-1NaHCO3浸提劑，塞緊瓶塞，在20?25C的條件下振蕩30min，然后用干燥漏斗和無磷濾紙過濾，濾液承接于干燥三角瓶中。同時作空白測定。吸取濾液10.00ml（含磷量高時，可改吸為5ml或2ml，但必須用0.5mol-1NaHCO3浸提劑補足10ml）于50ml容量瓶中，加硫酸鉬銻抗顯色劑5.00ml，充分搖動，趕凈氣泡后，加水定容，搖勻。30min后，在分光光度計上用660nm波長（光電比色計用紅色濾光片）比色。以空白測定調(diào)零，讀取樣品的吸收值（E），在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出顯色液的磷濃度值（mgL-1）。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別吸取5mgL-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0、l、2、3、4、5ml于50ml容量瓶中，各加入0.5molL-1NaHCO3浸提劑10ml和硫酸鉬銻抗混合顯色劑5.00ml，充分搖動，趕凈氣泡，定容，搖勻，即得0.0.l、0.2、0.3、0.4、0.5mgL-1磷的系列溶液。30min后與待測液同時進行比色，讀取吸收值。在方格坐標(biāo)紙上以吸收值為縱坐標(biāo)，磷溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。五、 結(jié)果計算土壤有效磷（P,mgkg-1）=標(biāo)準(zhǔn)曲線查出值x顯色液體積x分取倍數(shù)風(fēng)干土樣質(zhì)量式中：顯色液P含量：從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的顯色液P濃度，mgL-1；顯色液體積：本實驗為50ml；分取倍數(shù)：浸提液總體積（ml）/吸取濾液體積（ml）=50/10=5六、 注意事項硫酸鉬銻抗加入量要基本準(zhǔn)確。標(biāo)準(zhǔn)液與待測液的顯色酸度應(yīng)保持一致，其加入量應(yīng)隨比色時定容體積的大小按比例增減。加入顯色劑后必須充分搖動趕凈CO2，否則由于氣泡的存在會影響比色結(jié)果。溫度對本方法有較大的影響，測定應(yīng)在20?25C的溫度下進行，以25C為標(biāo)準(zhǔn)。因此，最好在有空調(diào)設(shè)備的室內(nèi)進行。參考指標(biāo)土壤有效磷含量分級參考指標(biāo)土壤有效磷（mgkg-）<1010-20>20土壤供磷水平低中等高復(fù)習(xí)思考題為什么報告土壤有效磷的測定結(jié)果時，必須同時說明所用的測定方法?標(biāo)準(zhǔn)系列磷溶液中的“0”和“空白”在測定中用法上有什么不同？在測定中要獲得比較準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)注意哪些問題?技能訓(xùn)練四土壤速效鉀含量的測定（醋酸銨浸提-火焰光度法）一、 目的要求通過實驗要求掌握測定土壤速效鉀的基本原理和操作技能，并能運用測定結(jié)果判斷土壤供鉀能力，為合理施肥提供依據(jù)。二、方法原理土壤速效鉀中95%左右為交換性鉀，水溶性鉀只占極少部分。因此，用中性醋酸銨作為浸提劑，NH4+把土壤膠體上吸附的K+代換下來，浸出液中的K+可直接用火焰光度計測定。三、 儀器試劑（一） 儀器用具天平（感量為0.0lg）、振蕩機、火焰光度計、錐形瓶（100ml、50ml）、量筒（50ml）、容量瓶（50ml）、漏斗等。（二） 試劑配制0.1molL-1NH4AC溶液稱取77.08g醋酸銨（化學(xué)純）溶于900ml蒸餾水中，用1:1氫氧化銨和稀醋酸調(diào)節(jié)pH到7.0（用酸度計測定，也可以用漠百里酚藍為指示劑，調(diào)至綠色即為pH7.0）。鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取經(jīng)105^烘4?6h的氯化鉀（分析純）0.1907g，溶于lmolL-1中性醋酸銨溶液中，定容至1L，即為100mgL-1K標(biāo)準(zhǔn)溶液。鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液用移技管準(zhǔn)確吸取100mgL-1鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液0、l、2.5、5、10、20ml分別放入50ml容量瓶中，用lmolL-1中性醋酸銨溶液定容，即得0、2、5、10、20、40mgL-1鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。四、 操作步驟稱取通過lmm篩孔的風(fēng)干上樣5.00g于100ml錐形瓶中，加入lmolL-1中性醋酸銨溶液50ml，用橡皮塞塞緊，振蕩30min，立即用干濾紙過濾，濾液承接于小錐形瓶中，直接在火焰光度計上進行測定，記錄檢流計讀數(shù)。工作曲線繪制以鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中濃度最大的一個，定火焰光度計上檢流計的滿度（90?100），以“O”調(diào)儀器零點。然后從稀到濃依次測定，記錄檢流計的讀數(shù)。以檢流計讀數(shù)為縱坐標(biāo)，以鉀濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線。