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文檔簡介
標準曲線制作和應用一.相關名稱簡介1
分光光度法分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸光度或發(fā)光強度,對該物質進行定性和定量分析的方法。光區(qū)包括:紫外光區(qū)(200~400nm)、可見光區(qū)(400~760nm)、紅外光區(qū)(0.8-100um)。一.相關名稱簡介2
標準曲線定義標準曲線是標準物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數(shù)關系。建立標準曲線的目的是推導待測物質的理化屬性。在分析化學實驗中,常用標準曲線進行定量分析,通常情況下的標準工作曲線是一條直線。一.相關名稱簡介3
坐標標準曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變量(如標準溶液的濃度),稱為普通變量,縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變量。當X取值為X1,X2,…Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1,Y2,…Yn。一.相關名稱簡介
將這些測量點Xi,Yi描繪在坐標系中,用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關系,這就是常用的標準曲線制作方法。用作繪制標準曲線的標準物質,它的含量范圍應包括試樣中被測物質的含量,制作標準曲線實驗點7個較好,不能任意延長。一.相關名稱簡介4
點分布從不確定度理論推算樣本的不確定度時,有二個重要的結論:一、標準曲線的重心點處,所查出來的樣品不確定度最小。二、標準的點數(shù)越多,樣品的不確定度越小?;谶@兩個結論的標準曲線的做法應該是:在樣品濃度的附近盡量的多布標準點。二.標準曲線的制作1標準曲線的表達式標準曲線應是一條通過原點的直線,如果坐標上各濃度點基本在一條直線上可不進行回歸處理,但在實驗中不可避免地存在測定誤差,往往會有一、二點偏離直線,此時可用最小二乘法進行回歸分析,
然后繪制曲線,通常稱為回歸直線,而代表回二.標準曲線的制作歸直線方程叫回歸方程,表達式為:y=kx+b(式中:k為直線斜率,b為y軸上的截距,x為被測溶液的濃度,y為吸光度,是多次測定結果的平均值)。2
標準曲線的參數(shù)標準曲線有3個參數(shù),即相關系數(shù)r,斜率k和截距b。二.標準曲線的制作2.1
相關系數(shù)(r):相關系數(shù)是表示變量x與y之間的線性關系的密切程度。如果r=1則所有點都落在一條直線上,y與x完全呈現(xiàn)線性關系,在分析中總存在隨機誤差,一般,r≥0.999。2.2斜率(k):某種分析方法的斜率在實驗條件基本一致的情況下是相對穩(wěn)定的,斜率是檢驗分析方法靈敏度的,因此當斜二.標準曲線的制作率出現(xiàn)異常數(shù)據(jù)(超過相當偏差的2.5%)時,就要尋找原因。2.3截距(b):截距是評價標準曲線準確度的,是實驗誤差在y軸上(或x軸上)的反映,當用扣除空白值吸光度的數(shù)值為y值進行回歸時,理論上b值應為零,但實際上截距等于零的情況是很罕見的,當系統(tǒng)誤差減至允許程度后,隨機誤差總是存二.標準曲線的制作在的,因此截距一般不為零。3影響標準曲線線性關系的因素(1)分析法自身的精密度(2)測定用儀器的精密度(3)易揮發(fā)的溶劑所引起的測定溶液濃度的改變(4)污染(5)分析人員操作的影響二.標準曲線的制作
玉米漿中溶磷標準曲線二.標準曲線的制作玉米漿中溶磷標準曲線三.相關曲線及應用
總砷標準曲線制作三.相關曲線及應用
總砷標準曲線應用表格三.相關曲線及應用1實用性這是做標準曲線的重要前提,這個問題實際很簡單,就是這樣一個問題:我的樣品的儀器響應能否用我們所建立的標準曲線來推導其理化屬性?答案建立在儀器響應的特異性和標準系列和樣品的匹配性上面。一方面我們總是力求儀器三.相關曲線及應用1實用性的響應對于標準和樣品是一視同仁;同時我們也要求我的樣本跟標準基體匹配。所以最好的標準是基體匹配標準,最好的標準曲線是工作曲線。三.相關曲線及應用2現(xiàn)實現(xiàn)有方法趨向于標準曲線適用于較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標準點的情況下,均勻的分布濃度點是最佳選擇,這樣對該標準曲線覆蓋的濃度范圍內,對于所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數(shù)點的設置來三.相關曲線及應用源于相關信息,在已知該濃度范圍先確定中間點,然后在中間點左右分布對稱的標
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