2023年淺談CNAS-CL09：《實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明》

2023年淺談CNAS—CL09：《實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明》摘要：

微生物領(lǐng)域的相關(guān)檢測在纖檢系統(tǒng)內(nèi)尚處于起步階段。通過對CNAS-CL09：2023《實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明》部分條款的學(xué)習(xí)與探討，提高纖檢系統(tǒng)對微生物實驗室的質(zhì)控能力，為順利通過微生物實驗室評審及擴(kuò)項奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：CL09；實驗室認(rèn)可；微生物

隨著抗菌類纖維紡織品日益受到市場的關(guān)注與青睞，對于此類產(chǎn)品的檢測能力便顯得尤為重要。與食藥系統(tǒng)相比，纖檢系統(tǒng)在微生物檢測領(lǐng)域尚處于起步階段，亟待加強(qiáng)。CNAS-CL09：2023《實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明》明確了實驗室在微生物檢測領(lǐng)域的能力認(rèn)可準(zhǔn)則，對于纖檢系統(tǒng)加強(qiáng)微生物實驗室建設(shè)、順利通過微生物實驗室評審及擴(kuò)項具有現(xiàn)實指導(dǎo)意義。

1修訂背景

近年來，由致病微生物導(dǎo)致的安全事故頻發(fā)。相關(guān)法規(guī)對于實驗室生物安全的要求不斷提高，而對于技術(shù)人員專業(yè)背景（微生物相關(guān)）的要求不夠，導(dǎo)致越來越多的微生物實驗室暴露出各種問題，實際工作中矛盾日益突出。為此，國家認(rèn)可委在廣泛征求意見、充分討論的基礎(chǔ)上，對CNAS-CL09：2023進(jìn)行了修訂，既要保證微生物檢驗的準(zhǔn)確性，又要符合中國實驗室管理現(xiàn)狀，最終出臺了CNAS-CL09：2023。

CNAS-CL09：2023于2023年5月1日實施。對于初次申請和增加微生物領(lǐng)域的實驗室，自2023年1月1日起按CNAS-CL09：2023執(zhí)行；對于2023年之前提出申請的，現(xiàn)場評審可按CNAS-CL09：2023執(zhí)行。2023年5月1日至2023年12月31日為過渡期，新舊文件均可使用。自2023年1月1日起，均按CNAS-CL09：2023執(zhí)行。

2管理要求

2.1組織

生物安全實驗室[1]，是指通過規(guī)范實驗室設(shè)計建造、試驗設(shè)備配置、個人防護(hù)裝備的使用（硬件）、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和管理規(guī)程，確保操作生物危險因子的工作人員不受試驗對象傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染，確保試驗因子保持原有本性所采取綜合措施的實驗室。

根據(jù)對所操作生物因子采取的防護(hù)措施，將實驗室生物安全防護(hù)水平分為一到四級。BSL（bio-safetylevel）表示僅從事體外操作的實驗室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平[2]。纖檢系統(tǒng)的生物安全實驗室通常為二級（BSL-2），適合于從未知病原的載體上取樣的檢測和研究，可能含有高致病微生物。它是在BSL-1實驗室的基礎(chǔ)上，實驗區(qū)與辦公區(qū)的界限更加明顯，實驗室內(nèi)清潔區(qū)和污染區(qū)的區(qū)分更加明確，按國家標(biāo)準(zhǔn)或地方法規(guī)建立實驗室準(zhǔn)入門檻，制定應(yīng)急救治預(yù)案，裝備應(yīng)急救治設(shè)施。BSL-2實驗室需配置防護(hù)設(shè)備和器械，要求就近有高壓消毒鍋、可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明，要有鎖和自動閉門器、可視窗，最好使用Ⅱ級生物安全柜。

