第九章 環(huán)境工程中的微生物應(yīng)用

第九章環(huán)境工程中的微生物應(yīng)用第1頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月有機(jī)污染物種類來源人工合成天然成分分子量復(fù)雜簡單濃度高濃度低濃度形態(tài)固態(tài)液態(tài)氣態(tài)降解能力可生物降解非生物降解決定是否采用微生物處理、選用哪種微生物處理方法決定是否采用微生物處理、選用哪種微生物處理方法9.2微生物技術(shù)在污水處理中的應(yīng)用

第2頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月依據(jù)微生物在構(gòu)筑物中處于懸浮狀態(tài)或固著狀態(tài)劃分第3頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月9.2.1好氧微生物處理

有機(jī)污染物好氧微生物處理的一般途徑第4頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月9.2.1好氧微生物處理

第5頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月污染物的吸附轉(zhuǎn)化情況廢水中的污染物無機(jī)懸浮固體污染物不可生物降解有機(jī)懸浮固體污染物可生物降解有機(jī)懸浮固體污染物可生物降解的有機(jī)溶解性污染物無機(jī)溶解性污染物不可生物降解有機(jī)溶解性污染物基本吸附于微生物表面混入污泥轉(zhuǎn)化為新的微生物機(jī)體和CO2、H2O部分轉(zhuǎn)移到新的生物機(jī)體中部分留于廢水中基本留于廢水中第6頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1、活性污泥法（1）活性污泥的基本特性組成：有機(jī)和無機(jī)的固體好氧微生物兼性厭氧微生物專性厭氧微生物絮狀體或絨粒依靠曝氣池中懸浮流動著的活性污泥來分解有機(jī)物.

活性污泥：以降解有機(jī)污染物的微生物為主體，與污水中懸浮物、膠體物質(zhì)組成的絮狀混合物。第7頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）活性污泥的基本特性

性質(zhì)：含水率99%具沉降性；具生物活性絮體大小為0.02—0.2mm具一定pH緩沖能力完合混合式曝氣池：分布均勻推流式曝氣池：各區(qū)段之間存在種群和數(shù)量差異微生物分布狀態(tài)：第8頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）活性污泥的基本特性污泥中微生物的濃度：混合懸浮固體（MLSS）：1L活性污泥混合液中含干固體的毫克數(shù)（有機(jī)和無機(jī)）混合液揮發(fā)性懸浮固體（MLVSS）：1L活性污泥中含恒量、干的揮發(fā)性固體的毫克數(shù)（代表有機(jī)固體——微生物）一般的城市污水處理：2000~3000mg/L工業(yè)廢水處理：3000mg/L左右高濃度的工業(yè)廢水生物處理：3000~5000mg/L。第9頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）活性污泥的基本特性活性污泥的生物相：菌膠團(tuán)：有些細(xì)菌由于其遺傳特性決定，細(xì)菌之間按一定的排列方式互相粘集在一起，被一個公共莢膜包圍形成一定形狀的細(xì)菌集團(tuán)，叫做菌膠團(tuán)。菌膠團(tuán)中的菌體，由于包埋于膠質(zhì)中，故不易被原生動物吞噬，有利于沉降。活性污泥常見微生物：細(xì)菌，放線菌、真菌，原生動物和后生動物，它們組成了一個特有的生態(tài)系統(tǒng)。污泥膨脹：活性污泥沉降性能變差的現(xiàn)象。有非絲狀菌性膨脹和絲狀菌性膨脹兩種，前者系因黏性物質(zhì)大量積累而引起，后者系絲狀菌異常增長而引起。第10頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）活性污泥法凈化反應(yīng)過程

(1)在良好的狀態(tài)下，無機(jī)和不可降解的懸浮固體經(jīng)活性污泥法處理，基本上被微生物吸附，其量不變。

(2)對于城市生活污水，其中可生物降解的有機(jī)物量約為2/3轉(zhuǎn)化為微生物細(xì)胞，1/3氧化為CO2和水。氧化過程釋放的能量供微生物繁殖和活動之需。第11頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

(3)活性污泥法統(tǒng)中，既存在著有機(jī)物質(zhì)的代謝和微生物的增長繁殖，也存在著細(xì)胞物質(zhì)的自身代謝和微生物之間通過食物鏈進(jìn)行的代謝過程。

