新生兒遺傳代謝病篩查采血技術(shù)實(shí)驗技術(shù)規(guī)范化要求

新生兒遺傳代謝病篩查

采血技術(shù)實(shí)驗技術(shù)規(guī)范化要求四川省南充市婦幼保健院四川省新生兒疾病篩查南充分中心陳濤0817-223566512篩查標(biāo)本達(dá)到實(shí)驗室時間（平均）3年篩查量分布篩查數(shù)量篩查中心比例（%）<1萬1813.641-<3萬3123.48>=3-<10萬6952.27>=10-20萬139.85>20萬10.76456789新生兒遺傳代謝病篩查血片

采集技術(shù)規(guī)范血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術(shù)流程中最重要的環(huán)節(jié)。血片質(zhì)量直接影響實(shí)驗室檢測結(jié)果，開展新生兒遺傳代謝病血片采集及送檢的醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)按本技術(shù)規(guī)范要求完成血片采集工作。10一、基本要求（一）采血機(jī)構(gòu)設(shè)置。設(shè)有產(chǎn)科或兒科診療科目的醫(yī)療機(jī)構(gòu)均應(yīng)當(dāng)開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集。（二）采血人員要求。1.具有與醫(yī)學(xué)相關(guān)的中專以上學(xué)歷，從事醫(yī)學(xué)臨床工作2年以上。2.接受過新生兒遺傳代謝病篩查相關(guān)知識和技能的培訓(xùn)并取得技術(shù)合格證書。培訓(xùn)內(nèi)容包括：新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網(wǎng)絡(luò)運(yùn)行；濾紙干血片采集、保存、遞送的相關(guān)知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關(guān)信息和檔案管理。11二、采血機(jī)構(gòu)和人員職責(zé)（一）積極開展新生兒遺傳代謝病篩查的宣傳教育工作。（二）加強(qiáng)對本機(jī)構(gòu)血片采集人員的管理和培訓(xùn)。（三）承擔(dān)本機(jī)構(gòu)新生兒遺傳代謝病篩查有關(guān)信息的收集、統(tǒng)計、分析和上報工作。（四）血片采集人員在實(shí)施血片采集前，應(yīng)當(dāng)將新生兒遺傳代謝病篩查的目的、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費(fèi)用等情況如實(shí)告知新生兒的監(jiān)護(hù)人，并取得書面同意。（五）認(rèn)真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整?？ㄆ瑑?nèi)容包括：采血單位、母親姓名、住院號、居住地址、聯(lián)系電話、新生兒性別、孕周、出生體重、出生日期、采血日期和采血者等。12二、采血機(jī)構(gòu)和人員職責(zé)

（六）嚴(yán)格按照新生兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在規(guī)定時間內(nèi)遞送至新生兒遺傳代謝病篩查實(shí)驗室檢驗。（七）因特殊情況未按期采血或不合格標(biāo)本退回需要重新采血者，應(yīng)當(dāng)及時預(yù)約或追蹤采集血片。（八）對可疑陽性病例應(yīng)當(dāng)協(xié)助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復(fù)查，以便確診或采取干預(yù)措施。（九）做好資料登記和存檔保管工作，包括掌握活產(chǎn)數(shù)、篩查數(shù)、新生兒采血登記信息、反饋的檢測結(jié)果及確診病例等資料，保存時間至少10年。13三、血片采集步驟（一）血片采集人員清洗雙手并佩戴無菌、無滑石粉的手套。（二）按摩或熱敷新生兒足跟，并用75%乙醇消毒皮膚。（三）待乙醇完全揮發(fā)后，使用一次性采血針刺足跟內(nèi)側(cè)或外側(cè)，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，從第2滴血開始取樣。（四）將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血液自然滲透至濾紙背面，避免重復(fù)滴血，至少采集3個血斑。（五）手持消毒干棉球輕壓采血部位止血。（六）將血片懸空平置，自然晾干呈深褐色。避免陽光及紫外線照射、烘烤、揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)等污染。（七）及時將檢查合格的濾紙干血片置于密封袋內(nèi)，密閉保存在2～8℃冰箱中，有條件者可0℃以下保存。（八）所有血片應(yīng)當(dāng)按照血源性傳染病標(biāo)本對待，對特殊傳染病標(biāo)本，如艾滋病等應(yīng)當(dāng)作標(biāo)識并單獨(dú)包裝。14四、采血工作質(zhì)量控制（一）血片采集的濾紙應(yīng)當(dāng)與試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品血片所用濾紙一致。（二）采血針必須一人一針。（三）正常采血時間為出生72小時后，7天之內(nèi)，并充分哺乳；對于各種原因（早產(chǎn)兒、低體重兒、正在治療疾病的新生兒、提前出院者等）未采血者，采血時間一般不超過出生后20天。（四）合格濾紙干血片應(yīng)當(dāng)為：1.至少3個血斑，且每個血斑直徑大于8毫米。2.血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。3.血斑無污染。4.血斑無滲血環(huán)。（五）濾紙干血片應(yīng)當(dāng)在采集后及時遞送，最遲不宜超過5個工作日。（六）有完整的血片采集信息記錄。15新生兒遺傳代謝病篩查濾紙血片的采集（CLSI)16注意事項當(dāng)采集血標(biāo)本時應(yīng)遵守注意事項。病人的標(biāo)本可能感染了人類免疫缺陷病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。應(yīng)遵守恰當(dāng)?shù)难獦硬杉夹g(shù)來盡可能降低實(shí)驗室人員危險性，并且要戴手套。171.2 標(biāo)本的可接受性

