動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞融合與單克隆抗體

動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞融合與單克隆抗體第1頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月一、動(dòng)物細(xì)胞融合

細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用第2頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。雜交細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。第3頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞A細(xì)胞B雜交細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺(tái)病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒電激聚乙二醇（PEG）第4頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞模上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理第5頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。第6頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動(dòng)物細(xì)胞融合第7頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞融合的應(yīng)用已成為研究細(xì)胞遺傳，細(xì)胞免疫，腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。第8頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月二、單克隆抗體什么是抗體？

抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。第9頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月長(zhǎng)期以來，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后，從動(dòng)物的血清中分離所需抗體。缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，而且制備的抗體特異性差。第10頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月B淋巴細(xì)胞與抗體１．B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。２．動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。

３．每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。第11頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月1僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能力同時(shí)具備呢？第12頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞第13頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第14頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月兩次篩選的目的第一次篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞以及同類型融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞。第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)的辦法篩選出來。因?yàn)轶w內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞很多種，所以需篩選出特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。第15頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。

特點(diǎn)：

特異性強(qiáng)、靈敏度高

第16頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動(dòng)物的胚胎移植解決某些妊娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問題。第17頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月胚胎移植技術(shù)試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過程卵細(xì)胞精子體外受精受精卵胚胎新個(gè)體母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出第18頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月

下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC第19頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過程如圖所示，請(qǐng)據(jù)圖回答：乙甲abcdef(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊，乙為多莉羊。那么，a和b是通過_______分裂形成的，其DNA含量是體細(xì)胞的_______；c肯定是__細(xì)胞，乙的遺傳性狀與提供___________的綿羊一致.減數(shù)一半體細(xì)胞核第20頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月乙甲abcdef(2)產(chǎn)生甲和乙的過程分別是—————和————（3）在形成乙是的過程中，需要將d的細(xì)胞核取出，將c細(xì)胞核移入d細(xì)胞內(nèi)，此技術(shù)叫———。所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞的原因是————————————————————————（4）綿羊的白色對(duì)黑色為顯色。若甲是白色綿羊，要判斷它是否純合體，選用與它交配的綿羊最好是————-------------------------有性生殖克隆核移植卵細(xì)胞大，易于操作；卵細(xì)胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛第21頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月乙甲abcdef（5）在產(chǎn)生多莉羊時(shí)，需將e細(xì)胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊（f）子宮里，這種技術(shù)在細(xì)胞工程中叫——————（6）繼植物組織培養(yǎng)后，克隆綿羊的培育成功，證明