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季花藥培養(yǎng)公開(kāi)課第1頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)愈傷組織根、芽植物體脫分化植物激素:細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素再分化遮光光照植物組織培養(yǎng)的過(guò)程知識(shí)回顧第2頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素使用順序不同,結(jié)果不同:使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素同時(shí)使用有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化細(xì)胞既分裂也分化分化頻率加快第3頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月生長(zhǎng)素>細(xì)胞分裂素:生長(zhǎng)素=細(xì)胞分裂素:
生長(zhǎng)素<細(xì)胞分裂素:2、細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素使用比例不同,發(fā)育方向不同利于根的分化和抑制芽的形成促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)有利于芽的分化、抑制根的形成第4頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月大自然為我們創(chuàng)造了千姿百態(tài)的植物,許多植物都會(huì)開(kāi)出鮮艷、芳香的花朵。月季牡丹導(dǎo)入新課第5頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月百合第6頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月你知道這些絢麗、芬芳的鮮花用人工方法是怎樣產(chǎn)生的嗎?花藥
花藥是花絲頂端膨大呈囊狀的部分,是雄蕊產(chǎn)生花粉的主要部分。第7頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月花藥培養(yǎng)采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),把發(fā)育到一定階段的花藥,通過(guò)無(wú)菌操作技術(shù),接種在人工培養(yǎng)基上,以改變花藥內(nèi)花粉粒的發(fā)育程序,誘導(dǎo)其分化,形成細(xì)胞團(tuán),進(jìn)而形成愈傷組織,隨后使愈傷組織分化成完整的植株的技術(shù)。什么是花藥培養(yǎng)呢?第8頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月課題2月季的花藥培養(yǎng)第9頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月花的結(jié)構(gòu)第10頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月閱讀:P37-38被子植物的花粉發(fā)育重點(diǎn)掌握:被子植物花粉的發(fā)育過(guò)程第11頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月花絲花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉2、由花粉母細(xì)胞(即小孢子母細(xì)胞)花粉,即:?jiǎn)伪扼w的生殖細(xì)胞。(一)被子植物的花粉發(fā)育1、雄蕊一、基礎(chǔ)知識(shí)減數(shù)分裂3、階段:四分體時(shí)期、單核期、雙核期第12頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月4、過(guò)程:減數(shù)分裂有絲分裂第13頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月花粉:是小孢子母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。1花粉母細(xì)胞4個(gè)小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核有絲分裂8個(gè)精子過(guò)程總結(jié):注意:精子和營(yíng)養(yǎng)核的基因型相同。第14頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月閱讀:P38產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑重點(diǎn)掌握:花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑第15頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化
叢芽再分化
叢芽誘導(dǎo)生根體細(xì)胞胚(胚狀體):在組織培養(yǎng)過(guò)程中,某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu),它的發(fā)育過(guò)程也與合子胚類似,胚芽、胚根、胚軸等結(jié)構(gòu)完整,就像一顆種子。這兩種途徑之間沒(méi)有絕對(duì)的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及濃度配比。第16頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、材料的選擇不同植物的誘導(dǎo)成功率不同.
同一植物的不同生理狀況也對(duì)誘導(dǎo)成功率有直接的影響.(三)、影響花藥培養(yǎng)的主要因素——材料的選擇與培養(yǎng)基的組成從花藥看:從花粉看:從花蕾看:此外,植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率有一定影響。月季的初花期(五月初到五月中旬)單核期(一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞核從中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高)完全未開(kāi)放的第17頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月選擇哪個(gè)做材料?第18頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。思考為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?第19頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)操作(一)材料的選?。ǘ┎牧系南荆ㄈ┙臃N和培養(yǎng)第20頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月閱讀教材P39-40回答以下問(wèn)題:1.如何確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期。2.確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用方法是?如果某些花粉細(xì)胞核不易著色,需要采用什么方法?能將花粉細(xì)胞核染成什么顏色?3.為什么要徹底除去花絲?4.是否一直需要光照?5.什么時(shí)候把植株移栽到新的培養(yǎng)基上?6.為什么還要進(jìn)一步的鑒定和篩選?第21頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(一)材料的選取1.選擇花藥一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。2.最常用的方法:醋酸洋紅法(將染色體染成紅色)焙花青—鉻礬法。某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青—鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。第22頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)材料的消毒5、無(wú)菌水沖洗3~5次
花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù),通常處于無(wú)菌狀態(tài)1、花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30秒2、無(wú)菌水清洗3、無(wú)菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4分鐘(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液)第23頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(三)接種和培養(yǎng)1、滅菌后花蕾,要在
下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。3、通常每瓶接種花藥
,溫度控制在
左右,
。幼小植株形成后才
。2、在剝離花藥時(shí),要盡量
(否則接種后,容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織),同時(shí)還要徹底
,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。無(wú)菌條件不損傷花藥去除花絲7-10個(gè)25℃不需要光照需要光照4、一般經(jīng)過(guò)20-30天培養(yǎng)后,會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開(kāi)裂,長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株。5、對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的幼苗進(jìn)一步的鑒定和篩選。第24頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)花藥培養(yǎng)技術(shù)相同點(diǎn)不同點(diǎn)1、離體培養(yǎng)的外植體為體細(xì)胞。2、有絲分裂的過(guò)程,染色體數(shù)量不變。1、花粉是生殖細(xì)胞,得到的單倍體植株,弱小且高度不育。2、秋水仙素處理,染色體加倍,恢復(fù)正常的染色體數(shù),為純種。離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織(或胚狀體),再分化(或分化)成叢芽,誘導(dǎo)出根,然后進(jìn)行移栽。第25頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作被子植物的花粉發(fā)育花粉雙核期其他因素接種密度小孢子四分體時(shí)期影響因素花粉發(fā)育經(jīng)歷的時(shí)期花粉囊單核期親本植株的生長(zhǎng)條件材料低溫預(yù)處理月季的花藥培養(yǎng)材料與培養(yǎng)基材料的選取產(chǎn)生途徑結(jié)果分析與評(píng)價(jià)消毒花粉培養(yǎng)條件接種和培養(yǎng)課堂小結(jié)第26頁(yè),課件共27頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說(shuō)法,不正確的是()A、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結(jié)果C、被子植物的花粉
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