河北省承德第一中學(xué)2023年高三回頭聯(lián)考生物試題含解析

河北省承德第一中學(xué)2023年高三回頭聯(lián)考生物試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．研究發(fā)現(xiàn)，線粒體促凋亡蛋白Smac是促進(jìn)細(xì)胞凋亡的一種關(guān)鍵蛋白質(zhì)，正常細(xì)胞的Smac存在于線粒體中，當(dāng)線粒體收到釋放這種蛋白質(zhì)的信號時，就將這種蛋白質(zhì)釋放到線粒體外，然后Smac與凋亡抑制蛋白（IAPs)反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，下列敘述正確的是A．Smac與IAPs反應(yīng)加強(qiáng)將導(dǎo)致細(xì)胞中溶酶體活動減弱B．Smac基因與IAPs基因的表達(dá)過程均在線粒體中進(jìn)行C．體內(nèi)細(xì)胞的自然更新速度與線粒體Smac釋放速度有關(guān)D．Smac釋放到線粒體外不需要消耗細(xì)胞代謝提供的能量2．下圖為原核生物細(xì)胞內(nèi)色氨酸的合成機(jī)制示意圖。色氨酸操縱子是指編碼色氨酸生物合成所需酶的一段DNA。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．色氨酸操縱子的轉(zhuǎn)錄和翻譯是不會同時進(jìn)行的B．色氨酸和阻礙蛋白形成的復(fù)合物會阻止相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄C．基因“開啟”和“關(guān)閉”的調(diào)節(jié)機(jī)制屬于反饋調(diào)節(jié)D．色氨酸的這種合成機(jī)制避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)3．下列關(guān)于細(xì)胞分裂與生物遺傳關(guān)系的敘述，正確的是（）A．基因的分離和自由組合可以在配子形成過程中同時發(fā)生B．減數(shù)分裂過程中染色體數(shù)目減半發(fā)生在減數(shù)第二次分裂C．細(xì)胞分裂過程中，質(zhì)基因與核基因都平均分配到子細(xì)胞中D．用秋水仙素處理大腸桿菌，可誘導(dǎo)其染色體數(shù)目加倍4．植物根尖感知土壤水分梯度，向較高水勢側(cè)生長的現(xiàn)象被認(rèn)為是根的向水化。研究人員通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)正常植株根部較低水勢側(cè)細(xì)胞分裂素含量增加，而細(xì)胞分裂素缺陷體（MIZl）無根的向水化現(xiàn)象。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．實(shí)驗(yàn)表明細(xì)胞分裂素的不對稱分布是控制根的向水化現(xiàn)象的重要決定因素B．水分脅迫導(dǎo)致低水勢側(cè)分生區(qū)細(xì)胞分裂素含量增加，使根向較高水勢側(cè)彎曲C．若用一定量的細(xì)胞分裂素不對稱處理MlZI地下根，則其根可表現(xiàn)出向水化D．植物根的向地性和向水化現(xiàn)象作用機(jī)理不同．但都體現(xiàn)了激素作用的兩重性5．下列不屬于生物多樣性的是A．基因多樣性B．細(xì)胞多樣性C．物種多樣性D．生態(tài)系統(tǒng)多樣性6．將一盆置于密閉透明容器內(nèi)的綠色植物放在黑暗環(huán)境（溫度適宜）中，t1時刻給予充足的光照，t4時刻再補(bǔ)充一定量的CO2，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間。在培養(yǎng)的過程中實(shí)時檢測裝置內(nèi)O2的釋放速率，結(jié)果如圖所示。不考慮其他生物的影響，下列敘述錯誤的是（）A．t0~t1，該密閉裝置內(nèi)O2的含量應(yīng)持續(xù)下降B．t3時刻，該綠色植物的呼吸速率等于光合速率C．t3~t4，CO2濃度是限制光合速率的主要因素D．t4~t5，該綠色植物的凈光合速率逐漸增大二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某水庫引入亞洲公魚和大銀魚兩種經(jīng)濟(jì)魚類，亞洲公魚以浮游動物為食，產(chǎn)卵期的亞洲公魚會吞食本種、大銀魚的魚卵和幼魚；大銀魚幼魚主要攝食枝角類、輪蟲和原生動物等，成魚主要捕食小型魚、蝦。請回答下列問題：（1）亞洲公魚和大銀魚屬于生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的___________，兩者的種間關(guān)系是___________。（2）捕撈這兩種魚后，有利于一些魚類種群的發(fā)展，原因是___________。若水體中水草和浮游植物的生物量明顯減少，則亞洲公魚和大銀魚的種群數(shù)量將___________。（3）部分亞洲公魚和大銀魚產(chǎn)卵后，親體逐漸死亡。其他魚類吞食尸體后，同化的能量大部分用于___________。8．（10分）回答有關(guān)微生物的問題．Ⅰ、凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶．培育產(chǎn)高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發(fā)展方向．圖1為產(chǎn)高酶活力凝乳酶的枯草芽孢桿菌培育過程．（1）枯草芽孢桿菌的芽孢是__________．A．休眠體B．營養(yǎng)繁殖體C．孢子D．營養(yǎng)體（2）圖1所示的b過程的目的是為__________，接種用的平板培養(yǎng)基在制備時需注意的是__________．A．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進(jìn)行倒平板B．倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓滅菌處理C．等到平板培養(yǎng)基冷卻凝固后才可以蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D．待平板冷卻凝固約5﹣10min后將平板倒過來放置Ⅱ、在35℃、40分鐘內(nèi)能凝固1mL10%奶粉所需的酶量為一個酶活力單位（U）．圖2表示圖1中提取得到的各種凝乳酶活力檢測結(jié)果．（3）據(jù)圖2所示，酶催化能力最強(qiáng)的是__________組，而各組酶催化能力存在差異的原因是__________．（4）A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同，兩位同學(xué)對此做出了推測：①同學(xué)甲：A2、A5組芽孢桿菌可能未發(fā)生基因突變，用__________技術(shù)檢測即可證實(shí)．②同學(xué)乙：A2、A5組與A0組酶活力雖然相同，但也可能存在不同的基因突變，理論上的解釋是__________．9．（10分）研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞（只有一個染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖所示，請分析回答下列問題：（1）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，還應(yīng)含有____；引物應(yīng)選用下圖中____（填圖中字母）。（2）在基因工程操作步驟中，過程①②稱為___。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞。結(jié)合上圖推測，過程①選用的兩種限制酶是___（填圖中的編號），③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加____（填“氨芐青霉素”或“G418”）。（3）圖中桑椹胚需通過____技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)行該操作前需對受體小鼠進(jìn)行____處理。10．（10分）人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值。下圖是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑，其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。回答下列問題。（1）基因工程中可通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是___________；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是___________上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA分子雙鏈間的___________。（2）已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5磷酸，構(gòu)建表達(dá)載體的過程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是___________，經(jīng)過上述處理后的Ti質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成___________個磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。（3）過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后，還應(yīng)轉(zhuǎn)接到含___________的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是___________，還可以使用動物病毒作為載體，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（4）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的___________，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。11．（15分）果蠅（2n=8）羽化（從蛹變蠅）的時間約24h。已知染色體上同一位置的基因A1、A2和A3分別控制羽化時間24h、19h和29h，但無法確定這三個基因的顯隱性關(guān)系?，F(xiàn)用一只羽化時間19h的雌蠅和一只羽化時間24h的雄蠅雜交，F(xiàn)1的羽化時間為24h∶19h∶29h=2∶1∶1。回答下列問題：（1）控制果蠅羽化時間的基因有A1、A2和A3三種，這說明基因突變具有_________性，這些基因遵循__________定律。（2）根據(jù)以上數(shù)據(jù)，無法確定控制羽化時間的基因是位于常染色體上，還是位于X染色體上，可通過統(tǒng)計(jì)_________________________________________________________來確定。若統(tǒng)計(jì)結(jié)果為_________________，則說明控制羽化時間的基因位于X染色體上，否則位于常染色體上。（3）若A1、A2、A3基因位于常染色體上，則它們的顯隱性關(guān)系是_________________，親本雄蠅的基因型是___________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解題分析】

