其他口腔疾病相關(guān)的微生物課件

其他口腔疾病相關(guān)的微生物口腔頜面部感染的微生物學(xué)感染的定義感染是機(jī)體和入侵的病原微生物相互作用所表現(xiàn)出的病理生理的過程是病原微生物侵襲宿主機(jī)體的表面或內(nèi)部病在此寄居的現(xiàn)象，伴有或不伴有疾病的發(fā)生（只有病原微生物有較強(qiáng)的治病能力造成了明顯損害的情況下才引起感染性疾?。└腥镜念愋屯庠葱愿腥緀xogenicinfection

正常微生物群以外的微生物所引起的感染比如結(jié)核破傷風(fēng)霍亂等內(nèi)源性感染正常微生物群在一定的條件下造成的感染比如易位過度繁殖毒力增強(qiáng)等頜面部感染細(xì)菌學(xué)特點(diǎn)：從感染的來源區(qū)分：分為牙源性混合感染非牙源性感染特點(diǎn)：

1口腔正常菌群造成的內(nèi)源性感染

2厭氧細(xì)菌是優(yōu)勢細(xì)菌

3混合性感染為主2-3種細(xì)菌為主牙源性混合感染頜骨骨髓炎骨膜炎拔牙后的感染冠周炎特點(diǎn)是：正?？谇晃⑸锶簵l件致病細(xì)菌協(xié)同作用混合感染厭氧菌為主干槽癥是拔牙后的創(chuàng)口發(fā)生的混合性細(xì)菌感染，臨床癥狀以空虛的牙槽窩，疼痛為主以前的觀點(diǎn)血塊的溶解有關(guān)現(xiàn)在認(rèn)為厭氧菌的混合感染造成的非牙源性感染的類型1腺源性頜面部感染2外傷性頜面部感染3血源性頜面部感染4醫(yī)源性頜面部感染醫(yī)療行為穿刺手術(shù)等5特異性頜面部感染特殊的外源性病原菌

相關(guān)微生物

金黃色葡萄球菌StraphylococcusG+成葡萄狀排列需氧觸酶試驗(yàn)陽性（區(qū)分葡萄球菌和鏈球菌）血漿凝固酶試驗(yàn)陽性（區(qū)分其他葡萄球菌）觸酶、血液凝固酶實(shí)驗(yàn)觸酶試驗(yàn)：用接種環(huán)挑取固體培養(yǎng)基上的菌落，置于潔凈的試管內(nèi)或載玻片上過氧化氫溶液數(shù)滴，觀察結(jié)果。于半分鐘內(nèi)有大量氣泡產(chǎn)生者為陽性，不產(chǎn)生氣泡者為陰性血液凝固酶試驗(yàn)：致病性葡萄球菌能產(chǎn)生血漿凝固酶，可凝固新鮮的人血漿或兔血漿檢測此種酶的試驗(yàn)，常用于鑒定葡萄球菌的致病力，以區(qū)別非致病性葡萄球菌青霉素MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)隨著青霉素的廣泛使用，有些金黃色葡萄球菌產(chǎn)生青霉素酶，能水解β-內(nèi)酰胺環(huán)，表現(xiàn)為對青霉素的耐藥。科學(xué)家研究出一種新的能耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林(methicillin)。1959年應(yīng)用于臨床后曾有效地控制了金黃色葡萄球菌產(chǎn)酶株的感染，可英國的Jevons就首次發(fā)現(xiàn)了耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)1不均一耐藥性

MRSA菌落內(nèi)細(xì)菌存在敏感和耐藥兩個(gè)亞群，即一株MRSA中只有一小部分細(xì)菌約10－4～10－7，對甲氧西林高度耐藥，在50μg/ml甲氧西林條件下尚能生存，而菌落中大多數(shù)細(xì)菌對甲氧西林敏感，在使用抗生素后的幾小時(shí)內(nèi)大量敏感菌被殺死，但少數(shù)耐藥菌株卻緩慢生長，在數(shù)小時(shí)反又迅速增殖。

2廣譜耐藥MRSA除對甲氧西林耐藥外，對其它所有與甲氧西林相同結(jié)構(gòu)的β-內(nèi)酰胺類和頭孢類抗生素均耐藥，MRSA還可通過改變抗生素作用靶位，產(chǎn)生修飾酶，降低膜通透性產(chǎn)生大量PABA等不同機(jī)制[3]，對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、氟喹喏酮類、磺胺類、利福平均產(chǎn)生不同程度的耐藥，唯對萬古霉素敏感。MRSAMRSA的治療

