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文檔簡(jiǎn)介
第八章兔、犬、貓和貂的傳染病第一節(jié)病毒性傳染病一、概述本節(jié)介紹的兔、犬、貓等小動(dòng)物的病毒性傳染病共17種,涉及9個(gè)病毒科,即痘病毒(兔黏液瘤?。⑾俨《荆ㄈ《拘愿窝祝?、皰疹病毒(犬皰疹病毒感染、貓傳染性鼻氣管炎)、反轉(zhuǎn)錄病毒(貓白血病和貓艾滋?。?、呼腸孤病毒(貓呼腸孤病毒感染)、冠狀病毒(犬冠狀病毒感染和貓傳染性腹膜炎)、杯狀病毒(兔病毒性出血癥、貓杯狀病毒感染)、副黏病毒(犬瘟熱、犬副黏病毒感染)、細(xì)小病毒(犬細(xì)小病毒感染、貓泛白細(xì)胞減少癥、貂病毒性腸炎、貂阿留申病)。其中較重要的有兔黏液瘤病、兔病毒性出血癥、犬瘟熱、犬病毒性肝炎、犬細(xì)小病毒感染、貂病毒性腸炎、貂阿留申病。這些病大多發(fā)病率和病死率都較高,好在目前這些病大多都有疫苗可用。二、兔黏液瘤病兔黏液瘤病(rabbitmyxonlatosis)是由黏液瘤病毒引起兔的一種高度接觸傳染性疫病,其典型特征為全身皮膚,尤其是面部和天然孔周圍皮膚發(fā)生黏液瘤樣腫脹。因切開黏液瘤會(huì)流出黏液蛋白樣滲出物而得名。本病有極高病死率,常給養(yǎng)兔業(yè)造成毀滅性損失。兔黏液瘤病是一種自然疫源性疾病,最早在1896年發(fā)現(xiàn)于烏拉圭,隨后不久即傳到巴西、阿根廷、哥倫比亞和巴拿馬等國(guó)家,至今這些國(guó)家仍然有散發(fā)病例。此后,該病傳人歐美多國(guó),到目前為止已發(fā)生過本病的至少有56個(gè)國(guó)家和地區(qū),其中以捷克和澳大利亞最為嚴(yán)重?!静≡筐ひ毫霾《荆∕yxomavirus)是痘病毒科(Poxviridae)、兔痘病毒屬(Leporipoxvirus)的成員。病毒粒子呈卵圓形或橢圓形,大小為230?280nmX75nm。病毒DNA約為160kb。負(fù)染檢查,病毒粒子表面呈串珠狀,由線狀或管狀不規(guī)則排列的物質(zhì)和含有密集電子的中心體構(gòu)成。本病毒只有一個(gè)血清型,但不同毒株的毒力和抗原性存在很大差異,弱毒株引起的死亡率低于30%,強(qiáng)毒株引起的死亡率高于90%,這種毒力的差異可能是病毒基因組大小不同造成的。強(qiáng)毒株如Larsanne株的DNA為163kb,并具有約10kh的末端重復(fù)序列(TIR),而弱毒株尤其是疫苗株可缺失多于10kb的DNA。在已鑒定的毒株中,以南美毒株和美國(guó)加州毒株具有代表性。本病毒易在10?12日齡的雞胚絨毛尿囊膜上生長(zhǎng)繁殖,并形成痘斑。南美毒株產(chǎn)生的痘斑大,加州毒株產(chǎn)生的痘斑小,黏液瘤病毒不產(chǎn)生或產(chǎn)生的痘斑很小。病毒還可在雞胚成纖維細(xì)胞、兔-腎細(xì)胞和睪丸細(xì)胞及人羊膜細(xì)胞上繁殖,產(chǎn)生典型的細(xì)胞病變,即形成胞質(zhì)包涵體和合胞體。本病毒存在于病兔全身體液和臟器中,尤以眼垢和病變部皮膚滲出物中含量最高。病毒對(duì)理化因素的抵抗力較其他大多數(shù)痘病毒低。對(duì)熱敏感,26~30℃時(shí)能存活10d,56℃經(jīng)20min或50℃經(jīng)1h以上即被滅活;對(duì)乙醚敏感;不耐pH4.6以下的酸性環(huán)境;能抵抗去氧膽酸鹽和胰蛋白酶。在干燥的黏液瘤結(jié)節(jié)中可保持毒力3周之久;8?10℃可保持毒力達(dá)3個(gè)月以上;如置50%0甘油鹽水中,則可長(zhǎng)期保持其活力。對(duì)石炭酸、硼酸、升汞和高錳酸鉀有較強(qiáng)的抵抗力,但用0.5%?2%福爾馬林處理1h則很快死亡?!玖餍胁W(xué)】本病只侵害家兔和野兔,其他動(dòng)物不易感。家兔和歐洲野兔最為易感,可引起全身嚴(yán)重性、病死率很高的疾病,棉尾兔和田兔有抵抗力,北美野兔僅引起局部良性纖維瘤。據(jù)觀察,1月齡以上幼兔較成年兔有抵抗力。病兔和帶毒兔是傳染源,與病兔或帶毒兔的直接接觸,或通過污染物的間接接觸而發(fā)生傳染。在自然界中主要是通過吸血昆蟲機(jī)械傳播,蚊子、兔蚤、刺蠅、蜱和螨等昆蟲,或許還有禿鷹和烏鴉等鳥類可傳播病毒。止匕外,可經(jīng)呼吸道飛沫傳播。本病呈季節(jié)性發(fā)生,每年8?10月.在蚊子大量滋生季節(jié),是發(fā)病高峰季節(jié).尤其是低洼潮濕地帶發(fā)病最多。冬季蚤類是主要的傳播媒介。黏液瘤病毒在兔、蚤體內(nèi)能存活105d以上,在蚊體內(nèi)可越冬。本病還有周期性趨向,每8?10年流行一次?!九R床癥狀】潛伏期4?11d,平均約5d。由于毒株間毒力差異以及兔的不同品種、品系間對(duì)病毒的易感性不同,所以臨床癥狀比較復(fù)雜。用南美強(qiáng)毒株感染時(shí),3?4d即可看到最早的腫瘤,但要6?7d才出現(xiàn)全身性腫瘤。病兔發(fā)熱、不愿活動(dòng),眼瞼、鼻、唇和耳水腫,兩眼充血、流淚,眼鼻分泌物先是乳白色呈黏性,以后發(fā)展為膿性,病兔呼吸困難、噴鼻,頭部廣泛性腫脹,呈“獅子頭”狀。肛門、母兔陰唇、公兔陰囊處顯著水腫。隨后身體多處皮下出血.出現(xiàn)腫塊。初期硬而凸起.進(jìn)而充血、破潰,流出淡黃色的漿液,病兔直到死前不久仍保持食欲。病程一般8?15d,死前出現(xiàn)驚厥。毒力較強(qiáng)的歐洲毒株感染時(shí),病兔全身各部都可出現(xiàn)腫瘤,但耳部較少見到,10d后腫瘤破潰,流出漿液性液體。顏面明顯水腫,頭呈“獅子頭”外觀。眼鼻流出漿液性或膿性分泌物。病死率100%。加州毒株感染后6?7d,病兔眼瞼、肛門、外生殖器及日鼻周圍發(fā)生炎性水腫。9?10d時(shí),皮膚出血,伴有壞死。病兔腫瘤癥狀不明顯。病死率90%以上,死前也常有驚厥。毒力較弱的南美毒株或澳大利亞毒株感染時(shí),病兔僅表現(xiàn)輕度水腫,有少量鼻液和眼垢及界限明顯的結(jié)節(jié),病死率低。自然致弱的歐洲毒株,所致疾病比較輕微,腫塊扁平,病死率較低。近年來,該病常表現(xiàn)為呼吸型。潛伏期長(zhǎng)達(dá)20~28d,經(jīng)接觸性傳染,無媒介昆蟲參與,一年四季都可發(fā)生。表現(xiàn)初期為卡他性繼而膿性的鼻炎和結(jié)膜炎,皮膚損傷輕微,僅在耳部和外生殖器的皮膚上見有炎癥斑點(diǎn),少數(shù)病例的背部皮膚有散在性腫瘤結(jié)節(jié)?!静±碜兓孔铒@著的肉眼可見病理變化是皮膚腫瘤結(jié)節(jié)(加州毒株所致的黏液瘤外)、皮膚和皮下組織水腫,尤其是顏面和身體天然孔周圍的皮下組織充血、水腫,皮下黃色膠凍狀液體聚集。心內(nèi)外膜和胃腸漿膜下可見淤血和出血點(diǎn),內(nèi)臟器官?gòu)V泛出血,有時(shí)淋巴結(jié)和肺水腫或出血,脾腫大。皮膚腫瘤切片檢查,可見許多大型的星狀細(xì)胞(未分化的間質(zhì)細(xì)胞)、上皮細(xì)胞腫脹和空泡化,同時(shí)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。在上皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有嗜酸性包涵體。包涵體內(nèi)有藍(lán)染的球菌樣小顆粒,即原生小體?!驹\斷】根據(jù)本病的特征性臨床癥狀和病理變化,結(jié)合流行病學(xué)資料可做出初步診斷。對(duì)新疫區(qū)或弱毒株所致的非典型病例或因兔群抵抗力較高,臨床癥狀和病理變化不明顯時(shí),則診斷較為困難。確診需進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)室檢查。.組織病理學(xué)診斷采取病變組織,用10%中性甲醛溶液固定,石蠟包埋后切片,HE染色,顯微鏡檢查。在黏液瘤細(xì)胞及病變部皮膚上皮細(xì)胞內(nèi)可見有胞質(zhì)內(nèi)包涵體。.病毒分離無菌采取病變組織,用磷酸鹽緩沖液清洗,按1:5?1:10研磨制成勻漿,反復(fù)凍融3次或以超聲波裂解細(xì)胞,釋放出病毒粒子或病毒抗原,懸液經(jīng)1500r/min離心10min,上清液接種兔腎原代細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞或RK13傳代細(xì)胞單層,24?48h后出現(xiàn)典型的瘤病毒細(xì)胞病變(細(xì)胞融合形成合胞體,細(xì)胞核發(fā)生變化,細(xì)胞質(zhì)包涵體)。感染細(xì)胞變圓、萎縮和核濃縮,細(xì)胞單層溶解脫壁。也可將病料接種11?13日齡雞胚絨毛尿囊膜孵育4?6d,觀察絨毛尿囊膜上病毒產(chǎn)生的灶性痘斑?;蛉⌒迈r病料磨碎后經(jīng)皮下接種幼齡易感兔,2?5d內(nèi)接種部位出現(xiàn)病損,并可用血清學(xué)方法檢查存活的兔。.瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)1%瓊脂糖磷酸鹽緩沖液高壓溶解后制成瓊脂板,打直徑5mm的小孔,分別在小孔內(nèi)加入標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和接種細(xì)胞用的被檢病料抗原。如在12?24h內(nèi)出現(xiàn)2?3條沉淀線。表明有黏液瘤病毒抗原存在。此法準(zhǔn)確率極高,適用于臨床診斷和口岸檢疫。.血清學(xué)診斷在感染后8?13d兔體內(nèi)可產(chǎn)生病毒抗體,抗體效價(jià)在20?60d時(shí)最高,在6?8個(gè)月后消失。可采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、ELISA、dot—ELISA、間接熒光抗體技術(shù)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血清中和試驗(yàn)等血清學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。.鑒別診斷主要應(yīng)與兔纖維瘤病相區(qū)別,后者用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢查時(shí)僅出現(xiàn)1條沉淀線。將前述病料人工接種易感兔,產(chǎn)生高度致死性疾病的是黏液瘤病,兔纖維瘤病僅在局部發(fā)生纖維瘤。電鏡檢查有病變部位的滲出物或涂片,觀察病毒特征性形態(tài),可與痘病毒相區(qū)別?!痉揽亍磕壳?,我國(guó)尚無此病的發(fā)生,因此應(yīng)嚴(yán)防傳人。嚴(yán)禁從有本病的國(guó)家或地區(qū)進(jìn)口兔及其產(chǎn)品。毗鄰國(guó)家流行本病時(shí),應(yīng)封鎖國(guó)境。引進(jìn)兔種及兔產(chǎn)品時(shí),應(yīng)嚴(yán)格口岸檢疫。新引進(jìn)兔必須在防昆蟲動(dòng)物房?jī)?nèi)隔離飼養(yǎng)14d,檢疫合格者方可混群飼養(yǎng)。做好兔場(chǎng)清潔衛(wèi)生工作,采取殺滅吸血昆蟲的措施,防止吸血昆蟲叮咬。嚴(yán)防野兔進(jìn)入飼養(yǎng)場(chǎng)。一旦發(fā)生本病,應(yīng)立即采取撲殺措施,并進(jìn)行徹底消毒。