生物安全實(shí)驗(yàn)室病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危險(xiǎn)評(píng)估實(shí)用教案

病原微生物危險(xiǎn)(wēixiǎn)程度分類主要依據(jù)：1、病原微生物的致病性；致病性越強(qiáng)，導(dǎo)致的疾病越嚴(yán)重，等級(jí)越高2、微生物的傳播方式和宿主(sùzhǔ)范圍人群已有免疫水平、密度和流動(dòng)、媒界、環(huán)境衛(wèi)生水平3、當(dāng)?shù)厮邆涞挠行ьA(yù)防措施疫苗接種、衛(wèi)生措施、傳染源和媒界的控制4、地所具備的有效治療措施第1頁/共31頁第一頁，共31頁。國內(nèi)外病原微生物危害程度分類(fēnlèi)比較國內(nèi)外病原(bìngyuán)微生物危害程度分類比較：1、《病原(bìngyuán)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》2、《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-20083、WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》第2頁/共31頁第二頁，共31頁?！恫≡⑸飳?shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2008WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》四類：在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。三類：能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播鳳險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。二類：能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。Ⅰ級(jí)：（低個(gè)體危害、低群體危害）不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。Ⅱ級(jí)（中等個(gè)體危害，有限群體危害）能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原微生物。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病、具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。Ⅲ級(jí)（高個(gè)體危害，低群體危害）能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的閏原微生物。Ⅰ級(jí)：（無或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）不太可能引起人或動(dòng)物致病的微生物。Ⅱ級(jí)（個(gè)體危害中等，群體危害低）病原微生物能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染、但對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的風(fēng)險(xiǎn)有限Ⅲ級(jí)（個(gè)體危害高，群體危害低）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)發(fā)生感染個(gè)體向其它個(gè)體的傳播，并且對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施。第3頁/共31頁第三頁，共31頁?！恫≡⑸飳?shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2008WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》一類：能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。Ⅳ級(jí)（高個(gè)體危害，高群體危害）能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或偶然接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原微生物。Ⅳ級(jí)（個(gè)體和群體危害均高）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個(gè)體之間的直接或間接傳播，對(duì)感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。第4頁/共31頁第四頁，共31頁?！度碎g傳染(chuánrǎn)的病原微生物名錄》頒布時(shí)間(shíjiān)：2006年1月11日核心內(nèi)容：對(duì)于常見病原微生物（病毒、細(xì)菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體和真菌）的常見實(shí)驗(yàn)操作的生物安全實(shí)驗(yàn)室等級(jí)提出了明確要求，以指導(dǎo)各單位涉及人間傳染的病原微生物的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。高致病性病原微生物：第一、二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。第5頁/共31頁第五頁，共31頁。

主要的病原微生物包括：1、《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定甲、乙類、丙類傳染病的病原微生物。2、國內(nèi)外常見的傳染病病原3、新發(fā)現(xiàn)(fāxiàn)的病原微生物4、國際上已宣布消滅的傳染病病原其中：病毒160類、細(xì)菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體155類，真菌59類，朊病毒（prion)6種第6頁/共31頁第六頁，共31頁。有關(guān)(yǒuguān)病毒的說明所涉及的病毒的操作級(jí)別主要指野生型病原微生物，重組(zhònɡzǔ)體另加說明一、實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的劃分：1、病毒培養(yǎng)：2、動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)：

3、未經(jīng)感染的感染性材料的操作4、滅活材料的操作5、無感染性材料的操作

第7頁/共31頁第七頁，共31頁。有關(guān)(yǒuguān)病毒的說明二、運(yùn)輸包裝分類：依據(jù)：國際民航組織文件Doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》分為A、B二類，A類B類聯(lián)合國編號(hào)UN2814（動(dòng)物UN2900）UN3373注：1、對(duì)于A類感染性物質(zhì)(wùzhì)，若表中未注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”，則包括涉及病毒的所有材料；對(duì)于注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”的A類感染性物質(zhì)(wùzhì)，則病毒培養(yǎng)物按UN2814包裝，其他標(biāo)本按UN3373的要求包裝和空運(yùn)。2、凡標(biāo)明B類的病毒和相關(guān)樣本均按UN3373要求包裝和空運(yùn)第8頁/共31頁第八頁，共31頁。有關(guān)(yǒuguān)病毒的說明三、有關(guān)事項(xiàng)的說明：1、一般情況下對(duì)現(xiàn)場和臨床的未知樣本檢測應(yīng)在二級(jí)以上生物安全防護(hù)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，若判定為疑似高致病性病原體，應(yīng)在相應(yīng)生物安全級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室開展工作(gōngzuò)。2、《名錄》中未列出的病毒和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，由各單位生物安全委員會(huì)負(fù)責(zé)危害程度評(píng)估，確定相應(yīng)的生物安全防護(hù)級(jí)別?！睹洝芬蚜谐龅牟《?，在實(shí)施活動(dòng)中根據(jù)具體情況進(jìn)行再評(píng)估，提高防護(hù)水平和級(jí)別。3、Prion為特殊病原體，對(duì)其單獨(dú)列出。4、人類病毒的重組體的使用。5、脊髓灰質(zhì)炎病毒：