A、Smac與IAPs反應(yīng)加強(qiáng)促進(jìn)細(xì)胞凋亡，將導(dǎo)致細(xì)胞中溶酶體活動增強(qiáng)，A錯誤；B、線粒體中的蛋白質(zhì)，有的是細(xì)胞核基因表達(dá)的產(chǎn)物，有的是線粒體基因表達(dá)的產(chǎn)物，依題意信息無法確定Smac基因與IAPs基因是屬于細(xì)胞核基因，還是屬于線粒體基因，因此不能得出“Smac基因與IAPs基因的表達(dá)過程一定在線粒體中進(jìn)行”的結(jié)論，B錯誤；C、體內(nèi)細(xì)胞的自然更新屬于細(xì)胞凋亡，而Smac與IAPs反應(yīng)可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，所以體內(nèi)細(xì)胞的自然更新速度與線粒體Smac釋放速度有關(guān)，C正確；D、線粒體促凋亡蛋白Smac是大分子物質(zhì)，是以胞吐的方式從線粒體釋放到線粒體外，需要消耗細(xì)胞代謝提供的能量，D錯誤。故選C，【題目點(diǎn)撥】本題以“線粒體促凋亡蛋白Smac”為素材，考查學(xué)生對細(xì)胞凋亡、細(xì)胞的物質(zhì)輸入與輸出等相關(guān)知識的識記和理解能力。解答此題的關(guān)鍵是熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識、形成知識網(wǎng)絡(luò)，更主要的是抓住題意中的關(guān)鍵信息，諸如“線粒體促凋亡蛋白Smac是細(xì)胞中一個促進(jìn)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白”、“Smac與凋亡抑制蛋白（IAPs）反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡”等等，將這些信息與所學(xué)知識有效地聯(lián)系起來，進(jìn)行圖文轉(zhuǎn)換、實(shí)現(xiàn)對知識的整合和遷移。2、A【解題分析】

基因表達(dá)是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程，基因表達(dá)產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)。基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)錄過程由RNA聚合酶進(jìn)行，以DNA為模板，產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動，留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的過程?！绢}目詳解】A、原核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯是同時進(jìn)行的，A錯誤；B、從圖中可知，色氨酸足量時，色氨酸和阻礙蛋白形成的復(fù)合物會阻止相關(guān)酶基因的轉(zhuǎn)錄，從而使色氨酸不能合成，以此維持色氨酸的平衡，B正確；C、基因“開啟”和“關(guān)閉”的調(diào)節(jié)機(jī)制屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié)，維持色氨酸的平衡，C正確；D、色氨酸的這種合成機(jī)制避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)，維持色氨酸數(shù)目的穩(wěn)定，D正確。故選A。【題目點(diǎn)撥】本題重點(diǎn)考查基因表達(dá)及反饋調(diào)節(jié)，通過示意圖讓學(xué)生了解色氨酸如何維持?jǐn)?shù)量恒定。3、A【解題分析】

原核細(xì)胞沒有染色體，分裂方式為二分裂；真核細(xì)胞的分裂方式為有絲分裂、無絲分裂和減數(shù)分裂；真核生物在減數(shù)分裂過程中核基因的遺傳符合孟德爾的遺傳定律?！绢}目詳解】A、基因的分離和自由組合可同時發(fā)生于減數(shù)第一次分裂后期，A正確；B、減數(shù)分裂過程中染色體數(shù)目減半發(fā)生在減數(shù)第一次分裂，B錯誤；C、細(xì)胞分裂過程中，細(xì)胞質(zhì)基因是隨機(jī)分配的，C錯誤；D、大腸桿菌為原核生物，沒有染色體，D錯誤。故選A?！绢}目點(diǎn)撥】本題考查細(xì)胞分裂和真原核細(xì)胞的比較，意在考查學(xué)生的識記和理解能力。4、D【解題分析】

