醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測課件

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測1一、物體表面的消毒效果監(jiān)測二、手衛(wèi)生效果的監(jiān)測三、空氣的消毒效果監(jiān)測四、紫外線消毒的效果監(jiān)測五、內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測六、消毒液的監(jiān)測七、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測八、環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測分類2一、物體表面的消毒效果監(jiān)測3物體表面的消毒效果監(jiān)測采樣時間：在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關時進行采樣。采樣面積：被采面積＜100cｍ2

，取全部表面；采樣面積≥100cｍ2，取100cｍ2

。4采樣方法：棉拭子法：用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積 。剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml無菌檢驗用洗脫液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時，采樣液應含相應中和劑。物體表面的消毒效果監(jiān)測5物體表面的消毒效果監(jiān)測5*5cm6步驟（在25c㎡規(guī)格板內橫豎往返均勻涂抹各5次，連續(xù)采4個規(guī)格板面積）7物體表面的消毒效果監(jiān)測檢測方法：充分震蕩采樣管后，取不同稀釋倍數的洗脫液

1.0ml接種平皿，將冷至40℃～45℃的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml～20ml，36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計數菌落數。懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關時，進行目標微生物的檢測。物體表面的消毒效果監(jiān)測8物體表面的消毒效果監(jiān)測物體表面菌落總數（cfu/

cm2）=

平均每皿菌落數X洗脫液稀釋倍數采樣面積（cm2)結果計算：9物體表面的消毒效果監(jiān)測結果判讀：潔凈手術部、其他潔凈場所，非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)等Ⅰ、Ⅱ類環(huán)境；物體表面細菌菌落總數≤5cfu/cm2兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中

心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病

科門診及其病房等Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境；物體表面細菌菌落總

數≤10cfu/cm210二、手衛(wèi)生效果的監(jiān)測大量文獻表明，手衛(wèi)生是減少醫(yī)院感染最簡單、最有效、最經濟的方法。11手衛(wèi)生效果的監(jiān)測采樣時間：在進行衛(wèi)生手或外科手消毒后，在接觸患者、進行診療活動前采樣。12采樣方法：被檢者五指并攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面積約30cm2，涂擦過程中同時轉動棉拭子;將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，及時送檢。13手衛(wèi)生效果的監(jiān)測14手衛(wèi)生效果的監(jiān)測15檢測方法：將采樣管在混勻器上振蕩20秒或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.0ml

待檢樣品接種于滅茵平皿，每一樣本接種2個平皿，平皿內加入已溶化的

45℃~48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml~18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計數菌落數。16手衛(wèi)生效果的監(jiān)測細茵茵落總數計算方法：細茵茵落總數(cfu/cm2)=平板上菌落數×稀釋倍數17?采樣面積(cm2)手衛(wèi)生效果的監(jiān)測手衛(wèi)生效果的監(jiān)測結果判斷：《醫(yī)務人員手衛(wèi)生規(guī)范》4.4手消毒效果應達到如下相應要求：衛(wèi)生手消毒監(jiān)測的細菌菌落總數應≤10cfu/㎝2外科手消毒監(jiān)測的細菌菌落總數應≤5cfu/㎝218監(jiān)測要求：醫(yī)療機構應每季度對手術室、產房、導管室、層流潔凈病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重癥監(jiān)護病房、新生兒室、母嬰室、血液透析病房、燒傷病房、感染疾病科、口腔科等部門工作的醫(yī)務人員手進行消毒效果的監(jiān)測，當懷疑醫(yī)院感染暴發(fā)與醫(yī)務人員手衛(wèi)生有關時，應及時進行監(jiān)測，并進行相應致病性微生物的檢測。19手衛(wèi)生效果的監(jiān)測三、空氣的消毒效果監(jiān)測20未采用潔凈技術凈化空氣的房間在消毒或規(guī)定的通風換氣后與從事醫(yī)療活動前采樣;或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關時采樣。采用潔凈技術凈化空氣的房間在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動前采樣；采樣時間空氣的消毒效果監(jiān)測21采樣方法：1.潔凈手術部（室）及其他潔凈用房可選擇沉降法或浮游菌法。（1）沉降法：參照GB50333要求進行監(jiān)測。沉降法不適用于空氣中真菌孢子的測定。將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ90mm）放置各采樣點，采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度。監(jiān)測布點如下：22空氣的消毒效果監(jiān)測局部百級、周圍千級：手術區(qū)布放13點，周邊布放8點（每邊內2點）?？諝獾南拘ЧO(jiān)測23局部千級、周圍萬級：手術區(qū)布放5點（雙對角布點)，周邊區(qū)布放6點（長邊內2點，短邊內1點)?？諝獾南拘ЧO(jiān)測24局部萬級、周圍10萬級：手術區(qū)布放3（對角布點），周邊區(qū)布放4點（每邊內1點)?？諝獾南拘ЧO(jiān)測2510萬級：布放5點（避開送風口下方）空氣的消毒效果監(jiān)測2630萬級：面積＞30m2布放4點，面積≤30m2布放2點（避開送風口下方）。面積＞30m2面積≤30m227空氣的消毒效果監(jiān)測(2)浮游菌法可選擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經驗證的空氣采樣器。監(jiān)測時將采樣器置于室內中央0.8m～1.5m高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時間不應超過30min。房間面積＞10m2者，每增加