(4)由于內(nèi)源代謝產(chǎn)物的不可生物降解性，使可生物降解有機(jī)物的化學(xué)需氧量CODB不等于完全生化需氧量BODL。

(5)各種形態(tài)的活性污泥的細(xì)胞組成基本相同。根據(jù)分析，其組成可用C5H9O2.5N或C5H7NO2表示。第12頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月傳統(tǒng)活性污泥法漸減曝氣分步曝氣完全混合法淺層曝氣深層曝氣高負(fù)荷曝氣或變形曝氣克勞斯法延時曝氣接觸穩(wěn)定法氧化溝純氧曝氣活性污泥生物濾池（ABF工藝）吸附－生物降解工藝（AB法）序批式活性污泥法（SBR法）（3）活性污泥法的主要類型有機(jī)物去除和氨氮硝化第13頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月活性污泥增長速率有機(jī)物的濃度有機(jī)物的降解速率需氧速率溶氧濃度池首到池尾的動態(tài)變化傳統(tǒng)活性污泥法第14頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)點：BOD5去除率可達(dá)90%適于處理凈化程度和穩(wěn)定程度要求較高的污水對污水處理程度比較靈活缺點：溶解氧的供求矛盾推流式活性污泥法第15頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月在推流式的傳統(tǒng)曝氣池中，混合液的需氧量在長度方向是逐步下降的。實際情況是：前半段氧遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，后半段供氧量超過需要。漸減曝氣的目的就是合理地布置擴(kuò)散器，使布?xì)庋爻套兓偟目諝饬坎蛔?，這樣可以提高處理效率。漸減曝氣第16頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

漸減曝氣

第17頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

把入流的一部分從池端引入到池的中部，分段多點進(jìn)水。

階段曝氣法

分布曝氣示意圖第18頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

吸附再生活性污泥法

混合液曝氣過程中第一階段BOD5的下降是由于吸附作用造成的，對于溶解的有機(jī)物，吸附作用不大或沒有，因此，把這種方法稱為接觸穩(wěn)定法，也叫吸附再生法?；旌弦旱钠貧馔瓿闪宋阶饔?，回流污泥的曝氣完成穩(wěn)定作用。第19頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月直接用于原污水的處理比用于初沉池的出流處理效果好；可省去初沉池；此方法剩余污泥量增加。

吸附再生活性污泥法

第20頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

完全混合法

在分步曝氣的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步大大增加進(jìn)水點，同時相應(yīng)增加回流污泥并使其在曝氣池中迅速混合，長條形池子中也能做到完全混合狀態(tài)。第21頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）池液中各個部分的微生物種類和數(shù)量基本相同，生活環(huán)境也基本相同。（2）入流出現(xiàn)沖擊負(fù)荷時，池液的組成變化較小，增加的負(fù)荷可為全池混合液所分擔(dān)，而不是像推流中僅由部分回流污泥承擔(dān)。完全混合池是一個大的緩沖器和均和池，在工業(yè)污水的處理中有一定優(yōu)點。（3）池液里各個部分的需氧量比較均勻。

完全混合法的特征

完全混合法第22頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月第23頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

延時曝氣的特點：曝氣時間很長，達(dá)24h甚至更長，MLSS較高，達(dá)到3000～6000mg/L；活性污泥在時間和空間上部分處于內(nèi)源呼吸狀態(tài)，剩余污泥少而穩(wěn)定，無需消化，可直接排放；適用于污水量很小的場合，近年來，國內(nèi)小型污水處理系統(tǒng)多有使用。

延時曝氣

第24頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月第25頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月深層曝氣深井曝氣法處理流程深井曝氣池簡圖第26頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月序批式活性污泥法（SBR法）

SBR工藝的基本運行模式由進(jìn)水、反應(yīng)、沉淀、出水和閑置五個基本過程組成，從污水流入到閑置結(jié)束構(gòu)成一個周期，在每個周期里上述過程都是在一個設(shè)有曝氣或攪拌裝置的反應(yīng)器內(nèi)依次進(jìn)行的。

