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STYLEREF"標(biāo)題1"852細(xì)胞生物學(xué)1994-2022答案 學(xué)海無涯,書山有路 細(xì)胞生物學(xué)1994-2022答案

中國科學(xué)院1993年攻讀碩士研究生入學(xué)試題《細(xì)胞生物學(xué)》AB卷一、是非題:20題,共20分。

1、溶酶體在動(dòng)物、植物、原生動(dòng)物和細(xì)菌中均有存在。2、干細(xì)胞是一類未分化的,能夠無限分裂增殖的細(xì)胞。

3、在核質(zhì)互相關(guān)系中,細(xì)胞質(zhì)決定著細(xì)胞的類型,細(xì)胞質(zhì)中的基因組決定著細(xì)胞的基因型。4、細(xì)胞對(duì)外界環(huán)境因子反應(yīng)敏感性與細(xì)胞的增殖能力成正比,而與分化程度成反比。5、細(xì)胞分化過程一般是不穩(wěn)定的,可逆的。

6、同一有機(jī)體的不同組織細(xì)胞核仁的大小和數(shù)目都有很大的變化,這種變化和細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的旺盛長(zhǎng)度有關(guān)。

7、把每一染色體上發(fā)現(xiàn)的基因位點(diǎn)繪制成基因圖,稱基因作圖。

8、在使用光學(xué)顯微鏡時(shí),假如物鏡不便,用10的目鏡時(shí)分辨率比用5的目鏡高一倍。9、呼吸鏈酶系和氧化磷酸化作用定位于線粒體基質(zhì)中。10、相對(duì)不溶于水的親脂性小分子能穿過細(xì)胞膜。11、肌纖維的肌質(zhì)網(wǎng)是一種特化的高爾基體。

12、原核生物和真核生物的核糖體亞單位雖不同,膽量這形成的雜交核糖體仍能進(jìn)行蛋白合成。13、線粒體增殖是通過分裂進(jìn)行的,且與細(xì)胞分裂同步。14、按DNA→RNA→蛋白質(zhì)順序傳遞的信息流是不可逆的。

15、在生物膜的脂質(zhì)雙層中含不飽和脂肪酸越多,相變溫度越高,流動(dòng)性也越大。

16、微管和微絲對(duì)膜蛋白的運(yùn)動(dòng)有不同的作用,微管起固定膜蛋白的作用,微絲引起膜蛋白運(yùn)動(dòng)。17、肌細(xì)胞的肌質(zhì)網(wǎng)膜上存在Ca-ATP,它具有把Ca從細(xì)胞質(zhì)運(yùn)到肌質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的功能。

2+

2+

18、mRNA合成從DNA模板的3’末端向5’末端方向挪動(dòng)進(jìn)行,而翻譯過程那么是從mRNA模板的5’末端向3’末端進(jìn)行。

19、單獨(dú)存在的病毒不能繁殖。

20、反應(yīng)A→B的△G=-20KJ·Mol,說明此反應(yīng)不會(huì)自發(fā)進(jìn)行。

-1

二、選擇題:20題,共20分

1、染色體分帶技術(shù)中,C-分帶主要用于顯示著絲粒附近的

A.常染色體B.異染色體C.酸性蛋白D.堿性蛋白2、減數(shù)分裂過程中同源染色體配對(duì)和聯(lián)會(huì)復(fù)合體形成發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期的

A.細(xì)線期B.粗線期C.偶線期D.雙線期3、細(xì)胞間期通常是指A.G1+S相B.G1+S+G2相C.S+G2相D.G0相4、成纖維細(xì)胞所特有的中等纖維蛋白是

A.角纖維蛋白B.波形纖維蛋白C.結(jié)纖維蛋白D.角質(zhì)纖維酸性蛋白

5、與細(xì)胞胞質(zhì)分裂過程有關(guān)的細(xì)胞骨架是A.微絲B.微管C.中等纖維D.微梁系統(tǒng)6、參與魚類細(xì)胞色素顆粒運(yùn)輸?shù)陌l(fā)動(dòng)機(jī)蛋白是A.動(dòng)力蛋白B.肌動(dòng)蛋白C.驅(qū)動(dòng)蛋白D.管蛋白7、通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物活細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)記的細(xì)胞群體都稱為A.celllineB.cellstrainC.celllibraryD.其他8、紅細(xì)胞膜上的帶Ⅲ是一種運(yùn)輸?shù)鞍?,它的主要功能是運(yùn)輸

