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工業(yè)微生物育種第1頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1.1誘發(fā)突變1.1.1輻射與誘變(1)輻射:上下左右四面八方傳遞能量的過程?電離輻射:X射線、α射線、β射線、γ射線、等離子、中子和質(zhì)子等非電離輻射:紫外線和射線的穿透力很弱,故只能用“內(nèi)照射”。實(shí)際應(yīng)用時(shí),一般不用射線,只用射線。射線常用輻射源是P32和S35,尤以P32使用較多(2)電離輻射誘變途徑:物理作用→化學(xué)作用→生物學(xué)作用。第2頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(3)輻射劑量及表示方法
定義:?jiǎn)挝毁|(zhì)量被照射的物質(zhì)所吸收的能量數(shù)值,稱為輻射劑量。
射線和r射線:用“倫琴”(r)表示,即在1克空氣中吸收83爾格(erg)輻射的能量。中子:?jiǎn)挝皇恰胺e分流量”。即每平方厘米的截面上通過的中子數(shù)(n/cm2)。射線:用“微居里”表示。具體是每克物質(zhì)吸收多少“微居里”(cu)的放射性同位素。微居里是放射強(qiáng)度單位,表示每秒鐘有3-7×104個(gè)原子核發(fā)生蛻度。第3頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(4)電離輻射致變的機(jī)理照射→原發(fā)電離→次級(jí)電離→基因分子結(jié)構(gòu)改組→基因突變基因突變的頻率與輻射劑量成正比,即劑量增加一倍,突變頻率增加一倍,但突變率不受輻射強(qiáng)度的影響。輻射強(qiáng)度是指單位時(shí)間內(nèi)照射的劑量數(shù),即劑量率,倘若照射劑量不變,不管單位時(shí)間內(nèi)所照射是多還是少,基因突變率總是保持一致。第4頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.1突變的分子機(jī)理2.1.1點(diǎn)突變1、點(diǎn)突變概念:?jiǎn)螇A基對(duì)置換,也稱點(diǎn)突變。置換方式:轉(zhuǎn)換:同一類堿基間的置換,如嘧啶被嘧啶置換;顛換:不同類堿基間的置換,如嘧啶被嘌呤置換。第5頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、堿基置換的內(nèi)源機(jī)制
(1)5-甲基胞嘧啶(5mC)的脫氨作用:人類基因組中70%~90%的5mC發(fā)生在CpG二核苷酸中,而15%的CpG發(fā)生5mG;這些甲基化的CpG一般是分散存在的,“CpG”島則一般為非甲基化的。第6頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)DNA復(fù)制過程中出現(xiàn)差錯(cuò):復(fù)制過程中堿基錯(cuò)配不能被錯(cuò)誤修復(fù)系統(tǒng)有效地校正,就會(huì)導(dǎo)致堿基對(duì)置換突變。第7頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(3)滑移錯(cuò)配:模板鏈上的堿基滑動(dòng)脫出配對(duì)位置,使引物與模板鏈發(fā)生過渡性錯(cuò)排,最后在復(fù)制時(shí)導(dǎo)致堿基的錯(cuò)誤摻入?;棋e(cuò)配在模板上同一堿基連續(xù)排列時(shí)更易發(fā)生。第8頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
(4)脫氨基效應(yīng):亞硝酸可使腺嘌呤(A)脫去氨基成為次黃嘌呤(H)使胞嘧啶(C)脫去氨基成為尿嘧啶(U),使鳥嘌呤(G)脫去氨基成為黃嘌呤(I)。前兩個(gè)變化均導(dǎo)致堿基錯(cuò)配:第9頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
(5)脫嘌呤效應(yīng):一些化學(xué)物質(zhì)(包括酶)可引起脫嘌呤作用,如果不能有效的修復(fù),由于模板鏈上沒有堿基,DNA聚合酶會(huì)錯(cuò)誤地?fù)饺雺A基,則會(huì)導(dǎo)致堿基置換。腺嘌呤是最容易摻入的堿基。
(6)氧化性損傷堿基:氧自由基(如過氧化氫、羥基等)的氧化作用DNA,其主要產(chǎn)物是8—羥鳥嘌呤,它可引起G→T或A→C的顛換。
(7)紫外線損傷:紫外線可引起G→A和C→T的置換。另外紫外線還可以引起嘧啶二聚體的形成而改變DNA的空間結(jié)構(gòu)。第10頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.1.2移碼突變移碼突變:基因編碼序列中插進(jìn)額外堿基或缺失應(yīng)有堿基引起插入或缺失點(diǎn)及后面編碼信息發(fā)生改變??梢疱e(cuò)義、無義及通讀等一系列突變。第11頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
移碼突變:脫嘌呤、DNA嵌入劑的嵌入、以及DNA復(fù)制錯(cuò)誤、輻射等很多原因都可引起移碼突變。第12頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.1.3基因內(nèi)外非編碼區(qū)的突變(1)內(nèi)含子突變(一般為中性突變)(1)突變破壞內(nèi)含調(diào)控元件時(shí):(2)突變產(chǎn)生隱秘的剪接位點(diǎn)時(shí):(3)突變剪接位點(diǎn)時(shí):(2)非翻譯區(qū)域突變(一般為中性突變),但有時(shí)會(huì)通過影響蛋白質(zhì)合成、RNA穩(wěn)定性或RNA轉(zhuǎn)移來影響轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)。2、調(diào)控元件突變(大部分是中性的)啟動(dòng)子和增強(qiáng)子等調(diào)控元件的突變可能會(huì)破壞或影響轉(zhuǎn)錄過程。第13頁(yè),課件共14頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月天冬氨酸谷氨酸棒
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