第27頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

(1)工藝系統(tǒng)組成簡單，不設(shè)二沉池，曝氣池兼具二沉池的功能，無污泥回流設(shè)備；(2)耐沖擊負(fù)荷，在一般情況下（包括工業(yè)污水處理）無需設(shè)置調(diào)節(jié)池；(3)反應(yīng)推動力大,易于得到優(yōu)于連續(xù)流系統(tǒng)的出水水質(zhì);(4)運行操作靈活，通過適當(dāng)調(diào)節(jié)各單元操作的狀態(tài)可達(dá)到脫氮除磷的效果；(5)污泥沉淀性能好,SVI值較低,能有效地防止絲狀菌膨脹;(6)該工藝的各操作階段及各項運行指標(biāo)可通過計算機(jī)加以控制，便于自控運行，易于維護(hù)管理。序批式活性污泥法（SBR法）第28頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

(1)容積利用率低；(2)水頭損失大；(3)出水不連續(xù)；(4)峰值需氧量高；(5)設(shè)備利用率低；(6)運行控制復(fù)雜；(7)不適用于大水量。

序批式活性污泥法（SBR法）SBR工藝的缺點第29頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月吸附－生物降解工藝（AB法）第30頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月A級以高負(fù)荷或超高負(fù)荷運行，B級以低負(fù)荷運行，A級曝氣池停留時間短，30～60min，B級停留時間2～4h。該系統(tǒng)不設(shè)初沉池，A級曝氣池是一個開放性的生物系統(tǒng)。A、B兩級各自有獨立的污泥回流系統(tǒng)，兩級的污泥互不相混。處理效果穩(wěn)定，具有抗沖擊負(fù)荷和pH變化的能力。該工藝還可以根據(jù)經(jīng)濟(jì)實力進(jìn)行分期建設(shè)。吸附－生物降解工藝（AB法）第31頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

氧化溝是延時曝氣法的一種特殊形式，它的池體狹長，池深較淺，在溝槽中設(shè)有表面曝氣裝置。

曝氣裝置的轉(zhuǎn)動，推動溝內(nèi)液體迅速流動，具有曝氣和攪拌兩個作用，溝中混合液流速約為0.3～0.6m/s，使活性污泥呈懸浮狀態(tài)。氧化溝第32頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月活性污泥生物濾池（ABF工藝）

上圖為ABF的流程，在通常的活性污泥過程之前設(shè)置一個塔式濾池，它同曝氣池可以是串聯(lián)或并聯(lián)的。第33頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月塔式濾池濾料表面附著很多的活性污泥，因此濾料的材質(zhì)和構(gòu)造不同于一般生物濾池。濾池也可以看作采用表面曝氣特殊形式的曝氣池，塔是一外置的強(qiáng)烈充氧器。因而ABF可以認(rèn)為是一種復(fù)合式活性污泥法?；钚晕勰嗌餅V池（ABF工藝）第34頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1、活性污泥法（4）活性污泥運行的影響因素及其控制a.溶解氧（OD）供氧不足溶解氧濃度過低微生物代謝受阻凈化功能下降易于滋生絲狀菌產(chǎn)生污泥膨脹現(xiàn)象在曝氣池出口處的混合液中的溶解氧保持在2mg/L左右溶解氧濃度過高氧的利用效率降低增加動力費用第35頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1、活性污泥法

（4）活性污泥運行的影響因素及其控制b.水溫

最適溫度：15—30℃最低溫度：10℃c.營養(yǎng)物質(zhì)

一是各種營養(yǎng)物質(zhì)比例要適宜。二是營養(yǎng)物質(zhì)的濃度要適中有機(jī)負(fù)荷率（BOD污泥負(fù)荷）F/M：表示曝氣池內(nèi)單位質(zhì)量的活性污泥在單位時間內(nèi)承受的有機(jī)基質(zhì)的量。[kg/(kg·d)]第36頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1、活性污泥法（4）活性污泥運行的影響因素及其控制d.pH最適pH介于6.5~8.5之間低于4.5：原生動物消失，絲狀菌占優(yōu)勢高于9.0，微生物的代謝受抑制第37頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1、活性污泥法（4）活性污泥運行常見的微生物學(xué)問題e、二沉池中泥水分離

a.不凝聚b.微小絮體c.起泡沫d.絲狀菌污泥膨脹弄清楚其產(chǎn)生原因及解決對策第38頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法依靠固著于載體表面的微生物膜來凈化有機(jī)物（附著生長反應(yīng)器）碎石卵石焦炭塑料材料