A.陰離子B.單價(jià)陽離子C.兩價(jià)陽離子D.氨基酸分子

9、小腸上皮細(xì)胞吸收葡萄糖是通過來實(shí)現(xiàn)的A.Na泵B.Na通道C.Na偶聯(lián)運(yùn)輸D.Na交換運(yùn)輸

+

+

+

+

10、在細(xì)胞膜上有些運(yùn)輸?shù)鞍仔纬煽缒さ乃酝ǖ溃试S相當(dāng)大小的帶電荷溶質(zhì)按以下方式過膜A.主動(dòng)運(yùn)輸B.促進(jìn)擴(kuò)散C.協(xié)同運(yùn)輸D.簡(jiǎn)單擴(kuò)散

11、核糖體小亞單位的S6蛋白是A.初級(jí)結(jié)合蛋白B.刺激結(jié)合蛋白C.6S分裂蛋白D.6S核心蛋白12、不少涉及合成甾體激素的酶分布于A.高爾基體B.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C.線粒體D.光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

13、線粒體基質(zhì)的標(biāo)記酶是A.單胺氧化酶B.蘋果酸脫氫酶C.腺苷激酶D.細(xì)胞色素氧化酶14、阻斷膜受體抑制腺苷酸環(huán)化酶的細(xì)菌毒素為

A霍亂毒素B白喉毒素C百日咳毒素D肺炎球菌毒素15、表皮生長(zhǎng)因子的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)到是通過以下方式實(shí)現(xiàn)的

A.活化酪氨酸激酶B.活化腺苷酸環(huán)化酶C.活化磷酸二酯酶D.抑制腺苷酸環(huán)化酶16、動(dòng)物細(xì)胞水分約占A.50%以下B.60%—75%C.75%—85%D.95%以上17、核小體是

A.染色質(zhì)的一種基本結(jié)構(gòu)B.原生動(dòng)物空泡狀核中著色深的小體

C.染色體畸變時(shí)無著絲粒的片段D.真核細(xì)胞中可用蘇木精染色并主要由蛋白質(zhì)和RNA組成的小體18、微細(xì)胞是

A.微生物細(xì)胞的總稱B.細(xì)胞進(jìn)化過程中一類早期出現(xiàn)的原始細(xì)胞C.少數(shù)染色體外包少量細(xì)胞質(zhì)和具完好質(zhì)膜的核質(zhì)體

D.完好的細(xì)胞核從細(xì)胞內(nèi)向外脫出時(shí),攜帶了少量的細(xì)胞之并具有完好的質(zhì)膜

19、原核細(xì)胞遺傳物質(zhì)集中在細(xì)胞的一個(gè)或幾個(gè)區(qū)域中,密度較低,與周圍的細(xì)胞質(zhì)無明確的界限,稱作A.核質(zhì)B.類核C.核液D.核孔20、從熱力學(xué)角度看,生命個(gè)體

A.有時(shí)是開放系統(tǒng),有時(shí)是封閉系統(tǒng),按條件不同而改變B.既是開放系統(tǒng)又是封閉系統(tǒng),是兩者的辯證統(tǒng)一

C.是開放系統(tǒng)D.是封閉系統(tǒng)三、填空題:每題2分,共20分。

1、原核細(xì)胞的呼吸酶定位上,而真核細(xì)胞的呼吸酶定位在。2、構(gòu)成細(xì)胞最基本的要素是、和完好的代謝機(jī)構(gòu)。

3、線粒體內(nèi)膜亞單位亦稱,它由F1小頭(頭部)、和F0(膜部)組成。4、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所特有的標(biāo)志酶是,主要定位。

5、核糖體上可區(qū)分出四個(gè)功能活性位點(diǎn),其中A位點(diǎn)主要在上,二P位點(diǎn)主要在上。6、細(xì)胞間通訊方式為:通過分泌化學(xué)系號(hào)進(jìn)行通訊;B;C。7、原核生物的分裂過程包括:。

8、真核生物mRNA合成加工時(shí),在先導(dǎo)片段5’末端加“帽子”,在3’末端加“尾巴”。9、分裂中期染色體是有兩條所組成,兩者在互相結(jié)合。10、核粒中主要的而又比較穩(wěn)定化學(xué)組成是和。四、問答題:(任選4題,每題10分,共40分)1、簡(jiǎn)述表皮生長(zhǎng)因子調(diào)控細(xì)胞的機(jī)制。