10m2增設一個采樣點。28空氣的消毒效果監(jiān)測2.未采用潔凈技術凈化空氣的房間采用沉降法：布點方法：室內面積≤30m2，設內、中、外對角線三點，內、外點應距墻壁1m處；空氣的消毒效果監(jiān)測29室內面積＞30

m2，設四角及中央五點，四角的布點位置應距墻壁1m處?？諝獾南拘ЧO(jiān)測30采樣方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ90mm）放置各采樣點，采樣高度為距地面0.8m～1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時間后蓋上平皿蓋及時送檢?？諝獾南拘ЧO(jiān)測31手臂越過平皿×皿蓋朝上×√√空氣的消毒效果監(jiān)測32檢測方法：將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計數菌落數。若懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關時，進行目標微生物的檢測。33空氣的消毒效果監(jiān)測等級手術室名稱沉降法（浮游法）細菌最大平均濃度表面最大染菌空氣潔凈度級別手術區(qū)周邊區(qū)密度（個/cm2）手術區(qū)周邊區(qū)Ⅰ特別潔凈手術室0.2個/30min·Φ90皿（5個/m3）0.4個/30min·Φ90皿（10個/m3）5百級千級Ⅱ標準潔凈手術室0.75個/30min·Φ90皿（25個/m3）1.5個/30min·Φ90皿（50個/m3）5千級萬級Ⅲ一般潔凈手術室2個/30min·Φ90皿（75個/m3）4個/30min·Φ90皿（150個/m3）5萬級十萬級Ⅳ準潔凈手術室5個/30min·Φ90皿（175個/m3）5三十萬級34結果判讀1.潔凈手術部（室）和其他潔凈場所，空氣中的細菌菌落總數要求應遵循GB50333空氣的消毒效果監(jiān)測結果判定2.非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)空氣中的細菌菌落總數≤4cfu/(15min·直徑9cm平皿)3.兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、

化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌

落總數≤4cfu/(5min·直徑9cm平皿)35：注意事項：采樣前，關閉門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min后采樣?？諝獾南拘ЧO(jiān)測36

放置培養(yǎng)皿從總平面中最靠里的房間開始布置，依次向外，最后人員撤出。每間房間也是

從房間最靠里的點開始布置，最后布置門附近

的點，然后人員撤出。收取培養(yǎng)皿的順序相反，從最外邊的房間開始收，每間房間從門附近的

培養(yǎng)皿開始收，最先布置的皿最后收，沉降時

間略有差別。空氣的消毒效果監(jiān)測37適用于無人狀態(tài)下室內空氣的消毒沒有持續(xù)作用需要一定的時間、強度38四、紫外線消毒的效果監(jiān)測紫外線消毒紫外線燈采取懸吊式或移動式直接照射。燈管吊裝高度，安裝時紫外線燈照射強度應≥1.5W/m3，照射時間≥30min。保持紫外線燈表面清潔，每周用75％－80％酒精擦拭