MRSA感染的治療是臨床十分棘手的難題之一，關(guān)鍵是其對許多抗生素有多重耐藥。因其耐藥機(jī)制是PBPs（青霉素結(jié)合蛋白）性質(zhì)的改變，因此，MRSA幾乎對所有的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，且在同時(shí)，還可能對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、氨基糖苷類抗生素等多種抗菌藥物表現(xiàn)出耐藥性。目前最常用，也是療效最肯定的抗生素為萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧等。MRSA預(yù)防首先是合理使用抗生素。目前臨床濫用抗生素的現(xiàn)象，對MRSA的流行起了一定的擴(kuò)散作用，因此，在選擇抗生素時(shí)應(yīng)慎重，以免產(chǎn)生MRSA菌株，如對大手術(shù)后預(yù)防深部葡萄球菌感染，使用第一代和第二代頭孢菌素為好(如頭孢唑啉、頭孢呋肟等)，第三代頭孢菌素抗葡萄球菌效果反而不如第一代效果好。第三代頭孢菌素的長期使用與MRSA的出現(xiàn)率呈平行關(guān)系。金黃色葡萄球菌臨床上化膿性感染最常見的病原菌頜面部化膿性感染皮膚癤腫術(shù)后感染毒力因子：血漿凝固酶溶細(xì)胞毒素腸毒素等表皮葡萄球菌：是人類皮膚口腔腸道等的腸駐菌同時(shí)也是院內(nèi)感染的常見細(xì)菌是口腔頜面部腫瘤術(shù)后拔牙術(shù)后的常見病原菌鏈球菌G+的球菌鏈狀排列兼性厭氧化膿性溶血鏈球菌是頜面部的蜂窩組織炎的常見病源菌毒力因子毒力因子：鏈球菌溶血素致熱外毒素透明質(zhì)酸酶鏈激酶鏈道酶等銅綠假膜單胞菌囊性纖維變性病人痰液顯示葡萄球菌和銅綠假單胞菌、細(xì)的革蘭陰性桿菌銅綠假單胞菌培養(yǎng)于麥康培養(yǎng)基產(chǎn)生稍帶綠色的綠膿菌素色素頜面部腫瘤術(shù)后最常見的感染細(xì)菌也是最重要的院內(nèi)感染的病原菌G+桿菌有鞭毛非發(fā)酵

毒力因子粘附素（菌毛結(jié)構(gòu)）多糖莢膜內(nèi)毒素（LPS）彈性蛋白酶綠膿菌素耐藥質(zhì)粒治療常需要聯(lián)合用藥口腔義齒修復(fù)的微生物學(xué)義齒修復(fù)是人類的牙齒喪失以后恢復(fù)咀嚼功能的一種有效方法包括可摘局部義齒固定義齒和種植義齒三種修復(fù)體在口腔中的出現(xiàn)對口腔環(huán)境和微生物有許多的影響從而引發(fā)了包括繼發(fā)性齲牙周炎義齒性口炎等這是義齒修復(fù)微生物討論的重點(diǎn)三種義齒修復(fù)方法一修復(fù)材料與口腔微生物1口腔微生物在材料表面的粘附和定植粘附Adhesion是微生物在特定區(qū)域的組織表面定植的首要條件是微生物于宿主之間發(fā)生關(guān)系和致病的基礎(chǔ)定植Colonization是微生物在組織表面生長繁殖的過程或存活的狀態(tài)(1)非特異性附著和特異性附著修復(fù)材料表面的光潔度電荷以及疏水性介導(dǎo)非特異性附著材料表面存在的特異性受體和唾液糖蛋白介導(dǎo)特異性附著（2）不同材料對口腔微生物定植有影響主要是材料的性質(zhì)表面性狀光潔度疏水性抗腐蝕性等二修復(fù)方式與口腔微生物1可摘局部義齒牙的自潔作用下降滯留區(qū)增加對牙齦的刺激增加2固定義齒修復(fù)修復(fù)體邊緣的形狀位置表面的粗糙程度等對口腔微生物都有影響3種植修復(fù)種植體周微生物的情況是影響種植體成功率延長種植體壽命的重要因素種植體成功的種植體：種植體的周圍存在有良好的齦上皮沒有種植體炎存在的齦下細(xì)菌是大量的G+球菌兼性厭氧菌85%以上失敗的種植體種植體周圍炎大量的G-厭氧菌可動(dòng)菌局部的抗菌措施以及抗生素治療可以改善優(yōu)勢細(xì)菌為P.gP.I(中間)F.n(具核)等口腔微生物常規(guī)檢查實(shí)驗(yàn)方法涂片檢查的方法暗視野顯微鏡技術(shù)主要適用于牙周炎齦下菌斑的細(xì)菌的檢查主要將檢出的微生物分為螺旋體可運(yùn)動(dòng)細(xì)菌球菌其他細(xì)菌4大類不需要特殊染色封片以后直接觀察檢測牙周病的活動(dòng)性和治療效果有意義，螺旋體和可動(dòng)細(xì)菌的比例剛果紅染色牙周炎齦下菌斑的標(biāo)本的最常用的一種方法使用普通的光學(xué)顯微鏡操作簡便結(jié)果準(zhǔn)確可以長期保存方法剛果紅涂片濃硫酸熏蒸口腔微生物的分離培養(yǎng)標(biāo)本種類繁多：唾液齦溝液牙面上的齦上菌斑齦下菌斑感染根管牙槽膿腫等取樣方法多樣：根據(jù)不同的標(biāo)本不同的研究目標(biāo)鑒定復(fù)雜：鑒定不同種屬的細(xì)菌過程比較復(fù)雜觀察研究的方法多：光鏡電鏡CLSM等唾液的采集刺激性唾液和非刺激性唾液最佳時(shí)間：起床以后刷牙漱口以前以及兩餐之間（1016）樣本的處理以及接種培養(yǎng)齦溝液的采集材料無菌紙捻或?qū)Ｓ玫臑V紙條取樣前的準(zhǔn)備工作漱口清除軟垢齦上菌斑等隔濕的情況下插入齦溝5秒轉(zhuǎn)運(yùn)液處理和培養(yǎng)接種菌斑的采集口腔菌斑組成十分復(fù)雜