第9頁/共31頁第九頁，共31頁。有關(guān)(yǒuguān)細(xì)菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體、真菌的說明一、實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的劃分：1、大量活菌操作(cāozuò)：2、動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)：3、樣本檢測：4、非感染性材料的實(shí)驗(yàn)二、運(yùn)輸包裝：A類：特指危害程度二類病原菌的菌株或活菌培養(yǎng)物，按UN2814的要求包裝和空運(yùn)；B類：其它危害程度二類病原菌的樣本和三類病原菌及相關(guān)樣本；第10頁/共31頁第十頁，共31頁。有關(guān)細(xì)菌(xìjūn)、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體、真菌的說明三、其它說明：1、一般情況下對(duì)現(xiàn)場和臨床的未知樣本檢測應(yīng)在二級(jí)以上生物安防護(hù)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但此項(xiàng)工作僅限于對(duì)樣本中病原菌的初步分離鑒定，一旦病原菌初步明確，應(yīng)按病原菌的危害類別將轉(zhuǎn)移至相應(yīng)級(jí)別的生物安全實(shí)驗(yàn)室開展工作。2、霍亂屬甲類傳染病，霍亂弧菌流行株按第二類管理，其菌株或活菌培養(yǎng)物，運(yùn)輸包裝分類屬A類。因該類病原不經(jīng)過氣溶膠傳播，涉及大量活菌培養(yǎng)等工作可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行；非流行株歸為三類。3、肉毒梭菌可產(chǎn)生肉毒素，肉毒毒素是已知毒性(dúxìnɡ)最高的細(xì)菌性毒素屬于神經(jīng)毒素?！睹洝分袑⑷舛舅缶隁w為第二類，運(yùn)輸時(shí)按A類標(biāo)準(zhǔn)包裝。4、《名錄》未列之的病原菌和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，由各單位生物安全委員會(huì)負(fù)責(zé)危害程度評(píng)估，確定相應(yīng)的生物安全防護(hù)級(jí)別。5、《名錄》中未列國家正式批準(zhǔn)的生物制品、疫苗生產(chǎn)用減毒、弱毒菌（毒）株。該類菌（毒）株分類地位另行規(guī)定。第11頁/共31頁第十一頁，共31頁。病原(bìngyuán)微生物危害評(píng)估的要素一、病原微生物危害評(píng)估的要素：主要依據(jù)：病原微生物背景資料試驗(yàn)活動(dòng)可能產(chǎn)生的危害1、病原微生物背景資料：1）病原微生物的致病性和感染數(shù)量2）暴露的潛在后果(hòuguǒ)A：隱性感染或不顯性感染或亞臨床感染B：顯性感染或臨床傳染病C：是否出現(xiàn)個(gè)體最嚴(yán)重的結(jié)局，發(fā)生嚴(yán)重型臨床傳染病死亡。

第12頁/共31頁第十二頁，共31頁。病原(bìngyuán)微生物危害評(píng)估的要素3）自然傳播途經(jīng)。4）病原微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性。5）病原微生物的宿主。6）從動(dòng)物研究和實(shí)驗(yàn)室感染報(bào)告或臨床報(bào)告中得到的信息。7）當(dāng)?shù)厥欠衲苓M(jìn)行有效的預(yù)防(yùfáng)和治療2、擬從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的危險(xiǎn)分析：1）操作所致的非自然途經(jīng)感染2）病原微生物的種類、來源3）操作病原微生物的濃度4）實(shí)驗(yàn)操作5）涉及動(dòng)物的病原微生物實(shí)驗(yàn)室

第13頁/共31頁第十三頁，共31頁。病原(bìngyuán)微生物危害評(píng)估的要素6）工作人員的素質(zhì)。3、評(píng)估結(jié)論應(yīng)考慮的要點(diǎn)：A：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容與對(duì)各實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)的分析，明確危害的來源和危害因素B：進(jìn)行固有風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估C：進(jìn)行殘余風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估D：確定(quèdìng)殘余風(fēng)險(xiǎn)4、針對(duì)不同類型的病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)估的原則

第14頁/共31頁第十四頁，共31頁。病原微生物危害評(píng)估(pínɡɡū)的要素1）含已知的病原微生物的物質(zhì)著重考慮收集(shōují)資料為重點(diǎn)2）含未知病原微生物的物質(zhì)重點(diǎn)：A：該含未知病原微生物的物質(zhì)為什么為可疑樣本B：對(duì)現(xiàn)有的流行病資料進(jìn)行分析C：可疑的傳播途經(jīng)是什么D：根據(jù)發(fā)病率和死亡率資料探討其危害程度E：可參考病人的臨床資料第15頁/共31頁第十五頁，共31頁。病原微生物實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)(huódòng)危害的再評(píng)估1、生物安全實(shí)驗(yàn)室正式啟用前2、收集(shōují)的資料表明所從事的病原微生物的致病性、毒力或傳染方式發(fā)生變化3、增加新的項(xiàng)目4、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中分離到原評(píng)估中未涉及的高致病性病原微生物5、發(fā)現(xiàn)隱患或存在生物安全的問題第16頁/共31頁第十六頁，共31頁。微生物危害(wēihài)評(píng)估的用途1、確定生物安全防護(hù)水平(shuǐpíng)2、根據(jù)評(píng)估的結(jié)果，制定相關(guān)的操作程序和管理規(guī)程3、掌握相關(guān)的微生物的背景知識(shí)4、評(píng)價(jià)病原微生物實(shí)驗(yàn)室安全狀況的依據(jù)第17頁/共31頁第十七頁，共31頁。麻疹病毒危害(wēihài)評(píng)估報(bào)告