一次。發(fā)現(xiàn)燈管表面有灰塵、距離地面1.8m-2.2m。油污時，應及時擦拭。紫外線燈消毒室內空氣時，房間內應保持清潔干燥，減少塵埃和水霧。溫度<20℃或>40℃時，或相對濕度>60％時，應適當延長照射時間。室內有人時不應使用紫外線燈照射消毒。39紫外線消毒的效果監(jiān)測40紫外線輻照度值的測定監(jiān)測方法：紫外線燈輻照計測定法紫外線強度照射指示卡監(jiān)測法紫外線燈輻照計測定法開啟紫外線燈5min后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，特殊紫外線燈在推薦使用的距離下測定，待儀表穩(wěn)定后，所示數據即為該紫外線燈的幅照度值。41紫外線消毒的效果監(jiān)測紫外線強度照射指示卡監(jiān)測法開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min，紫外線照射后，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。42紫外線消毒的效果監(jiān)測紫外線強度照射指示卡監(jiān)測法5min1min431m使用前合格44√紫外線消毒的效果監(jiān)測結果判定：普通30w直管型紫外線燈，新燈管的輻照強度應符合GB

19258要求；使用中紫外線燈照射強度≥70μW/cm2為合格；30W高強度紫外線新燈的輻射強度≥180μW/cm2為合格。45紫外線消毒的效果監(jiān)測注意事項：測定時電壓220V±5V，溫度20℃～25℃，相對濕度＜60%，紫外線輻照計應在計量部門檢定的有效期內使用；指示卡應在獲得衛(wèi)生部消毒產品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內使用。46紫外線消毒的效果監(jiān)測五、內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測47采樣時間：內鏡清洗消毒后采樣方法：監(jiān)測采樣部位為內鏡的內腔面。用無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集，及時送檢，2小時內檢測。內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測48檢測方法將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經熔化的

45℃-48℃營養(yǎng)瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養(yǎng)48小時后計數。49內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測監(jiān)測結果：消毒后的內鏡合格標準為<20cfu/件，不能檢出致病菌；滅菌后內鏡合格標準為：無菌檢測合格。注意事項：送檢時間≤4小時。如不能及時送檢，將樣品保存于0～4℃冰箱，必須在24小時內送檢。50內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測消毒后的內鏡應當每季度進行生物學監(jiān)測并做好監(jiān)測記錄。滅菌后的內鏡應當每月進行生物學監(jiān)測并做好監(jiān)測記錄。內鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測51六、消毒液的監(jiān)測52采樣方法：1.常用消毒液有效成分含量測定：庫存消毒劑的有效成分含量依照產品企業(yè)標準進行檢測；使用中消毒液的有效濃度測定可用上述方法，也可使用經國家衛(wèi)生行政部門批準的消毒劑濃度紙（卡）進行監(jiān)測。2.使用中消毒液染菌量測定（1）用無菌吸管按無菌操作方法吸取1.0ml被檢消毒液，加入9ml中和劑中混勻。（2）中和劑的選擇：醇類與酚類消毒劑用普通營養(yǎng)肉湯中和；含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑；洗必泰、季銨鹽類消毒劑用含0.3%吐溫80和0.3%卵磷脂中和劑；醛類消毒劑用含0.3%甘氨酸中和劑；含有表面活性劑的各種復方消毒劑可在中和劑中加入吐溫80至3%，也可使用該消毒劑消毒效果檢測的中和劑鑒定試驗確定的中和劑。53消毒液的監(jiān)測采樣時間對使用中的消毒液在有效期前采樣。結果判定使用中滅菌用消毒液無菌生長；使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml，其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml，未檢出致病菌。54消毒液的監(jiān)測注意事項：1.采樣后4h內檢測。2.36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)72h,計菌落數；懷疑與醫(yī)院感染爆發(fā)有關時，進行目標微生物的檢測。3.正確選擇試劑紙條檢測濃度。55消毒液的監(jiān)測七、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測56壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測包括物理監(jiān)測 每次滅菌應連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數。化學監(jiān)測、生物監(jiān)測、B—D測試應遵循WS310.3的要求。化學監(jiān)測：每包進行包外用化學指示膠帶貼封，包內放化學指示卡。57壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測生物監(jiān)測標準生物測試包的制作方法如下：a）標準指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢，菌片含菌及抗力符合國家有關標準；b）標準測試包的制作：由16條41cm×66cm的全棉手術巾制成。制作方法：將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成