根尖分生區(qū)細(xì)胞可以產(chǎn)生細(xì)胞分裂素促進(jìn)細(xì)胞分裂，根據(jù)題干的信息“正常植株根部較低水勢側(cè)細(xì)胞分裂素含量增加，而細(xì)胞分裂素缺陷體（MIZl）無根的向水化”，說明植物根的向水化與細(xì)胞分裂素的分布不均勻有關(guān)?！绢}目詳解】A、實(shí)驗(yàn)表明細(xì)胞分裂素的不對稱分布是控制根的向水化的重要決定因素，A正確；B、水分脅迫導(dǎo)致低水勢一側(cè)分生區(qū)細(xì)胞分裂素含量增加，使根向較高水勢側(cè)彎曲，B正確；C、若用一定的細(xì)胞分裂素不對稱處理MIZ1的根部，會表現(xiàn)出根向水化現(xiàn)象，C正確；D、植物根的向地性生長是生長素引起的能體現(xiàn)兩重性而根的向水化現(xiàn)象是由細(xì)胞分裂素引起的，兩側(cè)細(xì)胞分裂素都促進(jìn)細(xì)胞分裂，較低水勢側(cè)細(xì)胞分裂素含量增加，促進(jìn)作用更強(qiáng)，無法體現(xiàn)兩重性，D錯誤。故選D。【題目點(diǎn)撥】解答本題時需要結(jié)合植物相關(guān)彎曲生長是由于生長素分布不均勻引起的，將這個知識點(diǎn)遷移至根的向水化。5、B【解題分析】生物多樣性包含三個層次的多樣性：基因的多樣性、物種的多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性，所以本題選B。6、B【解題分析】

0-t1時刻，沒有光照，植物只進(jìn)行呼吸作用，給予光照后，植物進(jìn)行光合作用，并且光合作用大于呼吸作用，所以不斷有氧氣釋放，在密閉的容器中，CO2的量不斷減少，所以光合作用不斷降低，所以在t4時刻補(bǔ)充CO2光合作用速率上升?！绢}目詳解】A、t0~t1時刻，植物不能進(jìn)行光合作用，不斷進(jìn)行呼吸作用消耗氧氣，所以O(shè)2的含量應(yīng)持續(xù)下降，A正確；B、t3時刻，該植物氧氣釋放速率最大，所以光合作用強(qiáng)度最大，B錯誤；C、從曲線圖中看出在t4時刻，補(bǔ)充CO2后光合作用速率上升，所以t3~t4時刻，光合作用速率不斷下降的原因是缺少CO2，C正確；D、t4~t5，該綠色植物氧氣釋放速率不斷增加，所以其凈光合速率逐漸增大，D正確。故選B。【題目點(diǎn)撥】本題需要考生明確這是在密閉容器中完成的實(shí)驗(yàn)，CO2的含量是一定的，所以會影響光合作用的速率，進(jìn)而發(fā)生這個曲線的過程。二、綜合題：本大題共4小題7、消費(fèi)者捕食、競爭減少了其它魚類的天敵、為其它魚類提供了更多的食物和空間減少呼吸作用散失【解題分析】