本病目前無特效的治療方法,預(yù)防主要依靠疫苗接種。國(guó)外使用的疫苗有Shope纖維瘤病毒疫苗或加州I及法國(guó)生產(chǎn)的弱毒疫苗,3周齡以上的兔接種,4?7d產(chǎn)生免疫力,免疫保護(hù)期5年,免疫保護(hù)率90%以上。近年來推薦使用的MSD/S株和Mml6005株疫苗,均安全可靠,免疫效果更好。三、兔病毒性出血癥兔病毒性出血癥(rabbitheorrhagicdisease,RHD)又名兔出血性肺炎、兔出血癥、兔瘟,是由兔出血癥病毒引起的一種急性、敗血性的高度接觸性傳染病。以呼吸系統(tǒng)出血,實(shí)質(zhì)器官水腫、淤血、出血和肝臟壞死為特征。該病潛伏期短、發(fā)病急、病程短、傳播快,發(fā)病率及病死率極高,對(duì)易感兔致病率可達(dá)90%,病死率可達(dá)lOO%。該病常呈暴發(fā)性流行,是兔的一種毀滅性傳染病,可給養(yǎng)兔業(yè)造成極大經(jīng)濟(jì)損失,已成為危害養(yǎng)兔業(yè)最嚴(yán)重的一種疾病。本病于1984年初首先在我國(guó)江蘇無錫等地暴發(fā),隨即蔓延到全國(guó)多數(shù)地區(qū)。此后,世界上許多國(guó)家和地區(qū)也報(bào)道了本病,迄今朝鮮、韓國(guó)、意大利、法國(guó)、德國(guó)、捷克、美國(guó)及新西蘭等國(guó)家均有本病的流行。歐洲對(duì)兔病毒性出血癥的病毒學(xué)和血清學(xué)回顧性調(diào)查發(fā)現(xiàn)1982年保存的病料中含有RHDV相關(guān)的病毒,且早于中國(guó)首次發(fā)生12?13年之前的兔血清樣品RHD抗體也呈陽(yáng)性,表明該病在歐洲的兔群中已經(jīng)存在了多年,因此該病實(shí)際上起源于歐洲?!静≡客贸鲅Y病毒(Rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)屬于嵌杯病毒科(Caliciviridae)、兔病毒屬(Lagovirus)。病毒粒子呈球形,直徑32?36nm,為二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),無囊膜,表面有短的纖突。RHDV基因組為單股正鏈RNA,全長(zhǎng)7437個(gè)核苷酸?;蚪M含有兩個(gè)開放閱讀框架(ORF),3'端的ORF編碼VPl0,含量較低。功能尚不明確。5'末端的ORF編碼一個(gè)2344氨基酸的多聚蛋白前體,該前體被病毒蛋白酶進(jìn)一步分解為衣殼蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白,其中衣殼蛋白VP60為RHDV唯一的結(jié)構(gòu)蛋白。與誘導(dǎo)抗病毒感染的免疫反應(yīng)直接相關(guān)。除基因組RNA外,在病毒顆粒和感染的組織中,還含有2.4kb的亞基因組RNA,也編碼衣殼蛋白VP60。從不同地區(qū)分離出的RHDV的基因組序列大致相同,說明病毒未發(fā)生大的變異。本病毒對(duì)綿羊、雞、鵝和人O型紅細(xì)胞有凝集作用。本病毒不能適應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)或雞胚培養(yǎng)。曾試用乳兔肝、肺、睪丸、腎等原代細(xì)胞和腎傳代細(xì)胞,IBRS—2、PK—15、MA104、Vero、Hela等傳代細(xì)胞系及兔肺二倍體細(xì)胞株進(jìn)行增殖,但均未獲得適應(yīng),不能穩(wěn)定傳代。但可以在乳鼠體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖,引起規(guī)律性發(fā)病和死亡.因此可以利用乳鼠進(jìn)行種毒保存。病毒在病兔肝組織中滴度最高,其次是脾、腎、肺等組織。本病毒對(duì)乙醚、氯仿等有抵抗力,能耐pH3和50℃40min處理;感染家兔的血液在4℃經(jīng)9個(gè)月,感染的臟器在20℃經(jīng)3個(gè)月仍保持活性,含毒的肝臟一20℃經(jīng)560d或室外污染環(huán)境經(jīng)135d仍保持有致病性。對(duì)紫外線、日光、熱敏感。常用消毒劑需作用足夠的時(shí)間,如1%氫氧化鈉需4h.1%?2%的甲醛、l%漂白粉需3h,2%農(nóng)樂需1h才能殺滅病毒?!玖餍胁W(xué)】本病僅發(fā)生于兔,長(zhǎng)毛兔尤為敏感,年齡上差異很大.主要發(fā)生于3月齡以上的青年兔或成年兔.2月齡以下仔兔,尤其吮乳兔多具有抵抗力,極少發(fā)病或不發(fā)病。病兔與帶毒兔為傳染源,其分泌物、排泄物均可帶毒,可通過直接接觸或間接接觸方式傳播。皮下注射、肌肉注射、靜脈注射、滴鼻和口服等途徑人工感染均可引起發(fā)病,一般認(rèn)為該病主要經(jīng)消化道、呼吸道、皮膚等途徑感染;蚊、蠅也可起到機(jī)械性傳播的作用,但尚無由昆蟲、嚙齒動(dòng)物或經(jīng)胎盤垂直傳播的證據(jù)。在人工接種牛和豬方面.未檢出抗體;在牛、羊、豚鼠、犬、貓、鴨、鴿、相思鳥等能測(cè)出特異性抗體;在倉(cāng)鼠、大鼠和小鼠雖無明顯癥狀,但都不同程度地有與兔相似的組織病理學(xué)變化,這些動(dòng)物可能成為隱性帶毒者。本病全年均可發(fā)生,但以氣溫較低的秋冬、春季更為多見,夏秋溫暖季節(jié)較少發(fā)生。購(gòu)進(jìn)新兔、配種、剪毛,兔毛及兔皮的購(gòu)銷等,都可促進(jìn)本病的發(fā)生和流行。病原一旦侵入易感兔群,常呈暴發(fā)性流行,來勢(shì)兇猛,幾天之內(nèi)青壯年及成年兔90%以上發(fā)病和死亡,發(fā)病率可達(dá)100%,病死率達(dá)90%。但免疫兔群如有發(fā)生,多為散發(fā)或慢性型,特點(diǎn)是病程明顯延長(zhǎng)。自然康復(fù)兔及人工感染耐過兔,能產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力?!九R床癥狀】潛伏期短.自然感染多為1?2d,人工感染時(shí)則僅需12~72h。根據(jù)其病程、臨床表現(xiàn)可分為三型。?最急性型多見于新疫區(qū)或流行初期,常無任何前驅(qū)臨床癥狀而突然發(fā)病死亡,死前抽搐慘叫四肢呈劃水狀,可視黏膜發(fā)紺,死后呈角弓反張姿勢(shì),天然孔流出泡沫狀血樣液體。病程10h以內(nèi)。?急性型多見于流行中期,體溫升高至41℃或更高,稽留數(shù)小時(shí)至24h后下降。病兔精神沉郁,被毛粗亂,伏臥籠內(nèi),食欲減退甚至廢絕,渴欲增加,呼吸困難,迅速消瘦。瀕死時(shí)也常見有神經(jīng)癥狀,如興奮、四肢強(qiáng)直、啃咬籠架、掙扎犴奔或劇烈地翻轉(zhuǎn),最后抽搐、痙攣、尖叫而死,少數(shù)兔死前肛門松弛,被毛有黃色黏液污染。病程1?2d。死后呈角弓反張.鼻孔流出泡沫性液體。.慢性型(溫和型)多見于老疫區(qū)、流行后期或幼齡兔。病兔體溫升高到41℃左右,精神沉郁、食欲不振,從鼻孔流出黏性或膿性分泌物,被毛雜亂無光.迅速消瘦、衰弱而死,多數(shù)有流涎。個(gè)別兔前肢向兩側(cè)伸開,頭抵籠底,有時(shí)拱背或癱瘓,5?6d后衰竭死亡。有的可耐過,但生長(zhǎng)發(fā)育不良,仍帶毒成為傳染源。【病理變化】本病以實(shí)質(zhì)器官淤血、出血為主要特征。肝、脾、腎等器官淤血、腫大,鼻腔、喉頭、氣管黏膜淤血及出血十分明顯,有“紅氣管”之稱;典型病例均可在氣管內(nèi)發(fā)現(xiàn)多量血色泡沫液體。肺臟高度淤血、水腫.有散在出血點(diǎn)或彌漫性出血斑,具有特征性。肝臟淤血、腫大、質(zhì)脆,呈土黃色,肝小葉問質(zhì)增寬,表面有淡黃色或灰白色條紋與壞死灶,有散在出m點(diǎn),切面粗糙;膽囊腫大,充滿膽汁。脾淤血腫大,邊緣鈍圓,呈藍(lán)紫色。腎臟也見淤血、腫大,暗紅色,表面有散在針頭大小出血點(diǎn)或灰白色或灰黃色壞死區(qū)。膀胱翠辱,充滿黃褐色尿液。心包出血、積水,心肌松弛,心內(nèi)、外膜有散在出血點(diǎn)。胃內(nèi)充滿拿糜,胃腸黏膜脫落,并有散在出血點(diǎn)和淤血塊,腸系膜淋巴結(jié)腫大,部分腸腔內(nèi)充滿淡黃色膠樣液體。胸腺水腫。母兔子宮多見出血?!驹\斷】根據(jù)本病的流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床表現(xiàn)及典型病理變化,可以做出初步診斷,確診應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。L微生物學(xué)檢驗(yàn)用無菌方法采集心血涂片鏡檢,采取肝、脾做觸片鏡檢?;?qū)⒉×辖臃N于血液瓊脂和肉湯培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24h,如未發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長(zhǎng),可排除細(xì)菌性疾病。.血凝與血凝抑制試驗(yàn)(HA和HI)無菌采取病兔的肝,剪碎后加生理鹽水制成1:10(m/V)懸浮液,凍融3次,3000r/min離心30min,取上清液做血凝試驗(yàn)。把待檢的上清液連續(xù)作2倍稀釋,然后加入1%人0型紅細(xì)胞,在22~25℃作用lh后觀察結(jié)果。以出現(xiàn)完全凝集的抗原最大稀釋度為該抗原的血凝滴度,血凝滴度大于i:160判定為陽(yáng)性。如果血凝試驗(yàn)陽(yáng)性并能被已知陽(yáng)性血清抑制,即可確診。血凝抑制試驗(yàn)多用于本病的流行病學(xué)調(diào)查和疫苗免疫效果的檢測(cè)。.其他血清學(xué)試驗(yàn)包括瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)、酶標(biāo)抗體技術(shù)、間接熒光抗體技術(shù)、玻片免疫酶染色試驗(yàn)、免疫印跡法、斑點(diǎn)El。ISA(dot-ELISA)、兔體血清中和保護(hù)試驗(yàn)等.可根據(jù)實(shí)際條件有選擇地采用。.分子生物學(xué)技術(shù)近年來,RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR已用于可疑病料中病原的快速檢測(cè),后者還能對(duì)病料中的病毒進(jìn)行定量。.鑒別診斷主要應(yīng)與兔巴氏桿菌病區(qū)別,可取病死兔的心血或肝臟、肺臟等病料作涂片,染色、鏡檢;或用病料進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定,或接種小鼠,即可做出鑒別。【防控】本病發(fā)病急、傳播迅速、流行面廣,又無特效治療方法,因此重在預(yù)防。平時(shí)堅(jiān)持自繁自養(yǎng),加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,重視飼養(yǎng)質(zhì)量,平衡飼草料營(yíng)養(yǎng)水平,在日糧中適量增加維生素A、維生素B12、維生素C、維生素E。注意避免過大的溫、濕度差,增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。