2、舉例說明什么是朊病毒,以及為什么其發(fā)現(xiàn)對(duì)學(xué)術(shù)界震動(dòng)很大?3、簡(jiǎn)述癌基因?qū)W說在細(xì)胞轉(zhuǎn)化的癌變中的意義。

4、圖解說明鐵傳遞蛋白受體介導(dǎo)的內(nèi)吞過程中蛋白質(zhì)的分揀和受體的再循環(huán)。5、簡(jiǎn)述單克隆抗體的制備過程。

中國科學(xué)院1993年攻讀碩士研究生入學(xué)細(xì)胞試題A卷答案

一、是非題

1、-溶酶體幾乎存在于所有的動(dòng)物細(xì)胞中,植物細(xì)胞內(nèi)也有與溶酶體功能相似的細(xì)胞器——圓球體及植物中央液泡。原生動(dòng)物細(xì)胞只有類似溶酶體的結(jié)構(gòu)。2、-考察細(xì)胞全能型與細(xì)胞分化,多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞均已經(jīng)分化。3、+考察核質(zhì)互做、基因組、基因型的概念。4、-細(xì)胞對(duì)外界因子的敏感性受分化程度的影響,但無比例關(guān)系。5、-在個(gè)體發(fā)育中,有一種相同的細(xì)胞類型經(jīng)過細(xì)胞分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能上形成穩(wěn)定性差異,產(chǎn)生不同的細(xì)胞類群的過程稱細(xì)胞分化,但并非不可逆,比如去分化。6、+核仁

通常表現(xiàn)為單一或多個(gè)均勻的球形小體。核仁的大小、形狀和數(shù)目隨生物種類、細(xì)胞類型和細(xì)胞的代謝狀態(tài)而變化。7、+。8、+。考察分辨率的概念。9、-定位于線粒體內(nèi)膜。考察呼吸鏈、氧化磷酸化的概念。在線粒體內(nèi)膜上存在有關(guān)氧化磷酸化的脂蛋白復(fù)合物。在內(nèi)膜上互相關(guān)聯(lián)的有序排列,稱為電子傳遞鏈或呼吸鏈。當(dāng)電子從NADH或FADH2經(jīng)過呼吸鏈傳遞給氧形成水時(shí),同時(shí)伴隨有ADP磷酸化形成ATP。這一過程稱為氧化磷酸化。氧化磷酸化是生成ATP的主要方式,是細(xì)胞內(nèi)能量轉(zhuǎn)化的主要環(huán)節(jié)。10、+物質(zhì)的通透性主要取決于分子的大小、分子的極性。11、-每個(gè)肌細(xì)胞或肌纖維含有許多根肌原纖維。骨骼肌細(xì)胞的收縮單位是肌原纖維,肌原纖維由粗肌絲和細(xì)肌絲裝配形成,粗肌絲的主要成分是肌球蛋白,系祭司的主要成分是肌動(dòng)蛋白,輔以原肌球蛋白和肌鈣蛋白。12、+。13、-。14、-考察中心法那么。15、-相變溫度會(huì)變低。膜脂的流動(dòng)性主要指脂分子的側(cè)向流動(dòng),它在很大程度上由脂分子本身的性質(zhì)決定。一般來說,脂肪酸鏈越短,不飽和程度越高,膜脂的流動(dòng)性也越大。膜脂的流動(dòng)性是生長(zhǎng)細(xì)胞完成各種生理功能所必需的。在細(xì)菌和動(dòng)物細(xì)胞中常是通過增加不飽和脂肪酸的含量來調(diào)節(jié)膜脂的相變溫度,以維持膜脂的流動(dòng)性。16、+。17、+。18、+。19、+。20、-。

