細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)-細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)（微生物檢驗(yàn)課件）

細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查

一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及注意事項(xiàng)不得在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)吃、喝以及裝卸隱形眼鏡等。實(shí)驗(yàn)用的冰箱中不得儲(chǔ)存飲料、食物。在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)防護(hù)衣及其它合適的防護(hù)服。實(shí)驗(yàn)室中不宜穿涼鞋、露趾鞋。操作感染性、有毒物質(zhì)或動(dòng)物時(shí)，必須戴手套。不宜將實(shí)驗(yàn)衣、手套或其它個(gè)人防護(hù)裝備穿著到實(shí)驗(yàn)室以外的場所。實(shí)驗(yàn)工作臺(tái)應(yīng)每日清理，若有污染發(fā)生應(yīng)立即進(jìn)行消毒；所有設(shè)備在使用后均必須及時(shí)清理和處理，以保持無污染狀態(tài)。所有污染物－玻璃器皿、動(dòng)物籠、實(shí)驗(yàn)裝置等，必須先經(jīng)過消毒處理(如：高壓蒸氣滅菌或化學(xué)殺菌處理)，再行清洗或重復(fù)使用。廢棄物需經(jīng)適當(dāng)之廢棄物處理流程處置。在接觸傳染性物質(zhì)、化學(xué)物質(zhì)和動(dòng)物后脫掉手套，切記洗手。嚴(yán)格無菌操作，樹立良好無菌觀念。在遇到不能處理的問題時(shí)，請(qǐng)立即與本實(shí)驗(yàn)室人員聯(lián)系以便及時(shí)采取相應(yīng)的處理或消毒措施。

顯微鏡的使用

微生物的基本特點(diǎn)：?。?/p>

決定了顯微技術(shù)是進(jìn)行微生物研究的另一項(xiàng)重要技術(shù)，因?yàn)榻^大多數(shù)微生物的個(gè)體形態(tài)及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)只能通過顯微鏡才能進(jìn)行觀察和研究。1.普通光學(xué)顯微鏡用油鏡放大1000倍，一般細(xì)菌均能清楚看到。2.暗視野顯微鏡用于檢查不染色的活細(xì)菌和螺旋體的形態(tài)及運(yùn)動(dòng)觀察。3.相差顯微鏡4.熒光顯微鏡5.電子顯微鏡

細(xì)菌特殊染色負(fù)染色法細(xì)菌的基本形態(tài)和特殊結(jié)

構(gòu)觀察

細(xì)菌基本形態(tài)－球菌細(xì)菌基本形態(tài)－桿菌細(xì)菌基本形態(tài)－弧菌細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)－芽胞細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)－莢膜細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)－鞭毛一、細(xì)菌染色標(biāo)本的檢查細(xì)菌標(biāo)本經(jīng)染色后，除能清楚看到細(xì)菌的形態(tài)、大小、排列方式外，還可根據(jù)染色反應(yīng)將細(xì)菌進(jìn)行分類。（一）染色方法的種類1、單染法:采用一種染料染色2、復(fù)染法（鑒別染色）:采用兩種或兩種以上的不同染料進(jìn)行先后染色，使不同種類的細(xì)菌、同種細(xì)菌的不同結(jié)構(gòu)，分別染上不同的顏色，以便鑒別細(xì)菌。（二）常用染料:苯環(huán)上帶有色基和助色基，色基為顏色，助色基解離后與被染物結(jié)合。1.堿性染料：美藍(lán)、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅。2.酸性染料：伊紅、酸性復(fù)紅、剛果紅。3.中性染料：堿性染料和酸性染料的復(fù)合物，伊紅美藍(lán)、伊紅天青。（三）涂片制備涂片：干燥：固定：通常用火焰加熱固定，將已干燥的涂片在火焰中迅速通過3次，以手背皮膚接觸玻片不燙為佳。涂片干燥固定染色水洗、吸干鏡檢制備涂片標(biāo)本→染色(一)單染色法只用一種染料將細(xì)菌染成一種顏色，只能觀察細(xì)菌的形態(tài)、排列、大小。1.染液：呂氏美藍(lán)液或稀釋石炭酸復(fù)紅液。2.方法：細(xì)菌涂片干燥固定，滴加染液染色1min，水洗，吸干，鏡檢。3.結(jié)果：菌體呈藍(lán)色或紅色。（二）革蘭染色最經(jīng)典、最常用的染色方法。通過革蘭染色將所有細(xì)菌分為G+菌和G-菌兩大類。革蘭陰性菌（紅色）革蘭陽性菌（紫色）（三）抗酸染色法

抗酸染色結(jié)果（×1000）：紅色為抗酸桿菌，藍(lán)色為非抗酸桿菌抗酸染色用于區(qū)別抗酸菌與非抗酸菌（四）其他染色法

1.特殊結(jié)構(gòu)染色法（1）莢膜染色法莢膜染色結(jié)果，×1000（2）鞭毛染色法鞭毛染色結(jié)果，×1000（3）芽胞染色法芽孢染色結(jié)果，×1000（4）異染顆粒染色法

異染顆粒亞甲藍(lán)染色結(jié)果：白喉棒狀桿菌，×10002.負(fù)染色法墨汁莢膜染色（腦脊液中的