版號(hào)：第1版文件編號(hào)：1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)，完善實(shí)驗(yàn)室管理，確保實(shí)驗(yàn)室生物安全。2.

適用范圍本文件適用于XX疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科。3.職責(zé)3.1檢測人員：按照本文件的要求(yāoqiú)開展相關(guān)工作。3.2質(zhì)量監(jiān)督員：按照本文件的要求(yāoqiú)對(duì)檢測人員進(jìn)行監(jiān)督。3.3科室負(fù)責(zé)人：按照本文件的要求(yāoqiú)對(duì)科室進(jìn)行管理。第18頁/共31頁第十八頁，共31頁。麻疹病毒危害(wēihài)評(píng)估報(bào)告4.程序4.1危害程度分類等級(jí)(děngjí)4.1.1麻疹是兒童最常見的急性呼吸道傳染病。通過飛沫直接傳播，人是自然宿主，人群普遍易感。根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，屬丙類傳染病。4.1.2根據(jù)2006年衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》，麻疹病毒屬于第三類病原微生物。運(yùn)輸包裝：B類，UN編號(hào)：UN3373。第19頁/共31頁第十九頁，共31頁。A類感染性物質(zhì)(wùzhì)

（Infectioussubstances,CategoryA）UN2814恰當(dāng)?shù)倪\(yùn)輸名稱是“感染性物質(zhì)，感染人類”UN2900恰當(dāng)?shù)倪\(yùn)輸名稱是“感染性物質(zhì)，僅感染動(dòng)物(dòngwù)”B類感染性物質(zhì)的編號(hào)為UN3373UN3373恰當(dāng)?shù)倪\(yùn)輸名稱是“診斷樣本”或“臨床樣本”第20頁/共31頁第二十頁，共31頁。麻疹病毒危害評(píng)估(pínɡɡū)報(bào)告4.2不同實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別4.2.1病毒分離與鑒定：根據(jù)《名錄的要求》，務(wù)必在BSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。4.2.2PCR檢測：麻疹病毒未經(jīng)滅活，提取病毒核酸，務(wù)必在BSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行；確認(rèn)病毒滅活措施有效后，可在BSL-1實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行PCR檢測。4.2.3血清學(xué)檢測：血清未滅活前，檢測麻疹病毒抗體(kàngtǐ)，需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行；血清滅活后可在BSL-1實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行操作。第21頁/共31頁第二十一頁，共31頁。麻疹病毒危害評(píng)估(pínɡɡū)報(bào)告4.3擬從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的危險(xiǎn)性分析及相應(yīng)的預(yù)防措施4.3.1標(biāo)本采集4.3.1.1咽拭子：采集時(shí)近距離接觸患者(huànzhě)，可能通過空氣、飛沫傳播而引起感染，操作者必須加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)（工作服、口罩、帽子、一次性乳膠手套等）。4.3.1.2血清：可能產(chǎn)生的危害是采集時(shí)使用注射器不當(dāng)，造成的扎傷引起經(jīng)血液感染，操作者必須戴手套，禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。第22頁/共31頁第二十二頁，共31頁。麻疹病毒危害(wēihài)評(píng)估報(bào)告4.3.2病毒分離：吸取(xīqǔ)病毒液接種細(xì)胞，液體有可能滴灑、濺出或在吹打混勻過程中形成氣溶膠。因此，操作必須在BSL-2實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行第23頁/共31頁第二十三頁，共31頁。麻疹病毒危害(wēihài)評(píng)估報(bào)告4.3.2病毒分離：操作臺(tái)面應(yīng)鋪浸有消毒劑的紗布或一次性吸水墊，一旦發(fā)生意外，立即將污染的紗布或吸水墊棄入含10%有效氯的次氯酸鈉的消毒缸內(nèi)，立即消毒臺(tái)面并更換新的紗布或吸水墊。換液過程中動(dòng)作要輕柔勿劇烈(jùliè)，棄液時(shí)應(yīng)將吸管插入消毒液中。第24頁/共31頁第二十四頁，共31頁。麻疹病毒危害(wēihài)評(píng)估報(bào)告4.3.3PCR檢測：PCR實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格功能分區(qū)，防止(fángzhǐ)病原體核酸和環(huán)境雙向污染。PCR過程中與核酸或cDNA接觸的吸頭回收至密閉容器內(nèi)。使用的一次性手套等物品，務(wù)必置于密閉垃圾桶內(nèi)。第25頁/共31頁第二十五頁，共31頁。麻疹病毒