實驗室技術(shù)管理者中應(yīng)至少包括一名具有微生物專業(yè)或與微生物密切相關(guān)的本科以上學(xué)歷和三年以上微生物檢測的工作經(jīng)歷成員?！拔⑸锩芮邢嚓P(guān)專業(yè)”通常理解為上過的課程中包含微生物課，如醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、動物學(xué)、基因工程、遺傳學(xué)等，并能提供相關(guān)課程證明材料。該管理者應(yīng)具有較高的微生物檢測能力和一線工作經(jīng)歷，從而能夠指導(dǎo)或培訓(xùn)檢驗人員常規(guī)微生物試驗。

2.2管理體系

實驗室應(yīng)制定生物安全規(guī)章制度以確保生物安全，包括以下幾個方面：準(zhǔn)入制度；設(shè)施設(shè)備檢測、維護(hù)；人員健康監(jiān)護(hù)（定期體檢）；生物安全自查制度；實驗室資料檔案管理制度；生物安全管理和實驗室人員培訓(xùn)制度；意外事件處理及報告制度；實驗室安全保衛(wèi)制度等。

實驗室應(yīng)設(shè)置生物安全責(zé)任人和生物安全監(jiān)督員。生物安全責(zé)任人的作用和職責(zé)包括以下幾個方面：全面負(fù)責(zé)主管科室的實驗室生物安全管理工作；負(fù)責(zé)具體組織落實與貫徹執(zhí)行相關(guān)法律、法規(guī)、工作方案、應(yīng)急預(yù)案；負(fù)責(zé)制定與組織實施本科室實驗室生物安全管理實施細(xì)則及相關(guān)操作指導(dǎo)書；負(fù)責(zé)組織本室完成各項生物風(fēng)險評估并形成相關(guān)報告；負(fù)責(zé)本科室實驗室生物安全設(shè)施、試驗環(huán)境及個人防護(hù)用品的配備與維護(hù)；負(fù)責(zé)組織本科室實驗室生物安全業(yè)務(wù)技術(shù)、專業(yè)安全防范知識技能及安全突發(fā)事件應(yīng)急處理措施的培訓(xùn)與考核；負(fù)責(zé)本室菌種的安全管理；負(fù)責(zé)組織微生物相關(guān)實驗室有毒有害廢棄物的無害化處理；負(fù)責(zé)本室各項病原微生物生物安全風(fēng)險評估并形成評估報告等。

2.3文件控制

對于實驗室現(xiàn)場文件的控制程序，應(yīng)遵循既要拿取方便又要防止污染的原則。

2.4檢測和校準(zhǔn)的分包

實驗室可把一個檢測項目中的部分內(nèi)容進(jìn)行分包，但如該分包內(nèi)容是該項目不可分割的部分，即實驗室不具備該檢測項目的完整技術(shù)能力，則該項目不予認(rèn)可。例如沙門氏菌的檢測、多價鞭毛試驗和多價菌體試驗即為不可分割部分，血清學(xué)分型則可分包。

2.5服務(wù)和供應(yīng)品的采購

對于實驗室自制的培養(yǎng)基，例如生理鹽水等，必須有配制記錄，內(nèi)容包括：配制日期、培養(yǎng)基名稱、成分、制造商、批號、重量、分裝容量規(guī)格、數(shù)量、滅菌溫度、滅菌時間、pH值、使用人等。

對于微生物檢測來說，每一種培養(yǎng)基都是關(guān)鍵培養(yǎng)基，都要進(jìn)行技術(shù)性驗收并記錄以下內(nèi)容：產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)廠商、批號、接收日期、接收文件、產(chǎn)品外觀感官檢查、數(shù)量、啟封日期、驗收方法等。

3技術(shù)要求

3.1人員

實驗室在新人上崗前應(yīng)安排全面的體檢，包括色盲色弱。上崗證應(yīng)具體到項目，并有相關(guān)證明材料。新上崗人員及間隔一段時間重新上崗（6個月以上）的人員，可根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及實驗室條件的變化，對其重新評估。

從教育背景、專業(yè)技能、工作經(jīng)歷、現(xiàn)任崗位授權(quán)等方面對人員技術(shù)能力進(jìn)行確認(rèn)，并具有技術(shù)檔案、資格確認(rèn)、上崗考核和授權(quán)、培訓(xùn)記錄等確認(rèn)證據(jù)。