本標(biāo)準(zhǔn)并不是解釋如果沒有完全按照標(biāo)準(zhǔn)采集的所有血斑標(biāo)本定為不可接受的（即是不能進(jìn)行檢測）。只是證明拒絕分析標(biāo)本及表明其是不可接受的，如果進(jìn)行檢測的話對于特定的分析物會產(chǎn)生不可靠、誤解或臨床上不準(zhǔn)確的結(jié)果。既然，由于這一定義，不可接受的標(biāo)本產(chǎn)生無用的信息，就不應(yīng)分析檢測這樣的標(biāo)本，并應(yīng)通知負(fù)責(zé)采集血樣的人員盡快地重新采集可接受的標(biāo)本。如果檢測了標(biāo)本，事實(shí)上，實(shí)驗室承認(rèn)標(biāo)本的適當(dāng)性，以及承擔(dān)負(fù)責(zé)分析結(jié)果的可靠性。182.1 足（后）跟（Heel）新生兒篩查時，推薦使用足跟采血，應(yīng)從足跟掌側(cè)的中間或側(cè)面采集?！爸虚g”是指盡可能地靠近人體的中線，“側(cè)面”是指盡可能地遠(yuǎn)離人體的中線?！罢苽?cè)”是指足部的行走側(cè)。不能使用以前使用的穿刺部位或足跟的曲面?zhèn)取?93.濾紙血樣采集技術(shù)

3.1腳跟穿刺3.1.1準(zhǔn)備步驟3.1.2預(yù)防措施3.1.3位置準(zhǔn)備3.1.4采血部位的消毒3.1.5穿刺3.1.6直接應(yīng)用3.1.6.1擠壓3.1.6.2多層3.1.7采集血樣3.1.8干燥3.1.9堆積3.1.10運(yùn)輸3.1.11保存203.1.8 干燥

應(yīng)避免接觸或污染血斑。血標(biāo)本應(yīng)放置在室溫(15oCto22oC)并避免陽光直照（非直接室內(nèi)光線通常不會有害的），周圍無吸附物質(zhì)的水平支架上至少三個小時。濾紙上的血斑不應(yīng)加熱、堆積在一起、或在干燥的過程中接觸到其它的表面。213.1.9 堆積在一起

當(dāng)不可避免地將暴露的干血斑成批地堆積在一起時，應(yīng)采用下列的程序。在將標(biāo)本放置在運(yùn)輸容器中之前，除非標(biāo)本有其它物理屏障隔開，如隔紙，玻璃紙，否則，應(yīng)將采樣卡片的上的干血斑旋轉(zhuǎn)180o后再放置。223.1.10運(yùn)輸（郵寄）

除非篩查實(shí)驗室有別的指導(dǎo)，應(yīng)在采集標(biāo)本后24小時內(nèi)將采集血樣的卡片運(yùn)輸?shù)交蜞]寄到實(shí)驗室，并保留適當(dāng)?shù)母櫽涗浳募?。?yīng)避免在采集血樣場所的耽擱，相對于可能的耽擱其運(yùn)輸環(huán)境應(yīng)結(jié)構(gòu)化來最大限度地提高運(yùn)輸?shù)男省?33.1.11保存

如果實(shí)驗室要保存剩余的干血斑標(biāo)本到更長的時間，必須保管好它們確保保存后其狀態(tài)未受到損害。一種方法是將標(biāo)本保存在具有干燥劑和濕度指示卡的不漏氣的、可封口的塑料袋中。濕度應(yīng)維持在低于30%。如果可能的話，陽性和陰性血斑質(zhì)控品應(yīng)與剩余標(biāo)本放置在一起，這樣，當(dāng)從保存環(huán)境中取出標(biāo)本時可以通過檢測質(zhì)控品的情況來檢查標(biāo)本的完整性。244.4 運(yùn)輸和包裝的預(yù)防措施標(biāo)本不應(yīng)放置在密封不透氣的容器中（塑料或橡皮信封）。必須遵守郵遞和地方運(yùn)輸法規(guī)[17]。如果地方法規(guī)要求用防水容器包裝用于運(yùn)輸，則必須包括足夠量的包裝好的干燥劑和濕度指示卡來保證干血片未暴露在過量的濕氣中。濕度和濕氣對干血斑標(biāo)本的穩(wěn)定性和分析物的回收是有害的。具有生物危險的標(biāo)本在運(yùn)輸中應(yīng)具有特殊的防護(hù)措施。254.4.2 包裝