強(qiáng)化獸醫(yī)衛(wèi)生防疫制度,搞好環(huán)境衛(wèi)生,做好兔舍、兔籠、用具及周圍環(huán)境的定期消毒工作,每周至少對(duì)兔舍、兔籠及周圍環(huán)境消毒一次。從無疫區(qū)購(gòu)買種兔及產(chǎn)品,引進(jìn)種兔時(shí)應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格檢疫與隔離觀察,及時(shí)注射兔瘟滅活苗。引進(jìn)后隔離觀察至少15d確認(rèn)無病時(shí)方可混群。禁止外人進(jìn)入兔房。兔群定期注射兔瘟疫苗、兔瘟和巴氏桿菌二聯(lián)菌或兔瘟、產(chǎn)氣莢膜梭菌病和巴氏桿菌病三聯(lián)苗(兔三聯(lián)苗),肌肉注射lmL/只,5?7d后產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力,免疫期可達(dá)6個(gè)月:實(shí)際生產(chǎn)中首免最好是用兔瘟單苗,聯(lián)苗作為加強(qiáng)免疫用時(shí)。一般情況下仔兔20~25日齡后,母源抗體已接近臨界值,加之本病流行有趨幼齡化傾向,故在25日齡接種兔瘟滅活苗比較合適,60日齡進(jìn)行二免。國(guó)外在新型疫苗的研究也有新的探索,例如用表達(dá)RHDV衣殼蛋白的重組兔黏液瘤病毒及用桿狀病毒、酵母系統(tǒng)表達(dá)的衣殼蛋白VP60等作為免疫原。此外,還利用兔腸內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種與RHDV抗原相關(guān)但無致病性的兔杯狀病毒,使兔獲得抗RHD的抵抗力。一旦發(fā)生兔瘟,要停止兔及兔毛交易。及時(shí)隔離病兔,封鎖疫點(diǎn),重病兔淘汰,病死兔應(yīng)焚燒或深埋,不得取皮或食用。嚴(yán)格消毒污染的環(huán)境。對(duì)未發(fā)病的兔可全群進(jìn)行緊急預(yù)防接種,以減輕損失、控制疫情。對(duì)病兔可疑兔立即注射兔瘟高免血清。對(duì)所有存欄兔用板藍(lán)根注射液2mL、鹽酸嗎啉胍注射液1?2mL混合肌肉注射,每天一次.連用3d。水槽和料槽等用0.1%新潔爾滅浸泡、刷洗,金屬籠具可用火焰噴燈徹底消毒,兔舍可用百毒殺帶兔消毒,環(huán)境、地面、籠具、用具等用1%氫氧化鈉、5%?10%漂白粉、20%石灰乳、抗毒威等消毒劑進(jìn)行徹底消毒。兔毛和兔皮可用福爾馬林熏蒸消毒或0.3%過氧乙酸噴霧消毒。四、犬瘟熱犬瘟熱(caninedisease,CD)是由犬瘟熱病毒引起犬科、鼬科和部分浣熊科動(dòng)物的急性、熱性、高度接觸性傳染病。其主要特征為雙相熱,眼、鼻、消化道等處黏膜炎癥,以及卡他性肺炎、皮膚濕疹和神經(jīng)癥狀。1905年Carre首次發(fā)現(xiàn)CDV,故本病也曾稱為Carre病。先后在銀黑狐、貉、紫貂、北極狐等動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)和確診病例。我國(guó)從1972年起陸續(xù)在水貂、狐、貉等毛皮動(dòng)物中發(fā)生犬瘟熱。國(guó)內(nèi)的熊貓、東北虎、獅子、猞猁、熊、狼、藏獒等動(dòng)物均有感染CDV的報(bào)道?!静≡咳翢岵《荆–aninedistempervirus,CDV)屬于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、麻疹病毒屬(Morbillivirus)。病毒基因組為不分節(jié)段的負(fù)鏈RNA,病毒粒子呈圓形或不規(guī)則形,有時(shí)也呈長(zhǎng)絲狀,直徑為120?300nm,其中心含有寬徑15?17nm的螺旋形核衣殼。病毒顆粒主要是由核衣殼蛋白(N或NP)、磷蛋白(P)、基質(zhì)膜蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝蛋白(H或HA)和大蛋白組成。CDV與麻疹病毒、牛瘟病毒在抗原性上密切相關(guān),但各自具有完全不同的宿主特異性。CDV能適應(yīng)多種細(xì)胞培養(yǎng)物,包括原代或繼代犬腎細(xì)胞、雪貂腎細(xì)胞、犢牛腎細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞、Vero細(xì)胞等,但毒株之間有差異,其中Vero細(xì)胞最常用。分離培養(yǎng)時(shí)需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量胰酶,并在細(xì)胞傳代的同時(shí)接毒。在犬腎細(xì)胞上,CDV產(chǎn)生的細(xì)胞病變包括細(xì)胞顆粒變性和空泡形成,形成巨細(xì)胞和合胞體,并在胞質(zhì)中(偶爾在核內(nèi))出現(xiàn)包涵體。CDV抵抗力不強(qiáng),對(duì)熱、干燥、紫外線和有機(jī)溶劑敏感,易被日光、酒精、乙醚、甲醛和來蘇兒等殺滅。50?60℃經(jīng)30min可被滅活。3%福爾馬林、5%石炭酸及3%氫氧化鈉等對(duì)病毒具有良好的殺滅作用。經(jīng)0.1%甲醛滅活后,仍能保留其抗原性。最適生長(zhǎng)pH為7.0,在pH4.5?9.0條件下可存活。在一70℃可存活數(shù)年,凍干可長(zhǎng)期保存?!玖餍胁W(xué)】在自然條件下,犬瘟熱可感染犬科(犬、澳洲野狗、狐貍、郊狼、豺、狼)、浣熊科(浣熊、長(zhǎng)吻浣熊、熊貓)和鼬科(鼬鼠、雪貂、水貂、獾臭鼬、水獺等)的多種動(dòng)物,在貓科動(dòng)物(如獅、虎、豹)中也出現(xiàn)過感染。此外,海獅和猴也能自然感染。目前,犬瘟熱的宿主范圍在不斷地?cái)U(kuò)大。病犬是最主要的傳染源,患病的毛皮動(dòng)物也具有傳染性。病毒集中存在于感染或患病動(dòng)物的唾液以及其他分泌物中。病犬的血液、淋巴結(jié)、肝脾、腹水、腦脊液等也含有病毒。水貂和犬養(yǎng)殖場(chǎng)也可能存儲(chǔ)病毒。此病主要通過消化道和呼吸道進(jìn)行傳播,也可通過眼結(jié)膜和胎盤感染。污染的飼料、飲水、墊草、食具、用具,飼養(yǎng)人員的工作服、手套,獸醫(yī)人員的體溫計(jì)、注射器及注射針頭等,均有傳播作用。飼養(yǎng)場(chǎng)內(nèi)的禽類、野鼠、家鼠及吸血昆蟲也可起傳播作用。據(jù)丹麥報(bào)道,風(fēng)亦是傳播本病的主要媒介,借助風(fēng)力可使半徑100m內(nèi)的鄰近飼養(yǎng)場(chǎng)內(nèi)的動(dòng)物發(fā)病。本病多發(fā)生于寒冷季節(jié)(每年10月到翌年的2月),但其他季節(jié)也可發(fā)生。犬最易感,毛皮動(dòng)物中,貉易感性最高,一般先發(fā)病,然后是狐和水貂。毛皮動(dòng)物流行季節(jié)主要集中在8?11月,呈散發(fā)、地方流行性或暴發(fā)。犬瘟熱病毒除了在同類物種之間傳播,還在不同群體、不同物種之間交叉?zhèn)鞑ィ€可能跨國(guó)界傳播?!局虏C(jī)制】自然感染時(shí)主要通過呼吸道上皮和飛沫傳播。病毒主要從鼻、咽進(jìn)入,在淋巴結(jié)和扁桃體中增殖,繼而在組織巨噬細(xì)胞中增殖,然后進(jìn)入血液形成病毒血癥,并擴(kuò)散到全身淋巴器官、骨髓及肝、脾,從而表現(xiàn)出一定的臨床癥狀。人工感染后24h,病毒在組織巨噬細(xì)胞內(nèi)倍增,之后從這些局限性淋巴細(xì)胞向扁桃體和支氣管淋巴結(jié)傳播。接種后2?4d,病毒主要出現(xiàn)于扁桃體、咽喉和支氣管淋巴結(jié)內(nèi)。接種后4?6d,病毒在脾臟、胃黏膜固有層、小腸、腸系膜淋巴結(jié)、肝枯否細(xì)胞的淋巴小結(jié)增殖,此時(shí)機(jī)體開始出現(xiàn)體溫升高和白細(xì)胞減少。這是由于病毒對(duì)淋巴細(xì)胞,包括T細(xì)胞和B細(xì)胞的大量破壞,引起淋巴細(xì)胞減少。在接種后8?9d,病毒進(jìn)一步傳播到上皮細(xì)胞和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的組織中,引起血液傳播。在接種后14d,動(dòng)物依賴CDV特異性抗體和細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性反應(yīng)能清除絕大部分組織中的病毒,此時(shí)臨床癥狀消失,但仍可能向外排毒?!九R床癥狀】潛伏期為3?6doCDV主要侵害易感犬的呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)以及神經(jīng)系統(tǒng)。.犬如果病毒侵害呼吸系統(tǒng)為主,病犬初期表現(xiàn)為體溫升高,并呈雙相熱,鼻端干燥,鼻、眼流漿液性至膿性液體,咳嗽,呼吸加快,肺部聽診有啰音等肺炎呼吸道癥狀(此時(shí)易被誤診為感冒或肺炎)。病犬眼瞼腫脹,呈化膿性結(jié)膜炎。后期??砂l(fā)生角膜潰瘍;有的病犬下腹部和股內(nèi)側(cè)皮膚上有米粒大紅點(diǎn)、水腫和化膿性丘疹。如果病毒侵害消化系統(tǒng)為主,則表現(xiàn)不同程度的嘔吐,初便秘,不久腹瀉,糞便惡臭,有時(shí)混有血液和氣泡。幼犬在腹瀉嚴(yán)重的情況下,往往會(huì)繼發(fā)腸套疊,少數(shù)病例此時(shí)死亡。如果病毒侵人神經(jīng)系統(tǒng),10%?30%的病犬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,由于侵害部位不同,臨床癥狀有所差異,表現(xiàn)好動(dòng)和精神異常、癲癇、轉(zhuǎn)圈(大腦受害);步態(tài)及站立姿勢(shì)異常(延髓和中、小腦受害);共濟(jì)失調(diào)和反射異常(脊髓受害);感覺過敏和頸部強(qiáng)直(腦膜受害)。常見癥狀是咀嚼肌群反復(fù)出現(xiàn)陣發(fā)性顫動(dòng),終因麻痹衰竭而死亡。這三種癥狀往往多數(shù)病例都有,隨著病情的發(fā)展,呼吸系統(tǒng)癥狀、消化系統(tǒng)癥狀和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀先后出現(xiàn),據(jù)此也可以簡(jiǎn)單的視作為病程的前、中、后期。病死率可高達(dá)30%?80%o其中神經(jīng)癥狀是不可逆的,即使病愈,也會(huì)留下麻痹、癱瘓等后遺癥。皮膚癥狀較少見,偶爾在皮膚少毛處出現(xiàn)米粒至豆粒大小的痘樣疹,水皰樣至化膿性,少數(shù)病例腳墊的表皮過度增生、角化。妊娠犬感染CDV后可出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和弱仔等癥狀。幼犬經(jīng)胎盤感染后可在28?42d產(chǎn)生神經(jīng)癥狀。新生幼犬在永久齒長(zhǎng)出之前感染CDV,可造成牙釉質(zhì)的嚴(yán)重?fù)p傷,牙齒生長(zhǎng)不規(guī)則。人工感染小于7日齡的幼犬時(shí)還可表現(xiàn)心肌病,雙目失明。.水貂按病程可分為急性型和慢性型兩類。急性型發(fā)病突然,無任何前驅(qū)癥狀。