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第三章蛋白質(zhì)的提取與分離中英聯(lián)合實驗室3.1蛋白質(zhì)樣品制備中英聯(lián)合實驗室樣品制備的原則1盡可能采用簡單方法,以避免蛋白丟失;2細(xì)胞和組織樣品的制備應(yīng)盡可能減少蛋白質(zhì)的降解,低溫和蛋白酶抑制劑可防止蛋白質(zhì)的降解3樣品裂解液應(yīng)新鮮制備,并分裝存于-80°C。勿反復(fù)凍融已制備好的樣品;4通過超速離心清除所有的雜質(zhì)5加入尿素之后加溫不要超過37°C,防止氨甲酰化而修飾蛋白。中英聯(lián)合實驗室溫和的裂解方法用于組成比較簡單的樣品,或分析某一特定的細(xì)胞器常用方法(1)滲透裂解:血細(xì)胞、組織培養(yǎng)細(xì)胞〔2)凍融裂解:細(xì)菌、組織培養(yǎng)細(xì)胞:液氫凍融3)去污劑裂解:用去污劑溶解細(xì)胞膜、裂解細(xì)胞,釋放內(nèi)容物;用于組織細(xì)胞(4)酶裂解細(xì)胞:植物、細(xì)菌和真菌等含有細(xì)胞壁的細(xì)胞中英聯(lián)合實驗室
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