包裝不應(yīng)導(dǎo)致濾紙的受壓。在血斑標(biāo)本運(yùn)輸中在同一容器中不應(yīng)放置化學(xué)或其它類型的標(biāo)本。264.4.3 堆積放置

由于標(biāo)本之間的濾?。ń徊嫖廴荆┛赡馨l(fā)生，標(biāo)本與標(biāo)本之間的接觸是不恰當(dāng)?shù)?。如果堆積放置不可避免的話，可有幾種方法：(1) 對采集血樣的表格加上遮蓋紙片。(2) 將暴露的干血斑旋轉(zhuǎn)180度。(3) 標(biāo)本之間放置玻璃紙。274.4.4 運(yùn)輸時間

標(biāo)本應(yīng)在采集的24小時內(nèi)送或郵寄到篩查實(shí)驗室。285.1 最少的預(yù)先打印的信息

下面列出的是達(dá)到篩查目的要求的最少的所需的信息。為了滿足其特殊的要求，根據(jù)篩查計劃可包括一些額外的信息。(1) 新生兒姓名,母親姓名,病人識別號(選擇:地址和電話號碼)。(2) 出生日期。(3) 出生體重。(4) 性別。(5) 喂奶狀況。(6) 標(biāo)本采集時間和新生兒年齡（小時）。(7) 提供血樣的單位和地址。(8) 醫(yī)生的姓名和電話號碼。(9) 篩查計劃或?qū)嶒炇液偷刂贰?10)填寫分析實(shí)驗結(jié)果位置。(11)具有一定數(shù)量1/2寸（13mm）內(nèi)徑在濾紙一側(cè)印有破折或點(diǎn)狀線的圈(選擇：在兩側(cè)印好的圈)。75uL血液可填滿標(biāo)本采集圈，而100uL的血液會稍微超出印好的圈。(12)在濾紙部分標(biāo)出濾紙的廠家和批號。295.2.3 標(biāo)本卡片編號

每一標(biāo)本采集卡片的連續(xù)編號應(yīng)預(yù)先打印在卡片的每一信息部分，如果血斑部分從卡片上分開。應(yīng)考慮標(biāo)本識別號的持續(xù)唯一性。為了達(dá)到這一識別及干血片標(biāo)本與新生兒資料表的聯(lián)系，條形碼是一適當(dāng)?shù)姆椒ā?0如何采集可接受的血片標(biāo)本

A1 準(zhǔn)備A1.1洗手A1.2戴消毒無滑粉的手套以及不同的新生兒要更換手套A1.3確認(rèn)新生兒的身份A2 采樣技術(shù)戴手套31

A2.1用70%酒精消毒新生兒足跟A2.2讓足跟自然干燥32

A2.3針刺部位應(yīng)在如上圖所示的陰影區(qū)域

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A2.4用推薦長度的柳葉刀 進(jìn)行如圖所示的針刺（深度小于2.0m）

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A2.5用消毒的棉球輕輕地拭去第一滴血（第一滴血含有組織液可能會稀釋樣本）A2.6等待形成大的血滴A2.7可用拇指進(jìn)行溫柔的擠壓及間斷性地放松易于形成血滴

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A2.8輕輕地將濾紙卡片接觸血滴，用每一滴血滴在每一預(yù)先定好的圈內(nèi)。觀察每一圈血流透過濾紙的情況。 A2.9所有使用過的用具均應(yīng)放置在適當(dāng)?shù)纳镂：Φ娜萜髦小?637

A2.10采集完標(biāo)本后，應(yīng)將新生兒的足抬高，使用消毒棉球壓著針刺位置。但不要使用膠粘帶。 A2.11讓血標(biāo)本完全自然干燥，放置在水平支架上，如塑料的試管架，在室溫中放置至少3小時（不能堆積在一起或加熱）。A2.12標(biāo)本干燥后，放置在批準(zhǔn)的運(yùn)輸容器中38

A3 易犯的錯誤A3.1殘留的酒精未能自然干燥可能稀釋標(biāo)本，影響到實(shí)驗結(jié)果。A3.2在后彎曲的足后跟進(jìn)行穿刺將使得血液從穿刺部位流出，使得正常的血斑難以形成。不能使用以前穿刺的部位。A3.3擠壓穿刺部位可能導(dǎo)致溶血，使得