病貂表現(xiàn)癲癇樣發(fā)作,口咬籠網(wǎng),發(fā)出刺耳的尖叫聲,抽搐、口吐白沫,反復(fù)發(fā)作幾次后死亡。慢性型表現(xiàn)為食欲減退或拒食,鼻鏡干燥。眼部出現(xiàn)漿液性、黏液性乃至化膿性眼眵,病重者將眼糊死,時(shí)而睜開,時(shí)而又粘在一起,如此反復(fù)交替發(fā)生。體溫高達(dá)40?41℃,呈現(xiàn)雙相熱。病初糞便正常,或排出黏液性稀便,后期糞便呈黃褐色或煤焦油樣。病貂爪趾(指)間皮膚潮紅,隨病程發(fā)展趾(指)爪、足墊出現(xiàn)水腫,有的病貂口腔、眼瞼、肛門或外陰腫脹。獅、虎、豹等野生大型貓科動(dòng)物發(fā)生犬瘟熱時(shí),最初癥狀為食欲喪失,并發(fā)生消化道和呼吸道癥狀,病理剖檢變化與犬相同?!静±碜兓勘静∈且环N泛嗜性感染,病變分布廣泛。病理變化隨病程長(zhǎng)短、臨床病型和繼發(fā)感染的不同而異。單純感染的病犬,早期僅見胸腺萎縮與膠樣浸潤(rùn),脾臟、扁桃體等臟器中的淋巴細(xì)胞減少。繼發(fā)細(xì)菌感染的病犬,則可見化膿性鼻炎、結(jié)膜炎、支氣管肺炎或化膿性肺炎。消化道則可見卡他性乃至出血性腸炎。死于神經(jīng)癥狀的病犬,眼觀僅見腦膜充血、腦室擴(kuò)張及腦脊液增多等非特異性腦炎變化。對(duì)病犬進(jìn)行組織學(xué)檢查可以發(fā)現(xiàn),在很多組織細(xì)胞中有嗜酸性的核內(nèi)和胞質(zhì)內(nèi)包涵體,呈圓形或橢圓形,直徑1?2肛m。胞質(zhì)內(nèi)包涵體主要見于泌尿道、膀胱、呼吸系統(tǒng)、膽管、大小腸黏膜上皮細(xì)胞以及腎上腺髓質(zhì)、淋巴結(jié)、扁桃體和脾臟的某些細(xì)胞中。核內(nèi)包涵體主要見于膀胱細(xì)胞,但一般難查到。表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病犬,可見有腦血管袖套,非化膿性軟腦膜炎以及白質(zhì)出現(xiàn)空泡,浦肯野細(xì)胞變性以及小腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤病?!驹\斷】根據(jù)流行病學(xué)特點(diǎn)和臨床癥狀,可以做出初步診斷,確診需要實(shí)驗(yàn)室檢查。.包涵體檢查包涵體檢查是診斷犬瘟熱的重要輔助方法。包涵體主要存在于膀胱黏膜、支氣管上皮細(xì)胞和腎盂上皮細(xì)胞內(nèi),且多數(shù)在細(xì)胞質(zhì)內(nèi),1個(gè)細(xì)胞可能有l(wèi)?10個(gè),呈圓形或橢圓形。首選材料是靠近肺門部的支氣管組織,膀胱黏膜也是必采的病料。.電鏡及免疫電鏡檢查這是檢查CDV感染簡(jiǎn)便快速的方法,常采用磷鎢酸(PTA)負(fù)染色法、液相免疫電鏡和超薄切片法制備電鏡樣品。電鏡觀察的最佳材料是糞便,從制樣到。電鏡觀察,整個(gè)過程只需要2?3h,可用于病毒粒子的快速檢查。.病毒分離培養(yǎng)CDV是具有囊膜的病毒,結(jié)構(gòu)較脆,易被光和熱滅活,對(duì)環(huán)境的抵抗力非常弱,因此病毒的分離成功率很低。病毒分離率受病料采樣部位和時(shí)間、樣品的處理、病程類型、患病動(dòng)物的抗體水平等因素的影響。.動(dòng)物回歸試驗(yàn)雪貂最易感,病死率接近100%,任何途徑接種后均可在8?14d內(nèi)死亡。或者選用斷乳15d后的幼犬,皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀釋的病料懸液3?5mL。也可在雞胚、小鼠、倉(cāng)鼠中適應(yīng)生長(zhǎng),但敏感性較低。.血清學(xué)診斷瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、協(xié)同凝集試驗(yàn)、EUSA、免疫過氧化物酶染色法和抗體中和試驗(yàn)等血清學(xué)方法均可用于病原鑒定或抗體檢測(cè)。.分子生物學(xué)診斷國(guó)內(nèi)外均建立了RT-PCR用于檢測(cè)臨床疑似病例的血清、全血、腦脊液樣品中的犬瘟熱病毒基因,顯現(xiàn)出高度的特異性和敏感性?!痉揽亍磕壳吧袩o特效藥物治療方法。平時(shí)應(yīng)嚴(yán)格做好獸醫(yī)衛(wèi)生防疫措施,加強(qiáng)免疫注射,發(fā)現(xiàn)疫情應(yīng)立即隔離病犬,深埋或焚毀病死犬尸,用3%福爾馬林、3%氫氧化鈉或5%石炭酸等對(duì)污染的環(huán)境、用具等徹底消毒。對(duì)未出現(xiàn)癥狀的同群犬和其他受威脅的易感犬進(jìn)行緊急免疫接種。病犬及早應(yīng)用單克隆抗體或高免血清(皮下或肌肉注射,每千克體重1?3mL)、免疫球蛋白,結(jié)合使用免疫增強(qiáng)劑、抗菌藥物、皮質(zhì)激素類藥物、維生素和對(duì)癥支持療法(如輸液、輸血、脫敏、退熱、鎮(zhèn)靜、止痛、收斂及循環(huán)興奮劑等)進(jìn)行治療,配合良好的護(hù)理,對(duì)早期病犬可獲一定的療效。預(yù)防犬瘟熱的有效方法是給犬接種疫苗。犬用的疫苗有甲醛滅活疫苗、雪貂傳代的減毒活疫苗、用不同組合方式制成的多價(jià)苗和麻疹疫苗。我國(guó)目前使用的疫苗有單價(jià)苗(雞胚細(xì)胞弱毒凍干苗)、三聯(lián)苗(犬瘟熱、犬傳染性肝炎和犬細(xì)小病毒?。?、五聯(lián)苗(犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬細(xì)小病毒性腸炎、犬副流感和狂犬?。┮约奥檎蠲绲榷喾N疫苗。幼犬的免疫效果與其母源抗體水平關(guān)系很大。當(dāng)血液中中和抗體滴度下降到1:20以下時(shí)較為易感,1:100以上則不易感。因此血液中抗體效價(jià)1:100以下是免疫接種的指示滴度。在疫區(qū),缺乏初乳的犬,首免可提前到4?6周齡,一般母犬抗體效價(jià)不明的幼犬初免為9周齡,二免15周齡,以后每年加強(qiáng)免疫一次。母犬配種前免疫接種,妊娠犬一般不進(jìn)行免疫接種。在毛皮動(dòng)物中,犬瘟熱弱毒活疫苗一般于接種后7?15d產(chǎn)生抗體,30d后免疫陽(yáng)性率達(dá)到90%?100%。皮下注射的劑量為:狐、貉3mI。,仔狐、仔貉2mL,貂1mL。妊娠獸亦可接種,無不良后果。麻疹弱毒疫苗對(duì)8周齡以上的幼犬免疫效力好,注射后8h即產(chǎn)生保護(hù)力,保持免疫保護(hù)力達(dá)8月之久。所以在疫區(qū)對(duì)剛斷乳的易感犬,先注射2?3份的人用麻疹弱毒凍干苗,半個(gè)月后再以2?3周的間隔注射2?3次犬瘟熱弱毒疫苗,可獲較好的免疫效果。水貂發(fā)病時(shí),取病死水貂腦、淋巴結(jié)等組織按1:10(m/V)比例制成組織滅活苗,對(duì)貂群免疫接種?;?qū)Πl(fā)病貂及假定健康貂群用抗犬瘟熱血清進(jìn)行緊急注射,隔天連用2?3次。同時(shí)發(fā)病貂用卡那霉素、利巴韋林等進(jìn)行輔助治療,連續(xù)使用3?5d,防止繼發(fā)感染。成犬接種犬瘟熱弱毒疫苗時(shí)偶有發(fā)生接種性腦炎,母犬分娩后3d注射疫苗時(shí)易使其仔犬發(fā)生腦炎,應(yīng)予以注意。近年來,國(guó)內(nèi)外開展了對(duì)該病基因工程重組活疫苗和亞單位疫苗的研究,并證明其有免疫保護(hù)作用。五、犬傳染性肝炎犬傳染性肝炎(infectiouscaninehepatitis,ICH)又稱為犬病毒性肝炎(canineviralhepatitis,CVH),是由犬腺病毒引起的一種高度接觸性傳染病,其特征為肝小葉中心壞死,肝實(shí)質(zhì)和內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)核內(nèi)包涵體,特別是幼犬,感染發(fā)病率很高,給養(yǎng)犬業(yè)造成了巨大的損失本病最早于1947年由Rubarth發(fā)現(xiàn),所以也稱為Rubarth病。1954年由Cabasso等首次從患犬體內(nèi)成功分離到該病毒。該病廣泛分布于世界各地,發(fā)病率達(dá)40%?70%,病死率10%?40%,是養(yǎng)犬業(yè)和養(yǎng)狐業(yè)危害嚴(yán)重的疾病之一。1983年我國(guó)發(fā)現(xiàn)此?。幌南讨扔?984年首次分離到犬傳染性肝炎病毒(A8301);1989年,鐘志宏等從患腦炎的狐貍中分離到了犬腺病毒I型,即狐貍腦炎病毒。隨后,哈爾濱、北京、上海、昆明等地也相繼分離【病原】犬腺病毒(Canineadenovirus,CAV)又稱為犬傳染性肝炎病毒(Infectiouscaninehepatitisvirus),屬于腺病毒科(Adenoviridae)、哺乳動(dòng)物腺病毒屬(Mastadenovirus)。病毒基因組為線狀雙股DNA。病毒粒子直徑為70~80nm,無囊膜,呈二十面立體對(duì)稱。犬腺病毒可分為I型和^型,I型£八丫一I)引起犬傳染性肝炎和狐貍腦炎,還可引起呼吸道病、眼病、慢性肝炎和間質(zhì)性腎炎;II型3丫-II,代表株TorontoA26/6l株)只引起呼吸器官疾病,包括喉氣管炎、扁桃體炎、支氣管炎和支氣管性肺炎。CAV-I在4℃pH5?8.0時(shí)能凝集雞的紅細(xì)胞,在pH6.5?7.5時(shí)能凝集人o型紅細(xì)胞、豚鼠紅細(xì)胞和雞紅細(xì)胞,這種血凝作用能被特異性抗血清所抑制。利用這種特性可進(jìn)行血凝抑制實(shí)驗(yàn)。CAV一II僅能凝集人。型紅細(xì)胞。兩者血細(xì)胞凝集范圍不同,據(jù)此可以加以區(qū)分。本病毒易在犬腎細(xì)胞和睪丸細(xì)胞內(nèi)增殖,也可在豬、豚鼠和水貂等動(dòng)物的肺和腎細(xì)胞中增值,并出現(xiàn)CPE,主要特征是細(xì)胞腫脹變圓、聚集成葡萄串樣,也可產(chǎn)生直徑l?3|Jm的蝕斑。感染細(xì)胞內(nèi)常有核內(nèi)包涵體,但不產(chǎn)生干擾素,核內(nèi)病毒粒子呈晶格狀排列。已感染犬瘟熱病毒的細(xì)胞,仍可感染和增值本病毒。本病毒的抵抗力強(qiáng)大,對(duì)乙醚和氯仿有抵抗力;在pH3?9均可存活,最適pH6.0?8.5。在室溫下能抵抗75%乙醇達(dá)24h;在0.2%石炭酸中可存活數(shù)天。病犬肝、血清和尿液中的病毒在20℃下可存活3d,在污染物上能存活10~14d。在37℃可存活2?9d,在室溫下能存活70?91d,在4℃可存活270d。低溫條件下在50%甘油中可保存數(shù)年,凍干可長(zhǎng)期保存【流行病學(xué)】CAV-I除能感染狐和犬外,還能感染狼、貉、山犬、黑熊、負(fù)鼠和臭鼬。Shortidge等人通過血清學(xué)調(diào)查認(rèn)為馬、兔、松鼠、刺猬和黑猩猩也是犬腺病毒的易感動(dòng)物。本病毒能實(shí)驗(yàn)感染豚鼠,也能使大熊貓發(fā)生感染。人群中抗體陽(yáng)性率很高(35%),獸醫(yī)人員更高(49%),而且也能檢出補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)抗原,但不表現(xiàn)任何臨床癥狀,由此可見人也能隱性感染。不同品種和年齡的犬均易感,自然發(fā)病僅見于1歲內(nèi)未進(jìn)行免疫的犬,且病死率高于其他年齡的犬。