二、選擇題

1、BC帶主要顯示著絲粒結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)及其染色體區(qū)段的異染色質(zhì)部分。2、C偶線期主要發(fā)生同源染色體配對(duì)。3、B兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)相為分裂間期,是細(xì)胞增殖的物質(zhì)準(zhǔn)備和積累時(shí)期。4、B波形纖維蛋白。5、A雖然胞質(zhì)分裂時(shí),紡錘體逐漸瓦解消失,但在細(xì)胞中部微管反而增加,其中摻雜有濃密物質(zhì)和囊狀物質(zhì),這一結(jié)構(gòu)稱為中心體。此時(shí),中心體像一條帶聯(lián)系兩個(gè)子細(xì)胞,最后收縮斷裂,細(xì)胞一分為二。6、D。7、C。8、A帶Ⅲ蛋白是紅細(xì)胞膜上Cl-/HCO3-陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)的載體蛋白,其的N端伸向胞質(zhì)基質(zhì)面,折疊成不連續(xù)的水不溶性區(qū)域,為膜骨架蛋白提供結(jié)合位點(diǎn)。9、C在小腸或腎細(xì)胞中,葡萄糖的運(yùn)送是伴隨Na+一起運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞的,所以這種運(yùn)送稱協(xié)同運(yùn)送。10、B膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白分為兩類:一類稱為載體蛋白,一類是通道蛋白。11、A初級(jí)結(jié)合蛋白,在核糖體亞基的組裝過程中,先與rRNA結(jié)合成核糖體亞基核心的核糖體蛋白。它們是核糖體亞基組裝的起始所必需的。它們與rRNA的特定區(qū)域結(jié)合形成核糖體亞基核心,然后其它核糖體蛋白在一次結(jié)合到這個(gè)核心上,結(jié)合成大小亞基,直到完成裝配。12、C光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是合成脂的主要場(chǎng)所,細(xì)胞中幾乎不含有純粹的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。它們只是作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)這一連續(xù)結(jié)構(gòu)的一部分。在某些細(xì)胞中,光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)非常發(fā)達(dá),并具有特殊的功能。13、B。14、C霍亂毒素具有ADP-核糖轉(zhuǎn)移酶活性,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的NAD的ADP核糖基共價(jià)連接到Gs的α-亞基上,致使α-亞基失去GTP酶活性,與α-亞基結(jié)合的GTP不能水解成GDP,結(jié)果GTP永久結(jié)合到Gs的α-亞基上,是α-亞基處于持續(xù)活狀態(tài),因此腺苷酸化化酶不可逆的永久活化。百日咳毒素催化Gi的α-亞基ADP-核糖基化,結(jié)果降低了GTP的α-亞基的結(jié)合能力,使得Gi的α-亞基不能活化,從而阻斷了Ri受體引起的對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的抑制作用。15、A。某些生長(zhǎng)因子與受體結(jié)合后,活化受體本身的酪氨酸激酶活性使靶蛋白的酪氨酸殘基磷酸化,引起細(xì)胞反應(yīng),這條通路的特點(diǎn)是不需要信號(hào)偶聯(lián)蛋白,而是通過本身的酪氨酸激酶活化,這些生長(zhǎng)因子包括:EGFPDGFCFS-1和胰島素等的受體。16、B。17、A。18、D用細(xì)胞松弛素結(jié)合離心技術(shù),可將細(xì)胞分拆為核體和胞質(zhì)體。由于核體外面包有一層細(xì)胞膜和少量胞漿,因此也稱為小細(xì)胞。19、B。20、C。

三、填空題

1、細(xì)胞膜、線粒體內(nèi)膜。2、細(xì)胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA。3、ATP合成酶,柄部。4、葡萄糖-6-磷酸酶。5、50S亞基。6、細(xì)胞間直接接觸,通過信號(hào)分子影響其他細(xì)胞;細(xì)胞間形成間隙連接,使細(xì)胞膜互相溝通,通過交換小分子調(diào)節(jié)代謝反應(yīng)。7、核區(qū)DNA與中膜體接觸,開始復(fù)制;中膜體一分二,開始DNA分裂,形成2個(gè)核區(qū),至最后形成細(xì)胞壁。8、mGpppN(m),polyA。9、染色單體,著絲粒。

7

+

四、問答題

1、表皮生長(zhǎng)因子受體是酪氨酸激酶(RTKs),是細(xì)胞表面的一大類重要受體家族,包括6個(gè)亞族。RTKs多肽鏈只跨膜一次,胞外區(qū)是結(jié)合配體的結(jié)構(gòu)域,胞內(nèi)肽段是酪氨酸蛋白激酶的催化部位,并具有自身磷酸化位點(diǎn)。

表皮生長(zhǎng)因子在胞外與受體結(jié)合并引起構(gòu)象變化。但單個(gè)跨膜α-螺旋是無法傳遞這種構(gòu)象變化的。因此,配體的結(jié)合導(dǎo)致受體二聚化,形成同源或異源二聚體,從而在二聚體內(nèi)彼此互相磷酸化受體胞內(nèi)肽段的酪

