玻璃器皿的清洗包扎及高壓蒸汽滅菌

玻璃器皿的清洗包扎及高壓蒸汽滅菌組員：孫中濤17徐州18孫洋20劉彩云19戚望平21

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握玻璃器皿的清洗與包扎技術(shù)。2.學(xué)習(xí)并掌握高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌的基本原理和操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理（1）滅菌是指殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學(xué)滅菌法兩大類。本實(shí)驗(yàn)主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。

加熱滅菌包括濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內(nèi)

蛋白質(zhì)凝固變性，從而達(dá)到殺菌目的。蛋白質(zhì)的凝固變性與其自身含水量有關(guān)，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，因?yàn)樵跐駸崆闆r下菌體吸收水分，使蛋白質(zhì)易于凝固；同時(shí)濕熱的穿透力強(qiáng)，可增加滅菌效力。（2）高壓蒸汽滅菌法：高壓蒸汽滅菌用途廣，效率高，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的滅菌方法。這種滅菌方法是基于水的沸點(diǎn)隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設(shè)計(jì)的。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到1.05kg/cm2時(shí)，水蒸氣的溫度升高到121℃，經(jīng)15～30min，可全部殺死鍋內(nèi)物品上的各種微生物和它們的孢子或芽孢。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和工作服等都可應(yīng)用此法滅菌。（3）干熱滅菌法：通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160～170℃維持1～2h。（4）火焰滅菌：直接用火焰灼燒滅菌，迅速?gòu)氐?。?duì)于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進(jìn)行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達(dá)到滅菌的目的。四、操作方法玻璃器皿在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。1.將平皿用紙包扎好，以5～8個(gè)為一包；（一）、玻璃器皿的清洗包扎2、吸管應(yīng)在管口約0.5厘米以下的地方塞入少許長(zhǎng)約1.5厘米的棉花，以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬的長(zhǎng)條紙的一端約與紙條成45°角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩余紙條折疊打結(jié)，待滅菌。包扎試管包扎完成3、三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結(jié)扎緊，以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染；4、試管塞上棉花塞，多支扎成一捆外用牛皮紙或兩層舊報(bào)紙與細(xì)線包。高壓蒸汽滅菌鍋（二）、干熱滅菌將包扎好的試管、平皿、三角錐瓶放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會(huì)被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60～70℃時(shí)方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂。（三）、高壓蒸汽滅菌

加水：打開滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋?zhàn)詈糜靡阎箝_過的水，以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存。注意水要加夠，防止滅菌過程中干鍋。裝料、加蓋：將待滅菌物品放好后，關(guān)閉滅菌器蓋，采用對(duì)角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。排氣：打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸后，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當(dāng)有大量蒸汽排出時(shí)，維持5min，使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。升壓、保壓和降壓：當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時(shí)，即可關(guān)閉排氣閥，壓力開始上升。當(dāng)壓力上升至所需壓力時(shí)，控制電壓以維持恒溫，并開始計(jì)算滅菌時(shí)間，待時(shí)間達(dá)到要求（一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃，20min）后，停止加熱，待壓力降至接近“0”時(shí)，打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣，否則會(huì)由于瓶?jī)?nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶?jī)?nèi)液體沖出容器之外。五、思考題

（1）吸管在滅菌前應(yīng)如何處理？

答：吸管應(yīng)在管口約0.5厘米以下的地方塞入少許長(zhǎng)約1.5厘米

的棉花，以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬的長(zhǎng)條紙的一端約與紙條成45°角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩余紙條折疊打結(jié)，待滅菌。（2）高壓蒸汽滅菌開始之前