植物磷含量的測定

植物磷含量的測定(鉬銻抗比色法)一、 實驗?zāi)康?.掌握鑰銻抗比色法測定磷的方法。練習(xí)實際測量以及定容的操作。練習(xí)分光光度計的使用。二、 實驗原理植物樣品經(jīng)消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。在一定酸度下,待測液中的正磷酸與鑰酸銨和酒石酸銻鉀生成一種三元雜多酸，后者在室溫下能迅速被抗壞血酸還原為藍(lán)色絡(luò)合物，可用吸光光度法測定。三、 實驗試劑2mol/LNaOH溶液0.2%二硝基酚指示劑0.5mol/LH2SO4硫酸溶液:28mL濃H2SO4加水稀釋至1L。鑰銻貯存溶液：量取153ml濃硫酸(分析純，密度1.84g/ml),緩緩加入到400ml蒸餾水中，不斷攪拌，冷去吼另稱取經(jīng)磨細(xì)的鑰酸銨［(NH4)6Mo7O24?H2O,分析純］10g溶于溫度約60笑300ml水中，冷卻。然后將硫酸溶液緩緩倒入鑰酸銨溶液中。再加入0.5%酒石酸銻鉀［KSbOC4H4O6-1/2H2O，分析純］溶液100ml，冷卻后，加水稀釋至1000ml，搖勻，貯于棕色試劑瓶中，此貯備液含鑰酸銨1%，硫酸2.75mol/L。鑰銻抗顯色劑：稱取1.50g抗壞血酸溶于100ml鑰銻貯存溶液中，此溶液有效期不長，宜隨配隨用。5mg/L磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.4394g在50T烘干的磷酸二氫鉀(KH2PO4，分析純)，100ml水，加5ml濃硫酸(防腐)，用水定容到1L，濃度為100mg/L磷(P)，此溶液可以長期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至標(biāo)度，濃度為5mg/L磷(P)標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液不宜久存。四、 實驗步驟1、 吸取定容過濾或澄清后的消煮液2.00?5.00ml(V2，含P5?30ug)于50ml容量瓶中，用水稀釋至約20ml，加1?2滴二硝基酚指示劑，滴加2mol/LNaOH溶液中和至剛呈黃色，再加入1滴0.5mol/LH2SO4溶液，使溶液的黃色剛剛褪去呈淡黃色，然后加入鑰銻抗顯色劑5.00ml，搖勻，用水定容(V3)。在室溫高于15T的條件下放置30min后，用1cm光徑比色槽在波長700nm處測定吸光度，以空白溶液為參比調(diào)節(jié)儀器零點。2、 校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程：準(zhǔn)確吸取p(P)=mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液0、1、2、4、6、8ml，分別放入50mL容量瓶中，加水至20ml,同上步驟顯色并定容，即得0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mg/LP標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，與待測液同時測定、讀取吸光度，然后繪制校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程。五、結(jié)果計算X1000cXVX(V’/VJwp= mx1062X1000式中：Wp——植物磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/kg;c——從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的顯色液中磷的質(zhì)量濃度，mg/L；V1 消煮液定容體積，ml；V2——吸取測定的消煮液體積，ml；V3——顯色液體積，ml；m 稱樣量，g；六、注意事項1、室溫低于15T時，可在30?40笑水浴中，顯色30min。2、植物磷含量0.5g/kg為低量，1.0~2.0g/kg為中量，大于2.0g/kg為高量。十?己）hno3—hcio4消煮法?HNO3:HCIO4=8:2?:?稱取烘干植物樣1g于開氏瓶（消煮管中），加濃HNO3：HCIO4混合酸（8:2）15mL放置數(shù)小時或過夜，然后放在電爐上慢慢升溫加熱,使黃棕色煙