生物膜是由高度密集的好氧菌、厭氧菌、兼性菌、真菌、原生動物以及藻類等組成的生態(tài)系統(tǒng)，其附著的固體介質(zhì)稱為濾料或載體。

第39頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法

（1）構(gòu)造及凈化機(jī)理生物膜自濾料向外可分為厭氣層、好氣層、附著水層、運動水層。原理：生物膜首先吸附附著水層有機(jī)物，由好氣層的好氣菌將其分解，再進(jìn)入?yún)挌鈱舆M(jìn)行厭氣分解，流動水層則將老化的生物膜沖掉以生長新的生物膜，如此往復(fù)以達(dá)到凈化污水的目的。第40頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法

（2）生物膜法的基本流程第41頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月a、對水量、水質(zhì)、水溫變動適應(yīng)性強(qiáng)；b、處理效果好并具良好硝化功能；c、污泥量?。s為活性污泥法的3／4）且易于固液分離；d、動力費用省。e、生物多樣性高f、食物鏈長2、生物膜法

（3）生物膜法的主要特征第42頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法

（4）生物膜反應(yīng)器運行方式a.普通生物濾池

優(yōu)點：處理效果好出水水質(zhì)穩(wěn)定運行穩(wěn)定濾料表面積是濾池凈化效果的關(guān)鍵因素第43頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法

（4）生物膜反應(yīng)器運行方式b.生物轉(zhuǎn)盤

生物轉(zhuǎn)盤盤片接觸反應(yīng)槽轉(zhuǎn)軸驅(qū)動裝置第44頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法

（4）生物膜反應(yīng)器運行方式C、生物接觸氧化法在生物接觸氧化池內(nèi)裝填一定數(shù)量的填料，利用棲附在填料上的生物膜和充分供應(yīng)的氧氣,通過生物氧化作用,將廢水中的有機(jī)物氧化分解,達(dá)到凈化目的。生物接觸氧化法具有生物膜法的基本特點，但又與一般生物膜法不盡相同。一是供微生物棲附的填料全部浸在廢水中。二是采用機(jī)械設(shè)備向廢水中充氧也可稱為曝氣循環(huán)型濾池或接觸曝氣池。三是池內(nèi)廢水中還存在約2～5％的懸浮狀態(tài)活性污泥，對廢水也起凈化作用。第45頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、生物膜法（4）生物膜反應(yīng)器運行方式d.生物流化床生物流化床是指以砂（或無煙煤、活性炭等）作填料并作為生物膜載體，廢水自下向上流過砂床使載體層呈流動狀態(tài)，從而在單位時間加大生物膜同廢水的接觸面積和充分供養(yǎng)，并利用填料沸騰狀態(tài)強(qiáng)化廢水生物處理過程的構(gòu)筑物。第46頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月9.2.2厭氧處理技術(shù)

厭氧處理的基本原理有機(jī)物厭氧分解生成甲烷的過程（1)發(fā)酵性細(xì)菌(2)產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸細(xì)菌(3)同型產(chǎn)乙酸菌(4)利用H2和CO2產(chǎn)甲烷菌（30%）(5)分解乙酸的產(chǎn)甲烷菌（70%）4H2+C02→CH4＋2H20CH3C00H→CH4+C02產(chǎn)甲烷化學(xué)過程第47頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月厭氧生物處理中的微生物類型

產(chǎn)甲烷菌非產(chǎn)甲烷菌發(fā)酵細(xì)菌產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸菌同型產(chǎn)乙酸菌第48頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月厭氧活性污泥處理的工藝流程其中厭氧活性污泥反應(yīng)器是工藝中的核心廢水調(diào)節(jié)池?zé)峤粨Q器↑37℃厭氧活性污泥反應(yīng)器氣柜沉淀池出水回流污泥剩余污泥第49頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月厭氧生物處理運行方式1、普通消化池

7.活動蓋板1.進(jìn)料口2.出料間3.隔墻4.發(fā)酵間5.貯氣箱6.導(dǎo)氣管圓形消化池的結(jié)構(gòu)第50頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、厭氧接觸消化池