對于特殊崗位的授權(quán)，如感官評定、特種鍋爐容器、特殊設(shè)備、生物安全培訓(xùn)等，需確認(rèn)檢驗人員相應(yīng)的資格和技術(shù)能力。例如，使用的高壓蒸汽滅菌器，如其壓力容積之積不小于2.5MPa·L，則操作人員需持有特種作業(yè)人員證書。

關(guān)鍵檢測人員不僅是指直接技術(shù)檢測人員，還包括技術(shù)負(fù)責(zé)人、授權(quán)簽字人、報告校準(zhǔn)人員等。授權(quán)簽字人應(yīng)具有相關(guān)專業(yè)本科以上學(xué)歷，并具有3年以上相關(guān)工作經(jīng)歷，或具有相關(guān)專業(yè)?？埔陨蠈W(xué)歷和至少10年的微生物相關(guān)領(lǐng)域檢測工作經(jīng)歷。

實驗室應(yīng)通過培訓(xùn)班、專業(yè)實驗室進(jìn)修、學(xué)術(shù)交流等方式，制定人員培訓(xùn)教育計劃，并通過培訓(xùn)鑒定、現(xiàn)場考核、講座等形式對其進(jìn)行評價。

3.2設(shè)施和環(huán)境條件

實驗室的布局和設(shè)施應(yīng)以能獲得可靠的檢驗結(jié)果為重要依據(jù)。對于需要在潔凈條件下工作的區(qū)域，應(yīng)有效地監(jiān)控和記錄環(huán)境條件。例如，無菌室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻，工作臺面的光照度不應(yīng)低于540lx；紫外燈的數(shù)量由房間大小決定，用紫外燈照度儀定期測試紫外燈的強(qiáng)度，要求在距離標(biāo)的物1m處，照射強(qiáng)度應(yīng)不低于90lx。

不同區(qū)域的有效隔離是為防止?jié)撛诘慕徊嫖廴荆谕粓龅乜臻g分開一定的距離或不封閉的間隔，甚至是獨(dú)立的空間。對于不同的功能區(qū)和試驗用品，要有明顯、清楚的標(biāo)識加以區(qū)分，例如質(zhì)量、安全、限時、干燥、滅菌等。

3.3設(shè)備

對于微生物常用設(shè)備，要有校準(zhǔn)和頻率的要求并記錄，例如培養(yǎng)箱、水浴振蕩器等，要定期監(jiān)測溫度；高壓蒸汽滅菌鍋要監(jiān)測滅菌效果；生物安全柜、潔凈工作臺等，要定期進(jìn)行微生物和氣流的監(jiān)測。

3.4測量溯源性

實驗室必須保存有滿足試驗需要的菌株。對于菌種的申購、保管、領(lǐng)用、使用、傳代、存儲等方面，應(yīng)有文件化的程序并記錄相應(yīng)內(nèi)容。

接種傳代時須記錄好菌種名稱、接種日期、接種數(shù)量、支取數(shù)量、傳代序數(shù)、廢棄處理等信息。菌株在傳代后，要做確認(rèn)試驗，記錄其存活性、純度、生理生化鑒定（革蘭氏染色、糖類發(fā)酵試驗、乙酰甲基甲醇試驗、甲基紅試驗、吲哚試驗等）[3]。

4結(jié)語

微生物領(lǐng)域的檢測在纖檢系統(tǒng)起步較晚，還有許多不足之處亟待完善。CNAS-CL09：2023對于微生物實驗室評審和建設(shè)都具有切實的指導(dǎo)意義，值得我們認(rèn)真研讀。由于個人能力所限，對其許多條款理解不到位，希望能夠拋磚引玉，加強(qiáng)交流，共同提高纖檢系統(tǒng)微生物檢測能力。

參考文獻(xiàn)：

[1]CNAS-CL09：2023檢