《蛋白質(zhì)與酶工程》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱（供四年制本科生物工程、生物技術(shù)專業(yè)使用）

PAGE《蛋白質(zhì)與酶工程》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱（供四年制本科生物工程專業(yè)使用）《蛋白質(zhì)工程》Ⅰ前言蛋白質(zhì)工程是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，蛋白質(zhì)工程實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的是要求學(xué)生在學(xué)習(xí)《蛋白質(zhì)工程》理論的過程中，通過實(shí)驗(yàn)課對所學(xué)理論學(xué)習(xí)驗(yàn)證，加深理解，復(fù)習(xí)鞏固。更為重要的是通過親自動手操作，得到比較全面的蛋白質(zhì)基本操作技術(shù)的訓(xùn)練；培養(yǎng)學(xué)生仔細(xì)觀察、積極思考和主動分析的能力；培養(yǎng)學(xué)生誠實(shí)記錄的科學(xué)品德，嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度和求實(shí)創(chuàng)新的科學(xué)精神。本大綱適用于四年制本科生物工程專業(yè)使用。現(xiàn)將大綱使用中有關(guān)問題說明如下：一為了使教師和學(xué)生更好地掌握教材上的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，大綱每次實(shí)驗(yàn)均由教學(xué)目的、教學(xué)要求和教學(xué)內(nèi)容組成。教學(xué)目的注明教學(xué)目標(biāo)，教學(xué)要求分掌握、熟悉和了解，教學(xué)內(nèi)容與教學(xué)要求對應(yīng)。二教師在保證大綱核心內(nèi)容的前提下，可根據(jù)不同教學(xué)手段，介紹重點(diǎn)內(nèi)容和介紹一般內(nèi)容。三總實(shí)驗(yàn)教學(xué)參考學(xué)時(shí)為28學(xué)時(shí)。四使用教材：《蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)》，教研室自編，歐樹娣、李官成主編，2006.12。Ⅱ正文第一至第二次實(shí)驗(yàn)免疫球蛋白分離與純化一教學(xué)目的學(xué)習(xí)并掌握免疫球蛋白分離與純化的方法與技術(shù)。二教學(xué)要求：（一）掌握目前最常用的分離免疫球蛋白的方法：鹽析法及離子交換法；（二）掌握DEAE纖維素柱層析法純化IgG的方法。三教學(xué)內(nèi)容：（一）硫酸銨沉淀法粗提IgG（二）DEAE纖維素柱純化IgG第三至第五次實(shí)驗(yàn)SDS電泳分離重組蛋白質(zhì)一教學(xué)目的學(xué)習(xí)并掌握聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳技術(shù)；熟悉SDS分離重組蛋白質(zhì)的技術(shù)；了解、學(xué)習(xí)大腸桿菌重組蛋白的誘導(dǎo)方法。二教學(xué)要求：（一）掌握聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳技術(shù)，凝膠的制備要領(lǐng)；（二）掌握SDS分離重組蛋白質(zhì)的技術(shù)。三教學(xué)內(nèi)容：（一）SDS凝膠的制備（二）電泳分離重組蛋白質(zhì)第六至第七次實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)印跡技術(shù)一教學(xué)目的了解運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)分析蛋白表達(dá)量的方法。二教學(xué)要求：（一）掌握蛋白質(zhì)印跡技術(shù)中所運(yùn)用的儀器設(shè)備以及各種試劑的配制；（二）掌握電轉(zhuǎn)移（轉(zhuǎn)膜電泳）技術(shù)；（三）掌握免疫印跡反應(yīng)的原理核技術(shù)。