醫(yī)學(xué)微生物學(xué)：實(shí)驗(yàn)三

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)三微生物的代謝產(chǎn)物及致病作用分解代謝產(chǎn)物—生化反應(yīng)糖發(fā)酵試驗(yàn)H2S產(chǎn)生試驗(yàn)接種生化管、結(jié)果示教靛基質(zhì)試驗(yàn)合成代謝產(chǎn)物內(nèi)毒素的致病作用:2只家兔/班細(xì)菌溶血、產(chǎn)色素現(xiàn)象---示教細(xì)菌的分解代謝細(xì)菌的生化反應(yīng)：原理：不同細(xì)菌具有不同的酶，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解能力亦不同，因而代謝產(chǎn)物有別。通過(guò)檢測(cè)細(xì)菌的代謝作用和代謝產(chǎn)物，借以鑒別細(xì)菌種類的生化方法。常見(jiàn)的生化反應(yīng)：

1、對(duì)糖的分解代謝：

糖發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、VP試驗(yàn)

2、對(duì)蛋白質(zhì)的分解代謝：

靛基質(zhì)試驗(yàn)、H2S試驗(yàn)

3、其他：尿素酶試驗(yàn)、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)

乳糖乳糖滲透酶葡萄糖酸類物質(zhì)半乳糖苷酶

腸道致病菌多數(shù)不分解乳糖，如傷寒沙門菌、痢疾志賀菌。腸道非致病菌可分解多種糖類，如大腸埃希菌有助于鑒別腸道桿菌培養(yǎng)基：葡萄糖、乳糖培養(yǎng)基指示劑為溴甲酚紫結(jié)果：產(chǎn)酸：分解糖(苷/醇)產(chǎn)酸，培養(yǎng)基變黃色“＋”

產(chǎn)酸產(chǎn)氣：培養(yǎng)基變黃且出現(xiàn)氣泡或裂隙“＋”

不分解：“－”-+-+

靛基質(zhì)（吲哚，Indol）試驗(yàn)

原理：細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的色氨酸→靛基質(zhì)（吲哚）→加入對(duì)二甲基氨基苯甲醛→玫瑰吲哚（紅色）培養(yǎng)基：蛋白胨培養(yǎng)基結(jié)果：上層玫瑰紅色“+”

硫化氫試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解含硫氨基酸

(胱aa、半胱aa)生成H2S，遇Pb2+或Fe2+形成黑色PbS或FeS沉淀培養(yǎng)基：硫化氫培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基變黑“+”+

-

IMViC試驗(yàn)

大腸埃希菌++--

產(chǎn)氣腸桿菌--++

細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物熱原質(zhì)、毒素與侵襲性酶、抗生素、細(xì)菌素、維生素、色素1、溶血素

有的細(xì)菌能產(chǎn)生溶血素，使血平板中的紅細(xì)胞溶解，在菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán)。觀察：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌在血平板上的溶血環(huán)水溶性：色素可擴(kuò)散至培養(yǎng)基中

如：銅綠假單胞菌的色素脂溶性：色素只局限在菌落，大多數(shù)細(xì)菌。

如：金黃色葡萄球菌的色素2、細(xì)菌菌落的色素銅綠各種不同色素一、操作1.糖發(fā)酵試驗(yàn)：葡萄糖、乳糖（各1支/人）接種菌種：大腸或沙門菌2.靛基質(zhì)試驗(yàn)：蛋白胨（1支/人）接種菌種：大腸或沙門菌3.硫化氫試驗(yàn)：硫化氫（1支/人）接種菌種：大腸或沙門菌4.細(xì)菌的鞭毛變異現(xiàn)象觀察

接種變形桿菌至SS平板和普通瓊脂平板（點(diǎn)種）5.平板劃線：血平板（接種金葡或銅綠）1個(gè)/人，普平（接種金葡或銅綠）1個(gè)/人二、示教1.菌落色素、溶血現(xiàn)象觀察：金葡、銅綠在血平板