要根據(jù)研究目的來確定不同的取樣方法和取樣部位1分離致齲細(xì)菌上下切牙的唇面以及鄰面的菌斑后牙溝裂的菌斑漱口隔濕取樣（刮匙和探針）鄰面的樣本一般采用牙線和鋼絲2根面菌斑采集齦上和齦緣的菌斑牙齦炎和早期牙周炎的研究樣本方式基本相似3齦下菌斑的采集齦下采集與各種類型的牙周病相關(guān)的細(xì)菌特別是厭氧的細(xì)菌生長要求高取樣需要特別的注意特殊器械的方法主要是一些帶有充氣導(dǎo)管的取樣設(shè)備一般采用的方法無菌紙捻或刮匙

主要的區(qū)別是要迅速放入轉(zhuǎn)運(yùn)液中

并在轉(zhuǎn)運(yùn)液的上邊用石蠟油封閉

標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)所有的樣本要立即用厭氧的方式轉(zhuǎn)運(yùn)除膿液以及唾液樣本可以用注射器的方法轉(zhuǎn)運(yùn)

其余的樣本必須使用預(yù)還原的厭氧轉(zhuǎn)送培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運(yùn)

使用預(yù)還原的厭氧轉(zhuǎn)送培養(yǎng)基，加蓋液體石蠟

使目前轉(zhuǎn)運(yùn)厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本以及口腔細(xì)菌標(biāo)本的優(yōu)選方法

轉(zhuǎn)運(yùn)液硫乙醇酸鈉

氯化鈣混合組成的培養(yǎng)基

可以保持較低的氧化還原電勢

穩(wěn)定的Ph值

成分簡單易于保存最為常用瑞格式液

左旋鹽酸半胱氨酸

和一些無機(jī)鹽組成的標(biāo)本的分散和稀釋使標(biāo)本中的菌斑得以均勻彌散

準(zhǔn)確地進(jìn)行稀釋以便獲得單個(gè)菌落的純培養(yǎng)

分散主要的方法是

超聲分散（對一些細(xì)菌有一定的殺傷作用）

漩渦震蕩標(biāo)本的稀釋

采取10倍的系列稀釋

已獲得合適的濃度進(jìn)行接種培養(yǎng)

標(biāo)本的接種

培養(yǎng)培養(yǎng)基的選擇

口腔常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括

BHI牛腦心浸出液

胰酶水解物大豆瓊脂TSA可以培養(yǎng)出大部分的口腔細(xì)菌

有一些特殊的細(xì)菌還需要

添加血清或氯化高鐵血紅素以及維生素K1特殊的鑒定培養(yǎng)基

變形鏈球菌

MS培養(yǎng)基

輕唾瓊脂培養(yǎng)基

Rogosa乳桿菌培養(yǎng)基等

標(biāo)本的接種培養(yǎng)選擇合適的稀釋濃度

以保證在培養(yǎng)基上可以獲得單個(gè)的菌落

樣本的接種量一般是10–20微升

用專用的玻棒將其均勻的涂開標(biāo)本的培養(yǎng)條件；主要是根據(jù)不同細(xì)菌的培養(yǎng)條件決定的口腔細(xì)菌的鑒定常規(guī)的方法主要是

根據(jù)菌細(xì)胞的染色性

細(xì)菌以及菌落的形態(tài)

主要的生化特性

代謝酸的產(chǎn)生等來分析鑒定

非常規(guī)的方法包括基因型鑒定細(xì)菌蛋白質(zhì)細(xì)胞組分等的鑒定方法變形鏈球菌群的分離和鑒定菌斑標(biāo)本

專用的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)液分散稀釋接種培養(yǎng)基

MS撫育37度48小時(shí)

90%氮?dú)?0%二氧化碳菌落和菌細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察次代培養(yǎng)純化和富集生化鑒定

血清學(xué)鑒定

DNAC+G