本病無明顯季節(jié)性。病犬和帶毒犬是本病的主要傳染源。病犬在發(fā)病初期,血液含毒較多。隨后病毒見于所有分泌物和排泄物中,嚴(yán)重污染環(huán)境??祻?fù)犬腎臟中持續(xù)帶毒,可經(jīng)尿排毒達(dá)6?9個(gè)月,成為重要傳染源。本病主要通過消化道感染,也可經(jīng)胎盤感染,造成新生幼犬死亡。呼吸型犬傳染性肝炎也可能經(jīng)飛沫通過呼吸道傳播。外部寄生蟲可能也是本病的傳播媒介?!局虏C(jī)制】自然發(fā)病主要經(jīng)消化道感染。病毒通過扁桃體和小腸上皮經(jīng)由淋巴和血液而廣泛散播。肝實(shí)質(zhì)和多種組織器官的血管內(nèi)皮細(xì)胞是病毒定位和損害的主要靶細(xì)胞。肝臟是受損害的首要部位,常發(fā)生變性、壞死等退行性變化或慢性肝炎變化。病毒可在腎臟長(zhǎng)期存在,開始局限于腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞,導(dǎo)致蛋白尿,隨后出現(xiàn)在腎小管上皮細(xì)胞,引起局灶性問質(zhì)性腎炎。在疾病的急性發(fā)熱期,病毒可侵人眼而引起虹膜睫狀體炎和角膜水腫?!九R床癥狀】根據(jù)臨床癥狀可分為三型,即犬肝炎型、犬呼吸型和狐腦炎型,其中以犬肝炎型分布最廣。.犬肝炎型又稱為古典型,由CAV?I引起,潛伏期6?9d。病犬體溫升高至40?41℃,持續(xù)1d,又降至常溫,持續(xù)1d,再次升高,呈雙相熱型。心跳加強(qiáng),呼吸加快;步樣不靈活,無力,弓背;腹部有壓痛,食欲不振,口渴,腹瀉,嘔吐;眼瞼、頭、頸及腹部皮下發(fā)生水腫;扁桃體腫大,黏膜潮紅;齒齦、口腔有點(diǎn)狀出血。常有蛋白尿。白細(xì)胞數(shù)減少到健康時(shí)的1/2?2/3,血液凝固時(shí)問延長(zhǎng)。一般不發(fā)生神經(jīng)癥狀,也很少出現(xiàn)黃疸。病程較犬瘟熱短,多在感染后2?12d死亡或康復(fù),幼犬若能耐過48h則多能康復(fù)。成年犬多能耐過。在恢復(fù)期,病犬往往見角膜渾濁(眼色素層炎),1?2d內(nèi)可迅速發(fā)現(xiàn)白色乃至藍(lán)白色的角膜翳(稱為肝炎性藍(lán)眼),持續(xù)2?3d,不經(jīng)治療即可逐漸恢復(fù).不留任何痕跡。耐過犬可產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力。.犬呼吸型主要由CAV一II引起,在美國(guó)和加拿大多見。潛伏期5?6d,發(fā)熱持續(xù)1?3d。發(fā)生粗厲干咳,持續(xù)1周左右,嚴(yán)重的發(fā)生致死性肺炎。病犬表現(xiàn)精神委頓、食欲減退,呼吸困難,肌肉震顫,流漿液性或黏膿性鼻液。有些病例發(fā)生嘔吐,糞便變軟帶黏液。.狐腦炎型主要見于狐貍和黑熊等野生動(dòng)物,潛伏期6?7d,常突然發(fā)病,病程一般不超過24h,在出現(xiàn)食欲喪失后很快死亡。有時(shí)可見發(fā)熱、眼球震顫、流鼻液和腹瀉。神經(jīng)癥狀包括過度興奮、痙攣、共濟(jì)失調(diào)、麻痹、癱瘓和昏迷。發(fā)病率5%,病死率幾乎100%。每年可反復(fù)發(fā)生,造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失?!静±碜兓?犬肝炎型急性死亡病例,可見腹腔內(nèi)有血樣腹水,遇空氣則凝固。肝腫大.包膜緊張,肝小葉清晰,實(shí)質(zhì)呈黃褐色,并雜有多數(shù)暗紅色斑點(diǎn)。膽囊壁由于高度水腫而顯著肥厚,腸系膜有纖維蛋白滲出物,并可見體表淋巴結(jié)、頸淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血。脾腫大,胸腺點(diǎn)狀出血。組織病理變化主要是肝實(shí)質(zhì)呈現(xiàn)不同程度的變性、壞死,竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞核內(nèi)有富爾根(Feulgen)反應(yīng)陽(yáng)性小體.是核內(nèi)包涵體,每個(gè)核內(nèi)只有1個(gè)。有包涵體的核,核膜肥厚、濃染,包涵體和核膜之間存在狹小的輪狀透明帶。其他臟器細(xì)胞核內(nèi)也有包涵體。.犬呼吸型剖檢病變主要局限于呼吸道,肺充血和膨脹不全,并常有實(shí)變病灶。肺淋巴結(jié)和支氣管淋巴結(jié)充血或出血。鏡檢病變?yōu)椴煌潭鹊姆窝鬃兓?,支氣管黏膜上皮、肺泡上皮和鼻甲骨黏膜上皮見有CowdryA型核內(nèi)包涵體。.狐腦炎型剖檢見全身各組織、器官,尤其是腦和脊髓均有出血性變化。鏡檢見全身內(nèi)皮細(xì)胞,尤其是血管內(nèi)皮受損嚴(yán)重,主要表現(xiàn)內(nèi)皮變性、壞死和出血,腦脊髓和軟腦膜血管呈袖套現(xiàn)象。在各器官的內(nèi)皮細(xì)胞特別是血管內(nèi)皮、腦膜和肝細(xì)胞內(nèi)也可發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體。本型病例神經(jīng)癥狀的明顯程度與腦血管受損輕重呈正相關(guān)?!驹\斷】根據(jù)流行病學(xué)、臨床表現(xiàn)和病理變化特點(diǎn),可做出初步診斷,但確診有賴于病毒分離和血清學(xué)檢查。.病毒分離和鑒定可采取發(fā)熱期的血液和尿液,扁桃體拭子或死亡動(dòng)物的肝、脾等材料,處理后接種犬腎原代細(xì)胞或繼代細(xì)胞,細(xì)胞病變最早出現(xiàn)于接毒后30h,但有時(shí)需6?7do應(yīng)用中和試驗(yàn),可進(jìn)一步鑒定病毒的型。.病毒抗原的檢查應(yīng)用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),可檢出急性病犬肝臟、血清、腹水及細(xì)胞培養(yǎng)物中的病毒抗原。對(duì)于病死動(dòng)物,可用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢查感染組織塊(一般使用肝組織塊)中的特異性沉淀原。應(yīng)用熒光抗體技術(shù),可以直接檢測(cè)扁桃體涂片,以提供早期診斷。還可用電鏡直接檢查病犬肝臟中的典型腺病毒粒子。.血清學(xué)檢查采取發(fā)病初期和其后14d的雙份血清,進(jìn)行人0型紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn),當(dāng)抗體升高4倍以上時(shí)即可作為現(xiàn)癥感染的證明。此外,上述補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、中和試驗(yàn)及皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)等亦可用于診斷。.PCR通過選擇基因序列的保守區(qū)(如六鄰粒蛋白基因)設(shè)計(jì)出能對(duì)所有腺病毒進(jìn)行特異性擴(kuò)增的引物,可以區(qū)分CAV—I、CAV—II及其他病毒。.鑒別診斷本病的犬肝炎型早期臨床癥狀與犬瘟熱、鉤端螺旋體病相類似,且有時(shí)混合感染,應(yīng)注意區(qū)別?!痉揽亍勘静o特異性療法,一般采用補(bǔ)液、保肝、輸血、輸液、注射葡萄糖、投給蛋氨酸、膽堿、膽汁酸鹽等對(duì)癥療法,以抗生素預(yù)防繼發(fā)感染。在發(fā)病早期,可用高免血清皮下或肌肉注射或用免疫犬全血、血球蛋白靜脈滴注,有較好的療效。對(duì)CAV一II引起的呼吸道感染的治療同犬副流感,抗生素可選用林可霉素、先鋒霉素、泰妙菌素或利高霉素等。人工接種疫苗是預(yù)防本病的根本方法。我國(guó)當(dāng)前使用的是犬傳染性肝炎與犬瘟熱、狂犬病、犬細(xì)小病毒性腸炎、副流感的五聯(lián)苗。幼犬于6?8周齡時(shí)進(jìn)行初次免疫,10?12周齡時(shí)進(jìn)行第二次免疫,13?15周齡時(shí)進(jìn)行第三次免疫。成年犬每年免疫一次,即可達(dá)到有效的免疫目的。六、犬細(xì)小病毒病犬細(xì)小病毒病(canineparvovirusdisease)是犬細(xì)小病毒(CPV)引起犬的一種高度接觸性傳染病。對(duì)幼犬危害較大,發(fā)病率和病死率較高。本病可分為腸炎型和心肌炎型,腸炎型以劇烈嘔吐、小腸出血性壞死性炎和白細(xì)胞顯著減少為特征,心肌炎型則表現(xiàn)為急性非化膿性心肌炎。1977年,Eugster和Naira在美國(guó)通過電鏡在出血性腹瀉犬的糞便中首先發(fā)現(xiàn)了細(xì)小病毒粒子。1978年,McCandlish首次應(yīng)用犬腎細(xì)胞從患有腸炎的病犬中分離出細(xì)小病毒。現(xiàn)在世界各地都有本病暴發(fā)的報(bào)道,給養(yǎng)犬業(yè)造成極大威脅,是危害犬群的最主要傳染病之一。我國(guó)于1982年首次分離出犬細(xì)小病毒,隨后本病在東北、華北和西南等地區(qū)的警犬和良種犬中陸續(xù)發(fā)生和報(bào)道?!静≡咳?xì)小病毒(Canineparvovirus,CPV)屬于細(xì)小病毒科(Parvoviridae)、細(xì)小病毒屬(Parvovirus)。CPV粒子呈圓形或六邊形,直徑為21?24nm。二十面體對(duì)稱,由32個(gè)長(zhǎng)為3?4nm的殼粒組成,無囊膜。病毒基因組為單股線狀DNA,全長(zhǎng)5323bp,含有兩個(gè)開放閱讀框(ORF),分別編碼結(jié)構(gòu)蛋白VPl、VP2和非結(jié)構(gòu)蛋白NSl、NS2。空衣殼蛋白中只含有VPl、VP2兩種蛋白,在衣殼裝配和病毒基因組包裝之后的完整的病毒粒子中還含有VP3多肽。犬細(xì)小病毒具有2個(gè)型:CPV-1和CPV-2。CPV-1在宿主細(xì)胞范圍、特異性凝集紅細(xì)胞、基因特征和抗原性等方面與PcV-2有顯著的區(qū)別。cPV-1與cPV-2是不同的病毒,用幾種限制性內(nèi)切酶分析兩者的DNA證明它們沒有同源性。CPV-2可引起高接觸性并常常是致死性的疾病,該病毒不斷分化、變異,可分為CPV-2a、cPV-2b、CPV-2c3個(gè)亞型,目前多數(shù)地區(qū)以CPV-2a和CPV-2b為主要流行株。CPV具有較強(qiáng)的血凝活性,在4℃條件下可凝集豬和恒河猴的紅細(xì)胞。因此,血凝和血凝抑制試驗(yàn)常用于犬細(xì)小病毒鑒定和血清學(xué)分析。CPV在抗原性上與貓泛白細(xì)胞減少癥病毒(FPV)和水貂腸炎病毒(MEV)密切相關(guān)。與多數(shù)細(xì)小病毒不同,CPV可在多種細(xì)胞培養(yǎng)物中生長(zhǎng),如原代貓?zhí)ツI、肺細(xì)胞,原代犬胎腸細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、MDCK細(xì)胞以及F81細(xì)胞增殖,以F81和MDCK等傳代細(xì)胞常用于CPV分離培養(yǎng)。細(xì)小病毒的DNA復(fù)制發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi),其復(fù)制過程出現(xiàn)于細(xì)胞周期的S期。