五、 結(jié)果計算土壤速效鉀含量K（mgkg-1）=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的K含量X浸提液體積風(fēng)干土樣質(zhì)量六、 注意事項浸出液和含醋酸銨的鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液不能放置太久，以免長霉而影響測定結(jié)果。若浸出液中鉀的濃度超過測定范圍，應(yīng)用lmolL-1NH4AC溶液稀釋后再測定。加入醋酸銨浸提劑于土壤樣品后，不宜放置過久，否則可能有一部分緩效態(tài)鉀轉(zhuǎn)入溶液中，使測定結(jié)果偏高。附四苯硼鈉比濁法一、方法原理在pH為8左右，四苯硼酸鈉與侍測液中的鉀離子能形成溶解度很小的四苯硼酸鉀白色細粒沉淀，此微小顆粒在甘油保護下所形成的懸濁液，具有一定的穩(wěn)定性。根據(jù)懸液濁度的深淺，可用光電分光光度計測定其含量，主要的反應(yīng)如下：K++Na[B（C6H5）4]=K[B（C6H5）J￡苜Na+溶液中的銨離子也能與四苯硼酸鈉生成相似的化合物，鈣、鎂離子也能干擾比濁反應(yīng)，可用甲醛-EDTA混合溶液進行掩蔽。二、 儀器試劑（一） 儀器電子天平（0.01g）、三角瓶（150ml）、量筒（25ml）、容量瓶（25ml）、漏斗、濾紙、光電分光光度計。（二） 試劑配制1.0molL-1NaNO3溶液稱取85.0g硝酸鈉（化學(xué)純）溶于蒸餾水，稀釋定容至1L,用3%四苯硼酸鈉檢驗是否有鉀存在。甲醛-EDTA混合掩蔽劑稱取2.5gEDTA二鈉鹽（化學(xué)純）溶于20ml0.05molL-1的硼砂溶液中，加入80ml37%甲醛（分析純）溶液，混勻后即成pH8.2的掩蔽劑。配好后用四苯硼酸鈉作空白檢查，應(yīng)無混濁現(xiàn)象。3%四苯硼鈉溶液稱取3.00g四苯硼鈉（化學(xué)純）溶于100ml蒸餾水中，加入10滴0.2molL-1NaOH溶液，攪勻，放置過夜，用緊密試紙過濾，貯存于棕色瓶中。鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取經(jīng)105^烘干4-6h的分析純KCl0.1907g，溶于1molL-1NaNO3溶液中，定容至1000ml，此為100mgkg-1鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取該溶液1.5、2.5、5、7.5、10、12.5、15ml于50ml容量瓶中，用1molL-1NaNO3定容，即得3、5、10、15、20、25、30mgkg-1鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。三、 操作步驟稱取過1mm篩風(fēng)干土樣5.00甘，放入150ml三角瓶中，加入25ml1molL-1NaNO3溶液，在常溫下振蕩5min，過濾，棄去最初濾液。同時作空白試驗。吸取濾液5ml于25ml容量瓶中，加入1ml甲醛-EDTA混合掩蔽劑，10滴甘油，搖勻，沿管壁加入1ml3%四苯硼鈉溶液，立即搖勻，放置15-30min。比濁前再次搖勻，用1cm光徑比色皿在波長為440mm下比濁，讀取光密度。根據(jù)待測液的光密度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出濃度值。繪制鉀標(biāo)準(zhǔn)曲線分別吸取鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液5ml于25ml容量瓶中，進行顯濁、比濁，讀取光密度。以鉀濃度為橫座標(biāo)、光密度為縱座標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。四、 結(jié)果計算土壤有效鉀（K,mgkg-1）=標(biāo)準(zhǔn)曲線查出值x比濁液體積x分取倍數(shù)風(fēng)干土樣質(zhì)量五、 注意事項加入試劑的順序不能顛倒，比濁時須再次搖勻，測定速度要快。室內(nèi)不能有氨氣存在。參考指標(biāo)以本法測定土壤速效鉀含量分級參考指標(biāo)土壤速效鉀（mgkg-1） <80 80-100 >120土壤供鉀水平 缺 中等 豐富復(fù)習(xí)思考題怎樣正確使用和維護火焰光度計？比濁法測定土壤速效鉀時，加入甘油和甲醛-EDTA的作用是什么？技能訓(xùn)練五過磷酸鈣肥料中有效磷含量測定（鑰鑰黃比色法）一、 目的要求過磷酸鈣是我國廣泛生產(chǎn)和施用的一種磷肥。但不同廠家生產(chǎn)的過磷酸鈣質(zhì)量差別很大，測定其有效磷含量，是評價和鑒定過磷酸鈣質(zhì)量的重要手段，同時也為打擊假冒偽劣產(chǎn)品流入市場提供依據(jù)。通過此項技能操作，要求熟悉過磷酸鈣中有效磷測定的基本原理，學(xué)會其測定方法。二、 方法原理過磷酸鈣中的有效磷包括水溶性磷和弱酸溶性磷，用2%檸檬酸溶液浸提過磷酸鈣中的有效磷，浸出液中的正磷酸鹽在酸性條件下與帆鉬酸銨生成黃色的三元雜多酸。溶液黃色的深淺與浸提液中磷的濃度呈正比，可用比色法進行測定。三、 儀器試劑（―）儀器分析天平（感量0.001g）、振蕩機、光電分光光度計、塑料瓶（200ml）、三角瓶（200ml、100ml）、量筒（100ml）、容量瓶（50ml）、移液管（5、10、20ml）、漏斗、無磷濾紙、磷肥樣品。（二）試劑配制