第51頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3、厭氧生物濾池

第52頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

第二代厭氧反應(yīng)器4、UASB反應(yīng)器influentSludgebed污泥沉降沼氣阻擋收集effluent第53頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月

5、第三代厭氧生物反應(yīng)器厭氧膨脹顆粒污泥床內(nèi)循環(huán)反應(yīng)器升流式污泥床過濾器填料EGSBICUBF第54頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月9.2.3生物脫氮、除磷技術(shù)A/O脫氮工藝廢水好氧脫碳缺氧反硝化沉淀池好氧硝化沉淀池1好氧活性污泥回流缺氧活性污泥回流出水回流？1、微生物脫氮（一)工藝活性污泥法典型工藝——A/O工藝（缺氧、好氧工藝）第55頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月(二)脫氮原理缺氧反硝化細(xì)菌：反硝化細(xì)菌（兼性厭氧菌）反應(yīng)：NO3-—N反硝化還原為N2，溢出水面釋放到大氣碳源：原水中BOD硝酸鹽來源：回流出水中的硝化產(chǎn)物第56頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月好氧脫碳硝化脫碳——氧化去除COD脫碳菌——好氧有機(jī)物呼吸的細(xì)菌，以有機(jī)物為碳源硝化菌——好氧氨鹽呼吸的細(xì)菌，以碳酸鹽為碳源（NH4+→NO2-→NO3-)提問：為什么先脫碳、后脫氮？硝化菌的碳源是脫碳菌的代謝產(chǎn)物；有機(jī)碳源豐富時，脫碳菌世代周期短生長迅速，硝化菌氧利用不足，生長緩慢；第57頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月提問：硝化脫氮時有時需要補堿（Na2CO3或NaOH)?硝化作用消耗堿（NH4+、CO3-），水pH下降；補充碳源、升高pH提問：硝化菌世代周期長，容易從活性污泥系統(tǒng)中被洗掉，如何解決？掛生物膜或投加懸浮填料定期投菌第58頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月兩級濾池法工藝流程好氧脫碳硝化濾池進(jìn)水厭氧反硝化濾池

出水甲醇補充反硝化菌的碳源！利用進(jìn)水中的BOD第59頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、微生物除磷原理、工藝及其微生物（BOD：N：P）100：5：1——微生物除碳的同時吸收磷元素用以合成細(xì)胞物質(zhì)和合成ATP等，但只去除污水中約19％左右的磷。某些高含磷廢水中殘留的磷還相當(dāng)高，故需用除磷工藝處理。

1）．微生物除磷原理依靠聚磷菌（兼性厭氧菌）聚磷，再從水中除去這些細(xì)菌。第60頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月好氧時：大量繁殖（消耗好氧狀態(tài)能源——聚β-羥基丁二酸（PHB）），

逆濃度梯度過量吸磷（貯備厭氧狀態(tài)能源——多聚磷酸鹽顆粒(即異染顆粒)）；厭氧時：正相反——不繁殖，釋放磷酸鹽于體外（產(chǎn)生能量供其儲備消耗好氧狀態(tài)能源——PHB）。聚P聚P聚P聚P部分回流做種大部分（P）去除水中P第61頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2）．工藝簡介常見的脫磷工藝如下圖所示進(jìn)水厭氧放磷好氧聚磷出水部分污泥回流接種剩余污泥處理沉淀脫磷第62頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月9.6.1飲用水的微生物檢測