所以當(dāng)體外進(jìn)行該病毒培養(yǎng)傳代時(shí),必須同步接種到細(xì)胞傳代培養(yǎng)物,這樣才能達(dá)到使病毒增殖的目的。CPV對(duì)多種外界理化因素有較強(qiáng)的抵抗力。在pH為3~11范圍內(nèi)穩(wěn)定。能耐受65℃加熱30min而不喪失感染性,低溫長(zhǎng)期存放對(duì)其感染性無明顯影響??稍跓o生命物體如衣物、食盤、籠子的地板上存活5個(gè)月乃至更久,在糞便中可存活數(shù)月乃至數(shù)年。對(duì)乙醚、醇類、氯仿、去氧膽酸鹽有抵抗力。甲醛、羥胺、氧化劑和紫外線均可將其滅活?!玖餍胁W(xué)】犬是主要的自然宿主,也有浣熊、貂、貉、狐、狼和鬣狗等感染發(fā)病的報(bào)道。豚鼠、倉(cāng)鼠、小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也可感染。人工感染可致水貂和貓發(fā)病。CPV-2的3個(gè)亞型均可感染貓,從日本、德國(guó)和美國(guó)貓細(xì)小病毒感染病例中的分離成功率可達(dá)10%?20%。CPV主要感染犬,不同年齡、性別、品種的犬均可以感染,但以6周至6月齡的幼犬較多發(fā),病情也更為嚴(yán)重。引起犬全身性和腸道感染。斷乳前后的仔犬易感性最高,往往以同窩暴發(fā)為特征。3~4周齡犬感染后呈急性致死性心肌炎的為多;8?10周齡的犬則以腸炎為主。小于4周齡的仔犬和大于5歲齡的老犬發(fā)病率較低(分別為2%和16%)。純種犬比雜種犬和土犬易感性高。病犬和帶毒犬是傳染源,在CPV-2感染3?4d后開始,即在臨床癥狀出現(xiàn)之前就可排毒.病犬可通過糞便、尿、唾液和嘔吐物排毒。在7?10dCPV在糞便中的排毒量達(dá)到最大,傳染性最強(qiáng)。發(fā)病急性期,嘔吐物和唾液中也含有病毒。9?14d后排毒量趨于減少,但傳染性可持續(xù)30d到8個(gè)月。發(fā)生過病毒血癥的康復(fù)犬仍可通過糞尿向外長(zhǎng)期排毒??祻?fù)后的病犬往往是被人們忽視的傳染源,無癥狀的帶毒犬也是重要的傳染源。有證據(jù)表明人、虱、蠅、蚊和蟑螂可成為CPV的機(jī)械攜帶者。需要強(qiáng)調(diào)的是,CPV可以由犬傳染給貓,而貓感染后很少出現(xiàn)臨床疾病,因此貓作為傳染源和環(huán)境污染源的作用不可輕視。在自然條件下,消化道是主要的感染途徑,經(jīng)胎盤垂直感染也有可能。一年四季均可發(fā)病,但以冬春和冬季多發(fā)。另外,群居犬比家庭寵物犬多發(fā)。在新疫區(qū)可導(dǎo)致暴發(fā)性流行,病死率較高。飼養(yǎng)管理?xiàng)l件驟變、衛(wèi)生不良、長(zhǎng)途運(yùn)輸、寒冷、擁擠均可促使本病發(fā)生?!局虏C(jī)制】關(guān)于犬細(xì)小病毒的致病機(jī)制目前尚不清楚,一般認(rèn)為CPV對(duì)快速分裂的細(xì)胞有嗜性,哺乳幼犬心肌迅速生長(zhǎng),而腸上皮很少更新,因此CPV感染可導(dǎo)致心肌炎;但有學(xué)者認(rèn)為心肌細(xì)胞在幼犬出生后是不分裂的,心肌中的衛(wèi)星細(xì)胞對(duì)CPV的復(fù)制可提供DNA功能的需要。犬細(xì)小病毒主要通過消化道感染。病毒首先在口咽、局部淋巴組織(如扁桃體),然后在胸腺和腸系膜淋巴結(jié)復(fù)制,并通過病毒血癥散播到小腸的隱窩。感染后1?5d即可出現(xiàn)病毒血癥。CPV-2主要集中在口腔和食管的黏膜上皮,小腸的淋巴組織以及胸腺、淋巴結(jié)和骨髓。有時(shí)可以從肺臟、脾臟、肝臟、腎臟和心肌中分離到病毒。血清抗體效價(jià)最早可于感染后3?4d就檢測(cè)到,并且至少可以維持1年。正常情況下,犬細(xì)小病毒在腸道內(nèi)可殺死腸腺上皮細(xì)胞,使上皮脫落、絨毛變短,導(dǎo)致出血性、壞死性腸炎,臨床上表現(xiàn)嘔吐和腹瀉。嚴(yán)重感染的病例,通常會(huì)發(fā)生嗜中性粒細(xì)胞減少癥和淋巴細(xì)胞減少癥。繼發(fā)革蘭陰性和需氧兼厭氧的細(xì)菌感染會(huì)引起與腸損傷、菌血癥、內(nèi)毒素血癥以及彌散性血管內(nèi)凝血相關(guān)的綜合性癥狀?!九R床癥狀】CPV感染在臨床上表現(xiàn)各異,單純細(xì)小病毒感染臨床癥狀較輕,多數(shù)病例是由于細(xì)菌、寄生蟲混合感染或繼發(fā)感染而出現(xiàn)明顯癥狀。本病在臨床上分為兩個(gè)型,即腸炎型和心肌炎型,多數(shù)呈現(xiàn)腸炎綜合征,少數(shù)為心肌炎綜合征。個(gè)別病例也兼有兩種臨床癥狀。有時(shí)某些腸炎型病例也伴有心肌炎變化。有些不表現(xiàn)臨床癥狀。.腸炎型潛伏期自然感染的為7?14d,人工感染的4?5d。多見于青年犬。CPV-2型腸炎的病程迅速。尤其是感染CPV-2新的毒株。病初精神沉郁,食欲廢絕,體溫升到40℃以上。嚴(yán)重嘔吐,初期嘔吐物為食物,隨后伴有黏液或血液。接著出現(xiàn)腹瀉,并迅速出現(xiàn)脫水。糞便先為黃色或灰黃色,覆以多量黏液、偽膜和血液,接著呈番茄汁樣,具有難聞的腥臭味。同時(shí)排便次數(shù)明顯增多。排尿量減少,呈茶色。血液濃稠,血清總蛋白減少,但氨基轉(zhuǎn)移酶指數(shù)上升,白細(xì)胞減少癥具有特征性,尤其在病初的4?5d內(nèi),減少顯著,為50()?2000個(gè)mm3,并出現(xiàn)大量的異型淋巴細(xì)胞,呈典型的病毒感染血象(正常犬血液中白細(xì)胞數(shù)為6000?17000個(gè)/mm3),有一定的參考意義。對(duì)于腸道出血嚴(yán)重的病例,由于腸內(nèi)容物腐敗可造成內(nèi)毒素中毒和彌散性血管內(nèi)凝血,加之病犬反復(fù)嘔吐,迅速脫水、休克,出現(xiàn)心音減弱,呼吸困難,可視黏膜蒼白,體溫降至常溫以下,急性衰竭而死。病程短的2?5do長(zhǎng)的1月以上,病死率達(dá)40%?50%。有些病犬只表現(xiàn)問歇性腹瀉或僅排軟便。較小的幼齡犬不會(huì)出現(xiàn)嘔吐,但其病死率很高。成年病犬一般不發(fā)熱,病情較輕且治愈率高。.心肌炎型多見于8周齡以下、剛斷乳的幼犬,常突然發(fā)病.數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。通常同窩的幼犬都可感染。在腸炎型中可能突然發(fā)生心力衰竭而沒有任何先兆。感染犬精神、食欲正常,偶見嘔吐,或有輕度腹瀉和體溫升高,或有呼吸困難,持續(xù)20?30min。脈快而弱,可視黏膜蒼白。聽診心律不齊。心電圖R波降低,S-T波升高。常因急性心力衰竭而死亡。血液生化檢查,天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶活性增高。病死率60~100%,只有極少數(shù)輕癥病例可以治愈?!静±碜兓?腸炎型眼球下陷?腹部蜷縮,極度消瘦脫水,肛門周圍黏附血樣稀便。血液黏稠呈暗紫色。病理變化主要見于空腸、回腸,腸腔大多無食糜,部分犬十二指腸內(nèi)含少量黃綠色半透明黏液或黏液與食糜的混合物。腸壁增厚,黏膜水腫。腸黏膜呈黃白色或紅黃色,彌漫性或局灶性充血,有的呈斑點(diǎn)狀或彌漫性出血。腸絨毛明顯萎縮,黏膜上被覆稀薄或黏稠的黏液。集合淋巴小結(jié)腫脹、凸出。小腸、結(jié)腸腸系膜淋巴結(jié)腫脹、充血、出血。大多數(shù)病犬的盲腸、結(jié)腸、直腸黏膜腫脹,呈黃白色。結(jié)腸和直腸內(nèi)容物稀軟,醬油色,腥臭或惡臭。有的結(jié)腸和直腸黏膜表面散在針尖大出血點(diǎn)。.心肌炎型病變主要局限于心臟和肺。心臟擴(kuò)張,心房和心室內(nèi)有淤血塊。心房、心室有界限不明顯的蒼白區(qū),心肌上有灰色條紋。心肌和心內(nèi)膜有非化膿性心肌炎,在心肌內(nèi)有多灶性淋巴細(xì)胞和血細(xì)胞浸潤(rùn)并有壞死灶。心肌纖維嚴(yán)重?fù)p傷,出現(xiàn)出血性斑紋。心肌損傷部位的細(xì)胞內(nèi)常見核內(nèi)包涵體。肺水腫,由于局灶性充血、出血,致使肺表面色彩斑駁。【診斷】根據(jù)流行特點(diǎn),結(jié)合臨床癥狀和病理變化可以做出初步診斷,確診需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。.病料處理取病犬糞液或?yàn)l死期撲殺犬的腸內(nèi)容物,分為兩份:一份負(fù)染后直接用電鏡檢查,在疾病初期可見到大量大小均一的直徑20~24nm的圓形病毒粒子;疾病后期由于腸黏膜分泌性抗體的出現(xiàn),??梢姷酱髩K聚集狀態(tài)的病毒粒子。另一份加高濃度抗生素除菌,或加適量氯仿于4c過夜處理,離心后用于病毒分離。經(jīng)氯仿處理的糞便標(biāo)本還可直接做紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)。.病毒分離將病毒處理后接種MDCK細(xì)胞或F81細(xì)胞,分離病毒,觀察細(xì)胞病變及核內(nèi)包涵體。注意在含毒樣品中加入胰蛋白酶消化的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行同步培養(yǎng)。如果沒有明顯細(xì)胞病變,應(yīng)繼續(xù)盲傳2代才能做出結(jié)論。通??刹捎脽晒饪贵w技術(shù)或血凝試驗(yàn)鑒定新分離的病毒。.血凝試驗(yàn)利用犬細(xì)小病毒能凝集豬紅細(xì)胞的特性,常用微量血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)快速檢測(cè)糞便中的CPV和細(xì)胞培養(yǎng)物中的病毒。以0.5%?1%豬紅細(xì)胞作為指示系統(tǒng),HA效價(jià)>1:80可作為陽(yáng)性感染的標(biāo)準(zhǔn)。血凝抑制試驗(yàn)還可用于流行病學(xué)調(diào)查和抗體檢測(cè)。當(dāng)發(fā)病初期與發(fā)病后期血清抗體效價(jià)相差4個(gè)滴度,則有診斷意義。.ELISA有間接法、競(jìng)爭(zhēng)法和雙夾心法等,我國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院已研制成功犬細(xì)小病毒病快速診斷試劑盒。它是采用單抗和多抗雙夾心酶標(biāo)法,以單克隆與多克隆抗體相結(jié)合,可在30min內(nèi)定性檢出犬糞便中的CPV,達(dá)到快速診斷的目的。其他的血清學(xué)診斷方法如熒光抗體技術(shù)、對(duì)流免疫電泳、中和試驗(yàn)等也可用于本病的診斷。.PCR目前已研制出犬細(xì)小病毒PCR診斷試劑盒,通過特異性引物設(shè)計(jì),可以區(qū)分CPV弱毒疫苗株和野毒株,還可區(qū)別出CPV―2a和CPV一2b等不同亞型。.鑒別診斷本病應(yīng)注意與犬瘟熱、犬病毒性肝炎以及冠狀病毒感染相區(qū)別。特別是發(fā)病初期該病易與犬瘟熱混淆,因此臨床上必須結(jié)合腹瀉特征、嘔吐特點(diǎn)進(jìn)行鑒別診斷,避免造成誤診。