三教學(xué)內(nèi)容：（一）蛋白質(zhì)的電轉(zhuǎn)移（二）免疫印跡反應(yīng)（三）印跡膜的顯色和結(jié)果觀察Ⅲ教學(xué)組織與方法一實(shí)施機(jī)構(gòu)：由珠海校區(qū)生物工程教研室執(zhí)行。二組織內(nèi)容：教案講義審核、集體教學(xué)備課、教學(xué)方法研究、教學(xué)手段應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)預(yù)作。三教學(xué)方法：1采用啟發(fā)式、討論式課堂教學(xué)方式，輔助現(xiàn)代教育技術(shù)和傳統(tǒng)教學(xué)手段。核心內(nèi)容以講授為主，重點(diǎn)內(nèi)容以介紹為主，一般內(nèi)容以自學(xué)為主。2輔導(dǎo)形式：課堂討論、網(wǎng)絡(luò)查詢等相結(jié)合。3實(shí)驗(yàn)要求：實(shí)驗(yàn)前加強(qiáng)預(yù)習(xí)，實(shí)驗(yàn)中及時(shí)記錄；實(shí)驗(yàn)后及時(shí)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。四考核辦法：實(shí)驗(yàn)成績占期末總評成績的10%。Ⅳ教學(xué)時(shí)數(shù)分配表實(shí)驗(yàn)內(nèi)容教學(xué)時(shí)數(shù)實(shí)驗(yàn)類型人/動物免疫球蛋白（IgG）的分離與純化（一）4驗(yàn)證型人/動物免疫球蛋白（IgG）的分離與純化（二）4驗(yàn)證型SDS電泳凝膠制備4綜合型蛋白質(zhì)SDS電泳鑒定4綜合型SDS電泳及轉(zhuǎn)膜4綜合型蛋白質(zhì)的免疫印跡鑒定（一）4綜合型蛋白質(zhì)的免疫印跡鑒定（二）實(shí)驗(yàn)總結(jié)4綜合型28《酶工程》Ⅰ前言酶工程是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，酶工程實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生在學(xué)習(xí)酶工程理論的過程中，通過實(shí)驗(yàn)課驗(yàn)證理論中學(xué)到的知識點(diǎn)，從而使學(xué)生學(xué)到的知識更為鞏固；通過親自動手操作，得到比較全面的酶學(xué)基本操作技能訓(xùn)練，掌握基本操作規(guī)范；并熟悉基本的酶學(xué)實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)。本大綱適用于生物工程專業(yè)學(xué)生使用?，F(xiàn)將大綱使用中有關(guān)問題說明如下：一為了使教師和學(xué)生更好地掌握教材上的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，大綱每次實(shí)驗(yàn)均由教學(xué)目的、教學(xué)要求和教學(xué)內(nèi)容組成。教學(xué)目的注明教學(xué)目標(biāo)，教學(xué)要求分掌握、熟悉和了解，教學(xué)內(nèi)容與教學(xué)要求對應(yīng)。二教師在保證大綱核心內(nèi)容的前提下，可根據(jù)不同教學(xué)手段，講授重點(diǎn)內(nèi)容和介紹一般內(nèi)容。三總實(shí)驗(yàn)教學(xué)參考學(xué)時(shí)為28學(xué)時(shí)。四使用教材：《蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)》，教研室自編，歐樹娣、李官成主編，2006.12。Ⅱ正文第一次實(shí)驗(yàn)產(chǎn)淀粉酶菌株的快速篩選一教學(xué)目的通過訓(xùn)練學(xué)生自己動手取樣、制備樣品、涂板培養(yǎng)菌株的過程，學(xué)習(xí)和掌握分泌目的酶菌株的基本原理和篩選方法。二教學(xué)要求（一）掌握稀釋法制備土壤樣品的方法；（二）掌握涂板培養(yǎng)菌株的方法；（三）了解淀粉遇碘顯色反應(yīng)的一般原理和方法；（四）了解含淀粉酶菌株產(chǎn)生透明圈的一般原理。三教學(xué)內(nèi)容（一）土壤樣品取樣（二）土壤樣品涂板（三）產(chǎn)酶菌株染色與觀察，計(jì)算產(chǎn)酶菌株的產(chǎn)酶能力第二次實(shí)驗(yàn)?zāi)竟系鞍酌傅闹苽湟唤虒W(xué)目的學(xué)習(xí)和掌握有關(guān)酶源（本實(shí)驗(yàn)為木瓜乳汁）的選取、木瓜乳采集及粗酶提取等方面的基本原理和方法。