菌落總數(shù)——需氧情況下，37℃培養(yǎng)48h，能在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長的細(xì)菌菌落總數(shù).作用：判定水體被細(xì)菌污染的程度基本操作一般包括：樣品的稀釋－－傾注平皿－－培養(yǎng)48小時－－計數(shù)報告1、細(xì)菌總數(shù)9.6水和空氣的微生物檢測與控制第63頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)編號項目標(biāo)準(zhǔn)值生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB5749-85細(xì)菌總數(shù)(個/mL)≤100總大腸菌群(個/L)≤3生活飲用水源水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)CJ3020-93總大腸菌群(個/L)一級≤1000二級≤10000地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB3838-2002糞大腸菌群(個/L)Ⅰ≤200Ⅱ≤2000Ⅲ≤10000Ⅳ≤20000Ⅴ≤40000地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB/T14848-93細(xì)菌總數(shù)(個/mL)Ⅰ～Ⅲ≤100Ⅳ≤1000Ⅴ﹥1000總大腸菌群(個/L)Ⅰ～Ⅲ≤3Ⅳ≤100Ⅴ﹥100景觀娛樂用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB12941-91總大腸菌群(個/L)糞大腸菌群(個/L)A類≤10000A類≤2000農(nóng)業(yè)灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB5084-92糞大腸菌群(個/L)≤10000漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB11607-89總大腸菌群(個/L)≤5000≤500（貝類養(yǎng)殖水質(zhì)）海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB3097-1997總大腸菌群(個/L)≤10000≤700（貝類養(yǎng)殖水質(zhì)）第64頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月1）、樣品的處理和稀釋操作要求：“無菌操作”貫徹始終。充分振搖或研磨25g或25ml檢樣225mL稀釋液含有玻璃珠的滅菌玻璃瓶或乳缽1：10稀釋液。1ml1ml1ml9ml稀釋液1：1009ml稀釋液1：10009ml稀釋液1：10000第65頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月減少誤差：每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管，將吸管內(nèi)液體沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀釋液內(nèi)，并且稀釋液應(yīng)充分振搖。環(huán)境要求：瓊脂平板在工作臺暴露15分鐘，每個平板不得超過15個菌落。代表性：取固體樣品時需多采幾個部位，且經(jīng)過均質(zhì)或研磨；液體樣品須經(jīng)過振搖，以獲得均勻稀釋液。第66頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2）、稀釋樣品的取樣和傾注平皿每個稀釋度做兩個平皿將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動平皿，混合均勻。傾注平皿1：10稀釋液225mL無菌水1mL1mL9mL稀釋液1：1009mL稀釋液1：10001mL1mL1mL1mL1mL1mL1ml無菌水25g或25ml檢樣第67頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月3）、培養(yǎng)及計數(shù)培養(yǎng)條件：倒置于36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h計數(shù)時間：到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間，應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù)，應(yīng)將平板放置于0－4℃，但不得超過24h。菌落總數(shù)報告方式

計平皿中菌落數(shù)：肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查。記下各平板的菌落總數(shù)，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)。規(guī)律：不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比（同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近。第68頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月報告原則菌落總數(shù)報告方式

例次不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個稀釋度菌落數(shù)之比菌落數(shù)(個/mL)報告方式(個/mL)10-110-210-31136516420—22760295461.632890271602.24無法計數(shù)4650513—527115—6無法計數(shù)30512—7無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)164001.6×104377503.8×104271002.7×1045130005.1×1052702.7×102305003.1×10410-3無法計數(shù)第69頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月菌落總數(shù)報告方式

計數(shù)原則：選平均菌落數(shù)在30~300之間者進(jìn)行計算2.若有2個稀釋度的平均菌落數(shù)在30~300之間時，則按兩者的菌落總數(shù)之比來決定，若比值小于2應(yīng)報告兩者的平均數(shù)；若大于2則報告其中較小的菌落總數(shù)。3.若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，以稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。4.若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。1.僅1個稀釋度的平均菌落數(shù)在此范圍時，則以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)報告之。第70頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月5.若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間，則以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。6.若所有的菌落數(shù)勻為“無法計數(shù)”時，應(yīng)注明水樣的最大稀釋倍數(shù)。7.在求同稀釋度的平均數(shù)時，若其中1個平板上有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的平均菌落數(shù)。若片狀菌落約為平板的一半，而另一半平板上菌落分布很均勻，則可按半平板上的菌落計數(shù)，然后乘以2作為整個平板的菌落數(shù)。第71頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月4）、菌落總數(shù)報告方式

菌落數(shù)的報告，按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時，按實有數(shù)字報告，如大于100時，則報告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計算。為了縮短數(shù)字后面的零位，可用10的指數(shù)來表示。

固體檢樣以克（g)為單位報告，液體檢樣以毫升（mL）為單位報告，表面涂擦則以平方厘米（cm2）報告。第72頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月2、大腸菌群測定

——國家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法

1）、檢驗查表方法大腸菌群——需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)證實試驗樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。挑取平板上的可疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

第73頁，課件共79頁，創(chuàng)作于2023年2月較清潔樣品的三步法圖示

100mL50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液100mL5mL5mL5