犬細(xì)小病毒感染的犬其嘔吐物為黃色泡狀液體,排泄物為番茄醬樣稀糞,病犬食欲廢絕,腹部有壓痛,鼻鏡干燥、流清涕,結(jié)膜淡紅或蒼白,體溫一般正常,肺部無明顯變化,無神經(jīng)癥狀;患犬瘟熱的犬嘔吐物為膽汁狀液體,排黏液樣便,腋下有膿皰狀丘疹.流膿性鼻液,結(jié)膜暗紅有膿性分泌物,體溫升高、稽留,肺部剖檢有明顯病變,伴有震顫、抽搐、癲癇、痙攣等明顯的神經(jīng)癥狀?!痉揽亍?治療心肌炎型大多預(yù)后不良,只要出現(xiàn)心電圖變化都難免死亡。發(fā)現(xiàn)腸炎型病例應(yīng)立即隔離飼養(yǎng),加強(qiáng)護(hù)理,采用對(duì)癥療法、支持療法(如補(bǔ)液以防止酸中毒)和防止繼發(fā)感染等治療措施,可較快解除臨床癥狀和縮短病程,降低病死率。在實(shí)行強(qiáng)心、補(bǔ)液、抗菌、消炎、抗休克等綜合療法的同時(shí),應(yīng)注意病初應(yīng)禁食1?2d;恢復(fù)期應(yīng)控制飲食,給予易消化的食物,并少量多餐,嚴(yán)格限制病犬?dāng)z取難以消化的肉、蛋、奶等食物,多喝糖水或清潔飲水,逐漸恢復(fù)正常飲食。同時(shí),也要注意保暖。污染的犬舍需用2%?4%的NaOH溶液或10%?20%漂白粉溶液,反復(fù)消毒、徹底消毒并空欄1個(gè)月后,方可啟用。.預(yù)防主要依靠疫苗注射和嚴(yán)格的檢疫制度。目前國(guó)內(nèi)使用的疫苗有同源和異源滅活疫苗及弱毒疫苗兩類。異源苗是指貓泛白細(xì)胞減少癥滅活疫苗或弱毒疫苗,安全可靠,曾在法國(guó)和澳大利亞等國(guó)家廣泛使用過?,F(xiàn)在國(guó)外多傾向于使用同源苗,即犬細(xì)小病毒滅活疫苗或弱毒疫苗。國(guó)內(nèi)也有多家單位生產(chǎn)單價(jià)疫苗、二聯(lián)苗(犬細(xì)小病毒病和傳染性肝炎)、三聯(lián)苗(犬瘟熱、犬細(xì)小病毒病和犬傳染性肝炎)和五聯(lián)苗(犬瘟熱、犬細(xì)小病毒病、犬傳染性肝炎、狂犬病和犬副流感)。滅活疫苗一般要接種兩次,間隔2?3周;弱毒疫苗接種一次,幼犬于7?8周齡首免,以后每年加強(qiáng)免疫一次。隨著細(xì)小病毒的范圍不斷增大,病原體在有選擇壓力的情況下變異也越來越復(fù)雜。CPV弱毒疫苗已不能獲得令人滿意的免疫效果,目前國(guó)內(nèi)外正在開展CPV基因工程疫苗的研究,并已取得初步成果。七、犬冠狀病毒性腹瀉犬冠狀病毒性腹瀉(caninecoronavirusdiarrhea)又稱為犬冠狀病毒病(caninecoronavirusdisease),是由犬冠狀病毒引起的一種臨床上以嘔吐、腹瀉、脫水及易復(fù)發(fā)為特性的高度接觸性傳染病。該病對(duì)幼犬危害尤其嚴(yán)重,病死率很高,是目前對(duì)養(yǎng)犬業(yè)危害較大的疾病之一1974年,美國(guó)的Binn等首先從腹瀉的德國(guó)軍犬中檢出犬冠狀病毒,后英國(guó)、德國(guó)、比利時(shí)、法國(guó)等多個(gè)國(guó)家和地區(qū)相繼有大規(guī)模流行的報(bào)道。我國(guó)直到1997年才首次分離到該病毒?!静≡咳跔畈《?Caninecoronavirus,CCV)屬于冠狀病毒科(Coronaviridae),冠狀病毒科(Coronavirius),具有冠狀病毒的一般特征,呈圓形或橢圓形,長(zhǎng)徑80?120nm,寬徑75?80nm,有囊膜,囊膜表面有花瓣?duì)罾w突,長(zhǎng)約20nm,凍融極易脫落,從而失去感染性。核衣殼呈螺旋狀。病毒基因組為單股RNA。病毒在氯化銫中的浮密度為1.15?1.16g/mL。本病毒只有一個(gè)血清型,但不同的毒株間毒力有所不同。本病毒與豬傳染性胃腸炎病毒、貓傳染性腹瀉病毒和人冠狀病毒229E株有抗原相關(guān)性。本病毒能在犬腎和胸腺原代細(xì)胞及A72、CRFK等傳代細(xì)胞系上增殖,并產(chǎn)生CPE。病毒在宿主的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)復(fù)制,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)空泡膜上出芽成熟。本病毒可被大多數(shù)去污劑和消毒劑滅活;對(duì)氯仿、乙醚、脫氧膽酸鹽敏感;對(duì)熱敏感,在糞便中.20℃時(shí)大約40h后就會(huì)喪失感染性,在戶外0c以下很長(zhǎng)時(shí)問仍然具有感染性,4c冷藏可存活60h;用甲醛、紫外線、0.1%過氧乙酸及1%克遼林等可在短時(shí)間將其滅活;對(duì)胰蛋白酶和酸有抵抗力?!玖餍胁W(xué)】可感染人和很多種類的動(dòng)物,包括牛、豬、犬、貓、馬、禽、鼠。犬科動(dòng)物最易感,如犬、貂和狐貍等。本病的發(fā)生無品種、年齡、性別之分,但在犬群中流行時(shí),通常都是幼犬先發(fā)病,然后波及其他年齡的犬。幼犬的發(fā)病率和病死率均高于成年犬,發(fā)病率幾乎100%,病死率50%。病犬和帶毒犬是主要傳染源。病毒通過直接接觸和間接接觸,經(jīng)呼吸道和消化道傳染給健康犬及其他易感動(dòng)物。感染犬可通過糞便排毒2周或更長(zhǎng)時(shí)間,傳染性糞便污染的環(huán)境是傳染的主要原因。本病一年四季均可發(fā)生,但多發(fā)于寒冷的季節(jié),傳播迅速,數(shù)日內(nèi)常成窩暴發(fā)。氣候突變,衛(wèi)生條件差,犬群密度大,斷乳轉(zhuǎn)舍及長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)瓤烧T發(fā)本病?!局虏C(jī)制】感染3?14d的犬的糞便中即可分離到CCV。經(jīng)口接種病毒2d后,CCV到達(dá)十二指腸上部,主要侵害小腸絨毛2/3處的消化吸收細(xì)胞。病毒經(jīng)胞飲作用進(jìn)入微絨毛之間的腸細(xì)胞,在胞質(zhì)空泡的平滑膜上出芽。由于細(xì)胞膜破裂,病毒隨脫落的感染細(xì)胞進(jìn)入腸腔內(nèi),再感染小腸整個(gè)腸段的絨毛上皮細(xì)胞,進(jìn)而絨毛短粗、扭曲、脫落,腸黏膜由不斷增加的不成熟的細(xì)胞替代,消化酶和腸吸收功能喪失,導(dǎo)致腹瀉。以后隨著小腸結(jié)構(gòu)的復(fù)原,臨床癥狀消失,排毒減少并終止,血清中產(chǎn)生中和抗體。【臨床癥狀】潛伏期很短:自然感染1?4d,人工感染只有24?48h。本病的臨床表現(xiàn)差別很大,與種類、年齡和性別有關(guān)。通常是2歲齡以下的犬感染,主要表現(xiàn)為嘔吐和腹瀉,嚴(yán)重者精神不振,嗜睡,食欲減少或廢絕,口渴、鼻鏡干燥,多數(shù)無體溫變化。感染犬通常突然開始腹瀉,問有嘔吐,嚴(yán)重的病例會(huì)出現(xiàn)水樣腹瀉,繼而出現(xiàn)脫水和電解質(zhì)紊亂,同時(shí)伴有視覺和嗅覺障礙。糞便呈粥樣或水樣,紅色或暗褐色,或黃綠色,惡臭,混有黏液或少量血液。血液白細(xì)胞數(shù)正常。病程7?10d,有些病犬尤其是幼犬發(fā)病后1?2d內(nèi)死亡,成年犬很少死亡?!静±碜兓枯p度感染不明顯,嚴(yán)重的病例腸壁菲薄,腸管膨脹,充滿稀薄、黃綠色或紫紅色血樣液體。胃腸黏膜充血、出血和脫落,胃內(nèi)有黏液。腸系膜淋巴結(jié)和膽囊腫大。組織病理學(xué)檢查主要見小腸絨毛變短、融合,隱窩變深,絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度之比發(fā)生明顯變化。腸黏膜上皮細(xì)胞變平或變性,胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,杯狀細(xì)胞破損。固有層水腫,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)?!驹\斷】根據(jù)臨床癥狀,結(jié)合流行病學(xué)、病理變化可做出初步診斷,確診需要借助實(shí)驗(yàn)室手段。.電鏡檢查采集病犬新鮮腹瀉糞便,離心取上清,負(fù)染后電鏡觀察可發(fā)現(xiàn)典型的冠狀病毒。收集病料要早,7d后病毒含量減少。.病毒分離鑒定應(yīng)用犬原代腎細(xì)胞、胸腺細(xì)胞分離冠狀病毒,可觀察到細(xì)胞病變。用已知陽(yáng)性血清做中和試驗(yàn)鑒定病毒。從糞便和小腸內(nèi)容物分離成功率最高。為提高病毒分離率,糞便要新鮮,避免反復(fù)凍結(jié),最好先將病料感染健康犬,取典型發(fā)病犬腹瀉糞便作為樣品分離病毒。但實(shí)際操作時(shí)病毒分離很困難,因此不適宜作為常規(guī)診斷方法。.血清學(xué)試驗(yàn)中和試驗(yàn)、熒光抗體技術(shù)、乳膠凝集試驗(yàn)、ELISA等方法也可用于檢測(cè)血清抗體。.基因診斷近幾年P(guān)CR技術(shù)發(fā)展迅猛,可作為準(zhǔn)確快速的診斷方法。.鑒別診斷本病的臨床癥狀、流行病學(xué)與細(xì)小病毒、輪狀病毒感染相似,而且?;旌细腥?,給疾病的診斷增加了復(fù)雜性,需要注意鑒別?!痉揽亍磕壳氨静∩袩o有效疫苗用于預(yù)防,也無特效療法,主要采取一般性綜合措施發(fā)現(xiàn)病犬應(yīng)及時(shí)隔離,并采取對(duì)癥治療,如止吐、止瀉、補(bǔ)液,用抗生素防止繼發(fā)感染.早期應(yīng)用犬高免血清或球蛋白,具有較好的治療效果。止嘔可選用維生素B6、愛茂爾、甲氧氯普胺、舒必利、氯丙嗪、嘔瀉寧等。止血可選用安絡(luò)血、酚磺乙胺及氨甲苯酸:止痛可用阿托品或顛茄酊等。補(bǔ)液可選用乳酸林格氏液??墒褂媚c黏膜保護(hù)劑,如次硝酸鉍、氫氧化鋁??蓱?yīng)用硫酸新霉素等抗生素防止繼發(fā)感染。同時(shí),加強(qiáng)護(hù)理,如抗寒保暖等,可以減少病死率。幼犬要及時(shí)吃足初乳,以獲得母源抗體和免疫保護(hù)力。加強(qiáng)清潔衛(wèi)生,定期對(duì)犬舍、食具及周圍環(huán)境進(jìn)行消毒。對(duì)引進(jìn)犬實(shí)施隔離檢疫。對(duì)疫點(diǎn)的糞便、場(chǎng)地進(jìn)行消毒處理,可用甲醛或漂白粉等經(jīng)濟(jì)有效的消毒劑.防止病毒通過糞便在犬群中迅速傳播。八、犬副流感病毒感染犬副流感病毒感染(canineparainfluenzavirusinfection)是由犬副流感病毒(CPIV)引起犬的主要呼吸道傳染病。臨床上以發(fā)熱、流黏性鼻液、打噴嚏、咳嗽等急性呼吸道癥狀為主要特征。病理變化以卡他性鼻炎和支氣管炎為特征。1967年,Binn等人首次用犬腎細(xì)胞(MDCK)從具有呼吸道癥狀的病犬中分離獲得CPIV。后來發(fā)現(xiàn),CPIV還可以引起急性腦脊髓炎和腦內(nèi)積水,表現(xiàn)后驅(qū)麻痹和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等臨床癥狀。目前世界上所有養(yǎng)犬的國(guó)家均有本病流行,嚴(yán)重影響犬和狐等養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展?!静≡咳绷鞲胁《?Canineparainfluenzavirus,CPIV)又稱為副流感病毒5型(Parainfluenzavirus5),屬于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、副黏病毒屬(Paramyxovirus)。