氨酸殘基,即實(shí)現(xiàn)了受體的自身磷酸化。自身磷酸化的結(jié)果是激活了受體的酪氨酸蛋白激酶活性,磷酸化的酪氨酸殘基可被含SH2結(jié)構(gòu)域的胞內(nèi)信號(hào)與之結(jié)合。由此引起一系列的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng),終至細(xì)胞生理或基因表達(dá)的改變,從而啟動(dòng)了信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。這條通路的特點(diǎn)是不需要信號(hào)偶聯(lián)蛋白,而是通過受體本身的酪氨酸蛋白激酶的激活來完成信號(hào)的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)。

蛋白激酶的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)的基本步驟如下:①活化的Ras蛋白與Raf的N-端結(jié)構(gòu)域結(jié)合使之活化,Raf是Ser/Thr蛋白激酶(MAPKKK),它使蛋白的Ser/Thr磷酸化,其壽命延長(zhǎng)。②活化的Raf結(jié)合并磷酸化另一種蛋白質(zhì)激酶MAPKK,是蛋白的Ser/Thr磷酸化而活化。③MAPKK是一種雙重特異性的蛋白質(zhì)激酶,它能磷酸化其唯一的底物MAPK的Ser/Thr磷酸化而使之活化。④活化的MAPK進(jìn)入細(xì)胞核,可使許多底物蛋白的Ser/Thr磷酸化,從而修飾她們的活性。RTK→Ras的信號(hào)通路為:配體→RTK→adaptor→GRT→Ras→Raf(MAPKKK)→MAPKK→MAPK→進(jìn)入細(xì)胞核→其它激酶或轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化修飾。

2、朊病毒是一類能侵染動(dòng)物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無免疫性疏水蛋白質(zhì)。是蛋白質(zhì)的病毒,即朊病毒。是綿羊和山羊的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性紊亂疾病的病原具有脫毛、皮膚瘙癢、失去平衡和后肢麻痹等癥狀。朊病毒在電子顯微鏡下呈桿狀顆粒,直徑為25nm,100-200nm長(zhǎng)。桿狀顆粒不單獨(dú)存在,總是呈叢狀排列。這一發(fā)現(xiàn)與目前公認(rèn)的“中心法那么”相抵觸。隨著人們對(duì)朊病毒來源、傳播方式、增殖及遺傳方式、致病機(jī)理等方面的研究,不僅可以組織朊病毒疾病的病理發(fā)生,而且可能為分子生物學(xué)的發(fā)展帶來革命性的影響。同時(shí)還可能為弄清一系列疑難雜癥的病原帶來希望。

3、1972年,R、Huebner和G、Todaro提出了癌基因?qū)W說。主張細(xì)胞癌變是由于病毒基因組引起的。反轉(zhuǎn)錄病毒的癌基因是細(xì)胞基因的組成部分,這可能是在早期進(jìn)化中通過病毒感染獲得的。假如癌基因受到阻遏,那么細(xì)胞可以保持正常狀態(tài),一旦這種阻遏被打破,細(xì)胞即發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,致癌因子如致癌化學(xué)物質(zhì)、輻射等能激活這種潛在的內(nèi)源病毒。在這場(chǎng)情況下,細(xì)胞癌基因的存在不僅是無害的,而且這些基因的按程序有控制的表達(dá)是個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞生長(zhǎng)、組織再生等方面所必需的,即細(xì)胞癌基因不都是病毒癌基因的同源物,在進(jìn)化上是病毒基因來源于細(xì)胞的原癌基因,v-onc是c-onc的復(fù)本,這種親緣關(guān)系與病毒的進(jìn)

化地位吻合。

4、鐵蛋白是一種細(xì)胞質(zhì)內(nèi)查封鐵原子的蛋白,從而保護(hù)細(xì)胞免受游離金屬原子的影響。鐵蛋白mRNA的翻譯受一種特異性阻抑物的調(diào)節(jié),這種阻抑物稱為鐵調(diào)蛋白(IRP),它的活性依賴于細(xì)胞內(nèi)非結(jié)合鐵的濃度。在鐵濃度低時(shí),IRP與鐵蛋白mRNA的5’UTR特意序列結(jié)合,這段特異序列叫鐵應(yīng)答原件(IRE)。結(jié)合的IRP干擾了核糖體與mRNA5’端的結(jié)合,從而抑制了翻譯的起始;在鐵濃度高時(shí),IRP被修飾,因此喪失了對(duì)IRE的親和性,使IRP從鐵蛋白mRNA上解離下來,促使翻譯裝置與mRNA接近,并使編碼的蛋白質(zhì)的以

