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規(guī)章制度建立HPLC同時(shí)測(cè)定杭菊葉中種綠原酸類成分及木犀草苷的方法前言高效液相色譜(HPLC)是一種廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)和生物化學(xué)領(lǐng)域的常見(jiàn)技術(shù)。在植物化學(xué)研究中,HPLC被廣泛用于分離和測(cè)定植物提取物中的有效成分。本文介紹了建立規(guī)章制度用于HPLC同時(shí)測(cè)定杭菊葉中種綠原酸類成分及木犀草苷的方法。實(shí)驗(yàn)步驟材料和試劑杭菊葉干品甲醇(優(yōu)級(jí)純)乙酸乙酯(優(yōu)級(jí)純)銨的異丙醇溶液(1M,pH9.3)甘油純水儀器設(shè)備HPLC儀器紫外分光光度計(jì)0.45微米的濾紙膜0.2微米孔徑的濾膜樣品制備以杭菊葉為研究材料,取杭菊葉的凈藥材60g,粉碎,加入70%乙醇500mL,浸漬3h,于130°C真空下濃縮回收,再用水45mL洗滌沉淀,避免有機(jī)物殘留;其后,取所得粗提物,加水50mL,加熱浸泡3h,離心,取上清,水煎剩余物再加水50mL,煮沸1h,取上清離心,兩次合并上清,再加甘油5mL誘導(dǎo)分離水層,用0.45微米的濾紙膜過(guò)濾,過(guò)濾液注射高壓抽屜中,以注射瓶裝好,HPLC分析。HPLC條件色譜柱:C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)流動(dòng)相:甲醇-1M銨異丙醇溶液(72:28,v/v)流速:1.0mL/min柱溫:35°C檢測(cè)波長(zhǎng):254nm結(jié)果和討論HPLC分析結(jié)果表明,杭菊葉的主要成分是種綠原酸類成分和木犀草苷成分。使用優(yōu)化條件后,該方法能夠有效、準(zhǔn)確地測(cè)定杭菊葉中的種綠原酸類成分和木犀草苷成分。該方法為杭菊葉的標(biāo)準(zhǔn)化分析提供了參考,并為進(jìn)一步研究杭菊葉的藥理學(xué)作用奠定了基礎(chǔ)。需要注意的是,在樣品制備過(guò)程中,為了避免有機(jī)物殘留的影響,必須對(duì)提取過(guò)程中的殘?jiān)吞崛∫哼M(jìn)行洗滌處理。同時(shí),在HPLC分析中也需要注意流速的選擇,過(guò)高或過(guò)低的流速會(huì)影響分離效果。結(jié)論該方法可以建立規(guī)章制度用于HPLC同時(shí)測(cè)定杭菊葉中種綠原酸類成分及木犀草苷的方法,為杭菊葉的標(biāo)準(zhǔn)化分析提供了參考,并為進(jìn)一步研究杭菊葉的藥理學(xué)作用奠定了基
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