病毒基因組為單股RNA。電鏡下,病毒粒子呈多形性,一般為球狀,直徑為50?300nm。粒子內(nèi)部為螺旋對(duì)稱的核衣殼,外有囊膜,其表面有密集而整齊的纖突結(jié)構(gòu),含血凝素和神經(jīng)氨酸酶。病毒在細(xì)胞質(zhì)中復(fù)制,成熟后在細(xì)胞膜上出芽釋放。本病毒只有一個(gè)血清型,但毒力有所差異。CPIV在4℃和24℃條件下可凝集人0型紅細(xì)胞及綿羊、雞、豚鼠、大鼠、兔、犬、貓的紅細(xì)胞,其中對(duì)豚鼠紅細(xì)胞吸附作用最強(qiáng)。本病毒可在犬和猴腎原代或傳代細(xì)胞及Vero細(xì)胞上增殖并產(chǎn)生CPE,在感染細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體。病毒也可在雞胚羊膜腔內(nèi)增殖,但雞胚不死亡,羊膜腔和尿囊液中均含有病毒,血凝效價(jià)可達(dá)1:128。在雞胚尿囊腔接種,病毒不增殖。本病毒對(duì)理化因素的抵抗力不強(qiáng),對(duì)熱、乙醚不穩(wěn)定,在酸堿環(huán)境中易被破壞,在0.5%水解乳蛋白和0.5%牛血清Hank液中經(jīng)24h感染性不變。一般消毒劑可將其殺死?!玖餍胁W(xué)】CPIV的宿主范圍較廣,自然感染宿主包括人、猴、犬、牛、羊、馬、家兔、豚鼠、倉(cāng)鼠、小鼠、禽類以及某些野生動(dòng)物等。各種玩賞犬、實(shí)驗(yàn)犬和軍警犬,成年犬和幼齡犬均可感染,但幼齡犬病情較重。急性期病犬是主要的傳染源,通過呼吸道而感染。病毒主要存在于呼吸系統(tǒng),如病犬鼻液和氣管、肺部的分泌物中含有大量病毒,可通過打噴嚏、咳嗽向外排出,易感動(dòng)物吸入帶毒的飛沫后會(huì)感染發(fā)病。本病傳播迅速,并具有很強(qiáng)的傳染性,呈突然暴發(fā)。CPIV感染軍犬后常引發(fā)呼吸道病,在實(shí)驗(yàn)犬產(chǎn)生犬瘟熱樣癥狀。自然條件下單獨(dú)感染CPIV的情況不多見,常與支原體或支氣管敗血波氏菌合并感染,使病情加重?!九R床癥狀】潛伏期較短,一般3?5d,大多數(shù)感染呈亞臨床性或僅表現(xiàn)輕微的臨床癥狀。病犬突然發(fā)熱,體溫39?41℃,流漿液性、黏液性甚至膿性鼻液。精神沉郁,厭食。扁桃體紅腫,結(jié)膜發(fā)炎,咳嗽和呼吸困難。一般2周左右可好轉(zhuǎn)。若與支氣管敗血波氏菌混合感染,則臨床表現(xiàn)更嚴(yán)重,整窩犬咳嗽、肺炎,病程3周以上,甚至死亡。11?12周齡幼犬病死率較高。成年犬病癥較輕,病死率較低。有的犬感染CPIV后表現(xiàn)后軀麻痹和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等神經(jīng)癥狀。有報(bào)道,7月齡犬感染后可表現(xiàn)后軀麻痹和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等癥狀。病犬用后肢支撐軀體,不能行走。膝關(guān)節(jié)、腓腸肌反射和自體感覺不敏感?!静±碜兓孔匀桓腥緯r(shí)主要在呼吸道,以卡他性鼻炎和支氣管為特征。鼻孔周圍有黏性或漿液性鼻液;氣管、支氣管內(nèi)有卡他性、黏液性、膿性或血性滲出物。氣管、支氣管、肺部有點(diǎn)狀出血;肺尖葉下部有時(shí)出現(xiàn)暗紅色實(shí)變區(qū)。扁桃體腫大。腦部感染出現(xiàn)急性腦脊髓炎和腦室積水,整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和脊髓均有病變,前葉灰質(zhì)最為嚴(yán)重。扁桃體、氣管、支氣管、咽后淋巴結(jié)腫大、潮紅。組織病理學(xué)檢查有不同程度的氣管、支氣管炎,病理變化從局灶性、表層壞死性炎癥至重度的黏液性、化膿性炎癥。【診斷】根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷,確診則需要做實(shí)驗(yàn)室檢查。.病毒分離鑒定取病犬的咽部拭子、腦脊髓液、肺、脾、肝及腎等病料,適當(dāng)處理后接種犬腎細(xì)胞,每隔4?5d進(jìn)行一次豚鼠紅細(xì)胞吸附試驗(yàn),盲傳2?3代,出現(xiàn)CPE。再用特異性豚鼠免疫血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn),對(duì)病毒進(jìn)行鑒定。.血清學(xué)試驗(yàn)可應(yīng)用犬副流感病毒特異性熒光抗體,在氣管、支氣管上皮細(xì)胞中檢出特異熒光細(xì)胞。也可采用血凝抑制試驗(yàn)和血清中和試驗(yàn)檢查病初和康復(fù)的雙份血清,測(cè)定抗體水平是否上升4倍,進(jìn)行回顧性診斷??旖菝舾械拿庖呓饦?biāo)記法和ELISA,已廣泛用作副流感病毒抗原檢測(cè)或鑒定及抗體檢測(cè)。.RI-PCR應(yīng)用特異性引物,進(jìn)行RT-PCR診斷,可以替代傳統(tǒng)的病毒分離法?!痉揽亍勘静∧壳吧袩o特異性療法。動(dòng)物多在長(zhǎng)途運(yùn)輸、環(huán)境突變、衛(wèi)生條件差、過度擁擠、受涼感冒時(shí)發(fā)病。因此在飼養(yǎng)過程中,應(yīng)加強(qiáng)管理,注意防寒保暖,避免應(yīng)激因素。發(fā)現(xiàn)病犬應(yīng)及時(shí)隔離治療。并嚴(yán)格消毒,重病犬及時(shí)淘汰??刹捎眯叵匐?、轉(zhuǎn)移因子和高免血清來增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能。當(dāng)犬感染CPIV時(shí),常常繼發(fā)支氣管敗血波氏菌、支原體等細(xì)菌感染。因此,應(yīng)用抗生素或磺胺類藥物,補(bǔ)充維生素,對(duì)細(xì)菌性混合感染有一定療效。嚴(yán)重者進(jìn)行強(qiáng)心、平喘、止咳等對(duì)癥治療,以減輕病情,促使病犬早日恢復(fù)。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理.特別是犬舍周圍環(huán)境衛(wèi)生,對(duì)新購(gòu)人犬進(jìn)行檢疫、隔離和預(yù)防接種。疫苗免疫是預(yù)防本病的關(guān)鍵措施。用犬副流感疫苗2次免疫后,抗體水平可增高4倍。國(guó)外已有預(yù)防犬副流感、犬瘟熱、犬細(xì)小病毒病、犬病毒性肝炎的四聯(lián)苗。國(guó)內(nèi)夏咸柱等研制的五聯(lián)苗中也包括犬副流感,解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)也研制出五聯(lián)弱毒苗,可以減少免疫次數(shù),達(dá)到一針防多病的效果。九、犬皰疹病毒感染犬皰疹病毒感染(Canineherpesvirusinfection)是由犬皰疹病毒引起犬的一種急性、全身出血性和壞死性傳染病,主要特征為仔犬呼吸困難、全身臟器出血壞死、急性致死以及母犬流產(chǎn)和繁殖障礙。本病于1965年由Carmichael和Stewart分別在美國(guó)和英國(guó)首先報(bào)道。此后,在日本、澳大利亞和許多歐洲國(guó)家相繼發(fā)現(xiàn),現(xiàn)已分布于多數(shù)國(guó)家和地區(qū)?!静≡咳捳畈《靖腥?Canineherpesvirus,CHV)屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、水痘病毒屬(Varicellavirus)。細(xì)胞核內(nèi)未成熟無囊膜病毒粒子直徑為90?100nm。有囊膜的成熟病毒直徑為120?200nm。呈二十面體對(duì)稱。病毒基因組為線狀雙股DNA,存在兩種異構(gòu)體,分子量為92X106Da。病毒粒子在氯化銫中的浮密度為1.20?1.29g/mL。本病毒無血凝性,只有1個(gè)血清型,但不同毒株毒力有差異。CHV在基因結(jié)構(gòu)上與牛傳染性鼻氣管炎病毒、馬鼻肺炎病毒、貓鼻氣管炎病毒和雞傳染性喉氣管炎病毒有較高的同源性,但血清學(xué)上與它們均不存在交叉抗原關(guān)系,只是與人單純皰疹病毒之間存在少量的交叉抗原關(guān)系。本病毒對(duì)犬胎腎和新生犬原代和傳代細(xì)胞系最易感,對(duì)犬肺和子宮組織細(xì)胞也敏感,35?37℃條件下可迅速增殖,感染后12?16h可出現(xiàn)CPE,初期呈局灶性細(xì)胞圓縮、變暗,逐漸向周圍擴(kuò)展,隨后灶狀中心部細(xì)胞開始脫落。部分細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)著色不明顯的嗜酸性包涵體。本病毒還可形成界限明顯、邊緣不整的小型蝕斑。CHV對(duì)酸、熱的抵抗力很弱,56℃經(jīng)4min被滅活;37℃經(jīng)5h,病毒感染滴度下降50%;在一70℃時(shí)保存的病毒(含10%血清的病毒懸液)只能存活數(shù)月,但凍干毒種保存數(shù)年毒價(jià)無明顯變化。病毒對(duì)乙醚等脂溶劑、胰蛋白酶、酸性和堿性磷酸酶等敏感,乙醚作用12h可使其滅活。在pH低于5和高于8時(shí)極不穩(wěn)定,易失去感染力,如pH為4.5時(shí)經(jīng)30min失去感染力?!玖餍胁W(xué)】本病感染僅限于家養(yǎng)和野生的犬科動(dòng)物,自然感染和嚴(yán)重致死病例通常發(fā)生在l?2周齡以內(nèi)的幼犬,1周齡以內(nèi)的幼犬感染CHV后病死率可高達(dá)80%。幼犬發(fā)病主要是在分娩過程中與帶毒母犬產(chǎn)道接觸或出生后通過與母犬接觸而感染。成年犬感染后常無明顯臨床癥狀?;疾∽腥涂祻?fù)犬是主要傳染源,特別是康復(fù)犬帶毒以及隱性感染犬長(zhǎng)期帶毒。潛伏感染是本病毒的特征,病毒主要存在于犬的唾液、鼻液、尿液、陰道分泌物和精液中,還可通過胎盤感染胎兒,但母源抗體效價(jià)的高低可影響仔犬臨床癥狀的嚴(yán)重程度。本病無明顯季節(jié)性,傳播迅速,幼犬群幾乎在同一時(shí)問發(fā)病,流行時(shí)間不長(zhǎng)。【臨床癥狀】潛伏期3?8d。新生仔犬感染后無明顯臨床癥狀,很快死亡。2周齡以內(nèi)犬常呈急性型,開始精神沉郁、食欲不振,抑郁、癡呆,軟弱無力,排淡黃色或綠色稀便后期癥狀為厭食、呼吸困難、腹痛、嘔吐和持續(xù)吠叫,腹下皮膚,尤其下腹部、陰門、口腔等處皮膚出現(xiàn)紅色丘疹,繼之形成水皰,皮下水腫。常于ld內(nèi)死亡。個(gè)別耐過仔犬常遺留中樞神經(jīng)癥狀,如共濟(jì)失調(diào),做圓周運(yùn)動(dòng)或失明等。2?5周齡仔犬或成年犬常呈輕度鼻炎和咽炎臨床癥狀,表現(xiàn)打噴嚏、干咳、流鼻涕等呼吸道癥狀,經(jīng)2周左右自愈。5周齡以上的犬和成年犬呈隱性感染,偶爾表現(xiàn)輕微鼻炎、氣管炎或陰道炎。母犬的生殖道感染以陰道黏膜彌漫性小皰疹狀病變?yōu)樘卣?。母犬出現(xiàn)繁殖障礙,如流產(chǎn)、
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