23cm×23cm×15cm的測試包；58壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測c）標準生物測試包或生物PCD的制作方法：將至少一個標準指示菌片裝入滅菌小紙袋內或至少一個自含式生物指示劑，置于標準試驗包的中心部位即完成標準生物測試包或生物PCD的制作；d）培養(yǎng)方法：經一個滅菌周期后，在無菌條件下取出標準試驗包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經56℃±1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物按產品說明書執(zhí)行），觀察培養(yǎng)結果；59壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測f）小型壓力蒸汽滅菌器因一般無標準生物監(jiān)測包，應選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌包制作生物測試包或生物PCD，置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應處于滿載狀態(tài)。生物測試包或生物PCD應側放，體積大時可平放；60壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測g）采用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時，應直接將一支生物指示物，置于空載的滅菌器內，經一個滅菌周期后取出，規(guī)定條件下培養(yǎng)，觀察結果；h）可使用一次性標準生物測試包，對滅菌器的滅菌質量進行生物監(jiān)測；61壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測i）注意事項1）監(jiān)測所用菌片或自含式菌管應取得衛(wèi)生部消毒產品衛(wèi)生許可證批件，并在有效期內使用；2）如果1d內進行多次生物監(jiān)測，且生物指示劑為同一批號，則只設一次陽性對照即可。62壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測63B-D測試方法B-D測試包的制作方法：B-D測試包由100%脫脂純棉布或100%全棉手術巾折疊成長30cm±2cm、寬25cm±2cm、高25cm～28cm大小的布包；將專用B-D測試紙，放入上述布包的中間；制成的B-D測試包的重量要求為

4kg±0.2kg?；虿捎靡淮涡允褂没蚍磸褪褂玫腂-D測試包。64壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測B-D測試方法：測試前先預熱滅菌器，將B-D測試包水平放于滅菌柜內滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口底前方；柜內除測試包外無任何物品；在134℃溫度下，時間不超過3.5min，取出測試包，觀察B-D測試紙顏色變化。65壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測結果判定：B-D測試紙均勻一致變色，說明B-D試驗通過，滅菌器可以使用；變色不均說明B-D試驗失敗，可再重復一次B-D測試，合格，滅菌器可以使用；不合格，需檢查B-D測試失敗原因，直至B-D測試通過后該滅菌器方能使用。66壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測八、環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測環(huán)氧乙烷氣體滅菌的物理監(jiān)測法、化學監(jiān)測法和生物監(jiān)測法，應遵循WS

310.3的要求。67物理監(jiān)測法：每次滅菌應連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數?；瘜W監(jiān)測：每個滅菌包使用包內、包外化學指示物，包內化學指示物置于最難滅菌部位。68環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測常規(guī)生物測試包的制作方法如下：a）標準指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢，菌片含菌及抗力符合國家有關標準；b）常規(guī)生物測試包的制作方法：取一個20ml的無

菌注射器，去掉針頭，拔出針栓，將標準生物指示

菌放入針筒內，帶孔的塑料帽應朝向針頭處，再將

注射器的針栓插回針筒（注意不要碰及生物指示物），之后用一條全棉小毛巾兩層包裹，置于紙塑包裝袋中，封裝；69環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測監(jiān)測方法：將常規(guī)生物測試包放在滅菌器最難滅菌的部位（整個裝載滅菌包的中心部位）。滅菌周期完成后應立

即取出指示菌片接種于含有復方中和劑的0.5%的葡萄糖肉湯培養(yǎng)基管中，36℃±1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物應遵循產品說明），觀察培養(yǎng)基顏色變化，同時設陽性對照；70環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測結果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同