細(xì)菌保存方法

細(xì)菌的保存方法微生物作為地球上最早出現(xiàn)的生命形式，是生物中重要的分解代謝類群。微生物的多樣性在維持生物圈生態(tài)平衡和為人類提供廣泛的、大量的未開發(fā)資源方面起著重要的作用。每一個(gè)微生物菌株都具有不同的特性，因此以微生物為對(duì)象，不論是進(jìn)彳丁基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用研究，菌種的保存是微生物學(xué)的基礎(chǔ)。隨著微生物學(xué)的發(fā)展，研究者們不斷挖掘和改進(jìn)了許多菌種的保存方法，針對(duì)不同物種方法有所不同，有的只應(yīng)用于短期保存，有的可以進(jìn)行長期保存。但在細(xì)菌的保存中，有以下幾種方法可普遍采用一、 傳代培養(yǎng)保存法傳代培養(yǎng)是微生物保存的基本方法。其中，培養(yǎng)基的濃度不宜過高，培養(yǎng)溫度應(yīng)稍低于生長最適溫度。雖然此法可以隨時(shí)接種以便復(fù)試，但它也有重要的缺陷，如遺傳性狀容易變異，易發(fā)生污染，需要定期移種等。二、 液體石蠟覆蓋保存法這是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)?shù)难娱L保存時(shí)間。主要適用于放線菌、需氧性細(xì)菌等的保存。在長期保存中，為了防止傳代培養(yǎng)菌由于干燥而死亡，同時(shí)為了限制氧的供應(yīng)以削弱代謝作用，可以在培養(yǎng)基上面覆蓋滅菌的液體石蠟進(jìn)行冷藏。此方法簡單不需要特殊裝置，應(yīng)用范圍廣，保存時(shí)間長（幾年甚至十幾年），但使用的液體石蠟質(zhì)量要高，而且要經(jīng)過數(shù)次高壓滅菌。液體石蠟層的深度以1cm左右為宜。三、 載體保存法使微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體（土壤、砂子等）上進(jìn)行干燥保存也是一種常用的菌種保存方法。這種方法主要用于形成孢子的細(xì)菌的保存。使用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，經(jīng)高壓滅菌后加入菌液。待細(xì)菌繁殖后，移入干燥器，經(jīng)短暫干燥或風(fēng)干后，冷藏或保存于室溫。四、 懸液保存法有些細(xì)菌如放線菌、青枯病假單胞桿菌，使之懸浮于蒸餾水中就能在室溫下保存數(shù)年。而有些細(xì)菌需要保存于糖溶液或磷酸緩沖液中。五、 冷凍保存法大多數(shù)細(xì)菌進(jìn)行冷凍處理都能長期保存?？箖隽?qiáng)的菌株在細(xì)胞外凍結(jié)下不受損傷，但多數(shù)細(xì)胞不論在細(xì)胞外凍結(jié)或在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)，都容易受到損傷。一般來說，加防凍劑如甘油就能防止細(xì)胞外凍結(jié)所引起的損傷。六、 冷凍干燥保存法其原理較為簡單。首先使微生物冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。從菌體除去大部分的水分，細(xì)胞的生理活動(dòng)就會(huì)停止，從而能夠長期維持生活狀態(tài)。以上方法是細(xì)菌學(xué)研究中常用的幾種保存方法，其操作簡便易行，適用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)