二教學(xué)要求（一）掌握有關(guān)酶源的選取方法；（二）了解木瓜乳采集的方法和時(shí)機(jī)；（三）掌握粗酶提取等方面的基本原理和方法；（四）掌握木瓜蛋白酶酶活的測定原理和方法；（五）掌握考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白含量的原理，學(xué)會用Excel表格制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。三教學(xué)內(nèi)容（一）木瓜乳的采集（二）粗酶的提?。ㄈ┟富钚缘臏y定（四）紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)和勻漿器的正確使用（五）考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作第三次至四次實(shí)驗(yàn)殼聚糖凝膠顆粒固定化木瓜蛋白酶一教學(xué)目的訓(xùn)練學(xué)生自己動手制備殼聚糖凝膠顆粒，學(xué)習(xí)殼聚糖固定化木瓜蛋白酶的方法；掌握共價(jià)結(jié)合法固定化酶的原理和方法；掌握固定化酶活力測定的方法。二教學(xué)要求（一）掌握用于酶固定化的殼聚糖凝膠顆粒的制備方法；（二）掌握共價(jià)結(jié)合法固定化酶的原理和方法；（三）掌握固定化酶活力測定的方法。三教學(xué)內(nèi)容（一）殼聚糖凝膠顆粒的制備；（二）共價(jià)結(jié)合法固定化酶的制備；（三）固定化酶活力的測定。第五到六次實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶的分離提取、比活力及Km值的測定一教學(xué)目的通過本次實(shí)驗(yàn)使學(xué)生熟悉從生物樣品中提取分離純化酶的一般方法；掌握堿性磷酸酶（AKP）比活性的測定原理和方法；學(xué)習(xí)作圖法求AKP的Km值。二教學(xué)要求：（一）掌握從生物樣品中提取分離純化酶的一般方法；（二）掌握堿性磷酸酶（AKP）比活性的測定原理和方法；（三）學(xué)習(xí)作圖法求AKP的Km值。三教學(xué)內(nèi)容：（一）AKP提取、分離純化的操作流程（二）AKP的比活性測定（三）酚法測定蛋白質(zhì)含量（四）AKPKm值的測定及作圖第七次實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶動力學(xué)性質(zhì)的測定一教學(xué)目的學(xué)習(xí)并掌握各種酶動力學(xué)性質(zhì)測定的一般原理及方法，使學(xué)生明白對酶促反應(yīng)動力學(xué)的研究有助于了解酶與底物的結(jié)合機(jī)理和作用方式，它是研究酶的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的一個重要方面。二教學(xué)要求：（一）掌握酶促反應(yīng)初速度的測定方法；（二）學(xué)會分析pH對酶活力影響的原理及方法；（三）掌握激活劑對酶活力影響的分析原理及方法；（四）掌握底物濃度對酶活力的影響的分析方法。三教學(xué)內(nèi)容：（一）堿性磷酸酶酶促反應(yīng)初速度的測定（二）分析pH對堿性磷酸酶活力的影響（三）分析激活劑對酶活力的影響（四）底物濃度對酶活力的影響的分析Ⅲ教學(xué)組織與方法一實(shí)施機(jī)構(gòu)：由珠海校區(qū)生物工程教研室執(zhí)行。二組織內(nèi)容：教案講義審核、集體教學(xué)備課、教學(xué)方法研究、教學(xué)手段應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)預(yù)作。三教學(xué)方法：1采用啟發(fā)式、討論式課堂教學(xué)方式，輔助現(xiàn)代教育技術(shù)和傳統(tǒng)教學(xué)手段。核心內(nèi)容以講授為主，重點(diǎn)內(nèi)容以介紹為主，一般內(nèi)容以自學(xué)為主。2輔導(dǎo)形式：課堂討論、網(wǎng)絡(luò)查詢等相結(jié)合。3實(shí)驗(yàn)要求：實(shí)驗(yàn)前加強(qiáng)預(yù)習(xí)，實(shí)驗(yàn)中及時(shí)記錄；實(shí)驗(yàn)后及時(shí)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。四考核