消費(fèi)者直接或間接以綠色植物為食，消費(fèi)者的存在可促進(jìn)物質(zhì)的循環(huán)。生物之間的關(guān)系包括：種內(nèi)關(guān)系和種間關(guān)系。種內(nèi)關(guān)系又分為種內(nèi)互助和種內(nèi)斗爭；種間關(guān)系又有互利共生、寄生、捕食和種間競爭等。【題目詳解】（1）亞洲公魚和大銀魚屬于生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的消費(fèi)者，兩者都能捕食浮游動物（輪蟲和原生動物等也屬于浮游動物），產(chǎn)卵期的亞洲公魚會捕食大銀魚的魚卵和幼魚，所以二者之間的種間關(guān)系是捕食、競爭。（2）捕撈這兩種魚后，減少了一些魚類的天敵、為一些魚類提供了更多的食物和空間，所以有利于一些魚類種群的發(fā)展。若水體中水草和浮游植物的生物量明顯減少，則初級消費(fèi)者的數(shù)量（如浮游動物）會減少，進(jìn)而使次級消費(fèi)者的數(shù)量減少，亞洲公魚和大銀魚因食物來源減少，其種群數(shù)量將減小。（3）同化量中的能量大部分用于自身呼吸消耗，一部分用于生長、發(fā)育和繁殖?！绢}目點(diǎn)撥】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的成分和種間關(guān)系、生物數(shù)量的變化、能量流動的過程等相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的識記和應(yīng)用能力。8、（1）A（2）獲得單個菌落AD（3）A6基因突變具有多向性（4）①PCR（DNA測序）②一種氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子（或基因突變發(fā)生在非編碼區(qū)）【解題分析】（1）芽孢是細(xì)菌在惡劣環(huán)境中的意在休眠體．A．（2）圖1所示的b過程為菌落的稀釋，目的是為獲得單個菌落．A、倒平板時需要待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進(jìn)行，A正確；B、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要先進(jìn)行高壓滅菌處理，才能倒平板，B錯誤；C、倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋，C錯誤；D、平板冷凝后要倒置放置，D正確．（3）據(jù)圖2所示，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A6組，故酶催化能力最強(qiáng)的是A6組．由于基因突變具有不定向性，故各組酶催化能力存在差異．（4）①檢測是否發(fā)生基因突變可以用PCR（DNA測序）技術(shù)檢測．②如果A2、A5組芽孢桿菌發(fā)生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，這可能是因?yàn)橐环N氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子，隨基因發(fā)生突變，但不會改變翻譯出來的氨基酸．【考點(diǎn)定位】微生物的分離和培養(yǎng)；酶活力測定的一般原理和方法．9、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（或Taq酶）A和D基因表達(dá)載體的構(gòu)建Ⅰ和ⅡG418胚胎移植同期發(fā)情【解題分析】

1.PCR反應(yīng)的條件：模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、耐高溫的DNA聚合酶，其中，dNTP的作用是合成DNA的原料、提供能量。

2.基因工程的操作步驟為：提取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測和鑒定?！绢}目詳解】（1）根據(jù)分析可知，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，還應(yīng)含有耐高溫的DNA聚合酶。為了擴(kuò)增目的基因的片段，根據(jù)圖示可知需要在引物A和D作用下以目的基因的兩條鏈為模板合成子代目的基因。（2）由圖可知，過程①②是將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒，即基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程。重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，其作用是有利于篩選出含有目的基因的細(xì)胞。根據(jù)題意可知，氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞，因此應(yīng)選擇Neo′作為標(biāo)記基因，即質(zhì)粒上Neo′不能用限制酶切割，則過程①應(yīng)選用Ⅰ和Ⅱ兩種限制酶，圖中③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418以便于起到篩選的作用。（3）將桑椹胚通過胚胎移植技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)行該操作前需對受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證供體與受體處于相同或相近的生理狀態(tài)?！绢}目點(diǎn)撥】本題考查基因工程的知識點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因工程的操作步驟，把握基因表達(dá)載體構(gòu)建的過程及其標(biāo)記基因的作用，理解限制酶的作用并且能夠根據(jù)題意和圖示正確選擇限制酶，把握PCR擴(kuò)增技術(shù)需要的條件和引物的作用，這是該題考查的重點(diǎn)。10、解旋酶加熱至90~95℃氫鍵防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接2無色物質(zhì)K顯微注射技術(shù)蛋白質(zhì)【解題分析】

由圖可知，①表示將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，②表示植物組織培養(yǎng)，③表示將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞，④需要經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等。【題目詳解】（1）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，在解旋酶的作用下可以解開DNA雙鏈；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，加熱至90~95℃引起模板DNA解鏈為單鏈，上述兩個解鏈過程均破壞了DNA分子雙鏈間的氫鍵。（2）為了防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接，構(gòu)建表達(dá)載體的過程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸酶處理。目的基因兩端的序列均與質(zhì)粒連接，故在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成2個磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。（3）由于報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，故過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后，還應(yīng)轉(zhuǎn)接到含無色物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過程常用顯微注射法將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，還可以使用動物病毒作為載體，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（4）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，看其是否表達(dá)出H