合成。

5、生產(chǎn)雜交瘤細(xì)胞系的過程大致為:先給小鼠接種一個(gè)抗原,并在幾個(gè)星期內(nèi)連續(xù)接種幾次,單擊此免疫的時(shí)間間隔不能太短,以防動(dòng)物死亡,后檢測(cè)小鼠體內(nèi)是否引起了免疫反應(yīng)。假設(shè)起了免疫反應(yīng),就把小鼠殺死,取出脾臟洗凈磨細(xì),制成B細(xì)胞懸浮液。將制成的B細(xì)胞懸浮液與骨髓瘤細(xì)胞懸浮液混合,由于,免疫動(dòng)物品系與所采用的骨髓瘤細(xì)胞在品系上差距較大,所產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞系穩(wěn)定性差。因此在制備單克隆抗體時(shí)一般采用與骨髓瘤細(xì)胞系來源相同的同一品系動(dòng)物免疫,由于骨髓瘤細(xì)胞系多來自于Balb/c小鼠,所以免疫動(dòng)物是也采用這一品系的小鼠。細(xì)胞交融可以采用仙臺(tái)病毒介導(dǎo),也可以用PEG介導(dǎo)。骨髓瘤細(xì)胞是次黃嘌呤-鳥嘌呤核糖轉(zhuǎn)移酶缺陷型的(HGPRT-)。二者混合后的細(xì)胞懸浮液與35%的PEG或仙臺(tái)

病毒混合幾分鐘后,再轉(zhuǎn)移至一含次黃嘌呤氨基蝶呤和胸腺嘧啶(HAT)培養(yǎng)基中。

由于使用HAT培養(yǎng)基,未交融的脾細(xì)胞、脾-脾交融的細(xì)胞不能生長(zhǎng)。HGPRT-的骨髓瘤細(xì)胞和瘤-瘤交融的細(xì)胞不能利用次黃嘌呤作為前體合成鳥嘌呤、腺嘌呤,從而影響了核苷酸的合成,但可以利用脫氫葉酸還

原酶合成嘌呤,所以加入氨基蝶呤。因此它們均不能合成嘌呤,不能生長(zhǎng)。

這一來就只能有脾-瘤交融的細(xì)胞可以在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng),雖然通過脫氫葉酸還原酶合成嘌呤的途徑被加入氨基蝶呤阻斷了,脾細(xì)胞可以提供有功能的HGPRT,可以加如外源次黃嘌呤;同時(shí)骨髓瘤細(xì)胞提供了很強(qiáng)的細(xì)胞分裂功能。加入的胸腺嘧啶可以克服由于氨基蝶呤抑制脫氫葉酸還原酶而阻礙了嘧啶合成。10-14天后,HAT培養(yǎng)基就只有脾-骨髓瘤細(xì)胞還能存活生長(zhǎng)。由此可以轉(zhuǎn)移到塑料多孔培養(yǎng)板上,在沒有HAT的

培養(yǎng)液中培養(yǎng)生長(zhǎng)。由于大量的非交融細(xì)胞死亡,少數(shù)或單個(gè)分散的細(xì)胞很難存活,所以培養(yǎng)時(shí)通常加入

飼養(yǎng)細(xì)胞,如小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、小鼠脾細(xì)胞、大鼠胸腺細(xì)胞。

小鼠漿細(xì)胞(自變或誘變)小鼠脾細(xì)胞(SRBC免疫,注射X蛋白)

PEG或仙臺(tái)病毒

不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞

B細(xì)胞(帶有X抗體)轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基變非目標(biāo)細(xì)胞大量死亡多孔塑料板內(nèi)培養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞2周親代細(xì)胞死亡雜種細(xì)胞生長(zhǎng)檢測(cè)優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)細(xì)胞接種動(dòng)物生產(chǎn)冷凍保存細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)

中國科學(xué)院1994年攻讀碩士研究生入學(xué)細(xì)胞試題答案

一、是非題

1、-細(xì)胞分裂后

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